本发明属于抗细菌感染药物，具体涉及一种能中和细菌毒素的蒲公英提取物及其应用。
背景技术：
1、细菌感染是危害全球人类生命健康的主要病因之一。据统计，2019年全球与细菌感染有关的死亡人数达770万人，占总死亡人数的13.6％。面对棘手的临床细菌感染，目前的应对策略主要是对症使用抗生素、抗菌药和激素等，但副作用和耐药等问题突出，而新型抗生素的研发难度越来越大。虽然疫苗有望降低感染风险，但其研发周期和成本在应对新发、突发公共卫生事件方面仍很有限。并且由于病原体快速的变异能力，多数细菌感染尚缺乏有效的疫苗，这包括最常见的金黄色葡萄球菌。因此，亟需寻找新型替代药物，以应对细菌感染所造成的全球健康危机。
2、研究显示，细菌毒素是细菌感染过程中的主要毒力因子，可引起红细胞溶血、免疫逃逸或组织坏死(cohen ts等,cell rep,2018,22:2431-2441)，严重者可引发炎症风暴造成器官衰竭甚至死亡。因此，针对引起宿主损伤和疾病的毒力因子的治疗方法是一种抗细菌感染的替代方案(“抗毒治疗”)。该法通过干预、调节或破坏细菌的毒力而非“直接”杀死细菌来抑制细菌的生长和增殖，避免细菌对宿主的损害，而且不易产生耐药(m.sakari等，acs infect dis,2022,8:433-456)。目前报道的抗毒治疗策略包括小分子抑制剂、工程化抗体或受体、仿生细胞膜制剂等，他们能与毒素分子或者毒素的受体分子结合，阻止毒素接触和损伤靶细胞(dal peraro m等,nat rev microbiol.2016,14:77-92)。但是以上方法需针对毒素分子的特异构型进行定制设计，制备方法复杂，制备成本高。此外，有专利报道了人工脂质体用于中和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒素(cn113041346a、cn115054577a、cn109549925a)。但单纯的人工脂质膜难以完全模拟细胞膜的成分、结构和功能，存在抗毒谱窄，非特异性、结合力和体内稳定性弱等限制。综上，开发新型的、具有高解毒效率、高稳定性、易生产的药物对于细菌毒素的解毒和抗细菌感染尤为重要。
技术实现思路
1、发明目的：针对上述技术问题，本发明目的是提供一种能中和细菌毒素的蒲公英提取物及其应用。所述蒲公英提取物，成分天然、无毒副作用、生物活性高，制备生产方法简单易行，具有临床转化前景。
2、技术方案：为了达到上述发明目的，本发明所采用的技术方案如下：
3、一种能中和细菌毒素的蒲公英提取物，所述蒲公英提取物主要是由以下方法制备：新鲜蒲公英榨汁，收集汁液，将汁液离心，收集上清液，对上清液进行超滤，收集能通过截留分子量100kd滤膜且不能通过截留分子量3kd滤膜的组分，即为所述蒲公英提取物。
4、所述的蒲公英提取物是一种天然来源的类外泌体纳米囊泡，具有脂膜结构，内部富含有核酸、蛋白质和脂质，在电子显微镜下呈茶托状、杯状或球形，粒径在100-200nm左右。
5、所述的蒲公英提取物，其中具有中和作用的组分主要是滤膜截留分子量在3～100kda的浓缩液，而＞100kd和＜3kd的组分基本无效。
6、作为具体实施方案，所述将汁液离心，条件如下：在0～4℃下，先采用离心力(3000-5000)g离心40-80分钟，再采用离心力(8000-12000)g离心40-80分钟。
7、作为具体实施方案，所述对上清液进行超滤，收集能通过截留分子量100kd滤膜且不能通过截留分子量3kd滤膜的组分，采用的方法包括如下步骤：
8、先用截留分子量为100kd的超滤膜进行超滤，收集滤液，将滤液再用截留分子量为3kd的超滤膜进行超滤，收集未通过超滤膜的截留液。
9、本发明还提供了所述的能中和细菌毒素的蒲公英提取物的制备方法，包括以下步骤：
10、新鲜蒲公英榨汁，收集汁液，将汁液离心，收集上清液，对上清液进行超滤，收集能通过截留分子量100kd滤膜且不能通过截留分子量3kd滤膜的组分，即为所述蒲公英提取物。
