本发明涉及基因工程和蛋白质工程，具体涉及一种木聚糖酶突变体及其应用。
背景技术：
1、内切木聚糖酶（ec 3.2.1.8）随机水解木聚糖内部的β-1,4-木糖苷键，从而获得大小不一的木寡糖等产物；从而破解细胞壁的半纤维素结构。
2、畜禽动物采食的饲料中大多数为植物性饲料原料，植物性饲料原料的细胞壁中包含木聚糖这一非淀粉多糖组分，尤其是小麦等麦类饲料原料中木聚糖含量占比较高。木聚糖等非淀粉多糖物质到达畜禽的消化道内能够增加食糜的粘度，减少营养物质与蛋白酶、淀粉酶等内源酶的接触，降低饲料利用率，更多的营养物质到达畜禽后肠被有害微生物利用，影响畜禽消化道健康，并产生料便、拉稀、糊肛等问题。
3、外源添加木聚糖酶可降解木聚糖生成木二糖、木三糖等木寡糖，