11、本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含所述的能中和细菌毒素的蒲公英提取物。
12、作为具体实施方案，所述药物组合物的剂型为注射剂、吸入制剂、口服制剂或外用制剂。
13、本发明还提供了所述的蒲公英提取物，所述的药物组合物在制备中和细菌毒素药物中的应用。所述的蒲公英提取物，其具体中和机制为通过与细菌毒素的直接特异性结合来保护宿主细胞不受攻击。所述毒素包括内毒素、外毒素等能诱导细胞损伤、破裂、炎症和组织损伤等病理反应的毒性物质总称；构成毒素的物质包括蛋白、多肽、脂多糖、外泌体、囊泡等及其组合物。
14、进一步的，所述细菌毒素为细菌内毒素或细菌外毒素；所述细菌毒素来源于革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。更具体地，所述细菌毒素来源于金黄色葡萄球菌或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等。
15、本发明最后提供了所述的蒲公英提取物，所述的药物组合物在制备预防和/或治疗细菌感染、细菌性肺炎或皮肤创面感染药物中的应用。作为药物应用时，可以经由任何适合的剂型和给药途径施用本发明的蒲公英提取物或其药物组合物治疗和/或预防疾病或症状。给药途径包括经鼻腔、口腔黏膜、口服、吸入、静脉内、腹膜内、皮下、肌肉内、皮内、皮肤或创面外用等途径给予。
16、有益效果：本发明中的蒲公英提取物由鲜蒲公英榨汁液、差速离心-超滤分离得到，制备工艺简单；成分天然、无毒副作用、生物活性高，可作为一种新型的抗微生物、抗感染药物，应用于功能性食品、保健品、药品或者功效性化妆品等领域。实验证据表明，该蒲公英提取物可以通过与毒素的直接特异性结合来保护宿主细胞不受攻击，有效中和细菌毒素的毒性，对全身性细菌感染、创面感染、细菌性肺炎等疾病均有有效预防/治疗效果。该发明有望开发为天然植物源抗毒素制剂，对临床相关感染疾病防治和减少抗生素耐药等有重要意义。
1.一种能中和细菌毒素的蒲公英提取物，其特征在于，所述蒲公英提取物主要是由以下方法制备：新鲜蒲公英榨汁，收集汁液，将汁液离心，收集上清液，对上清液进行超滤，收集能通过截留分子量100kd滤膜且不能通过截留分子量3kd滤膜的组分，即为所述蒲公英提取物。
2.根据权利要求1所述的能中和细菌毒素的蒲公英提取物，其特征在于，所述将汁液离心，条件如下：在0～4℃下，先采用离心力(3000-5000)g离心40-80分钟，再采用离心力(8000-12000)g离心40-80分钟。
3.根据权利要求1所述的能中和细菌毒素的蒲公英提取物，其特征在于，所述对上清液进行超滤，收集能通过截留分子量100kd滤膜且不能通过截留分子量3kd滤膜的组分，采用的方法包括如下步骤：
4.权利要求1-3任一项所述的能中和细菌毒素的蒲公英提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1-3任一项所述的能中和细菌毒素的蒲公英提取物。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型为注射剂、吸入制剂、口服制剂或外用制剂。
7.权利要求1-3任一项所述的蒲公英提取物，权利要求5或6所述的药物组合物在制备中和细菌毒素药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述细菌毒素为细菌内毒素或细菌外毒素；所述细菌毒素来源于革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述细菌毒素来源于金黄色葡萄球菌或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
10.权利要求1-3任一项所述的蒲公英提取物，权利要求5或6所述的药物组合物在制备预防和/或治疗细菌感染、细菌性肺炎或皮肤创面感染药物中的应用。
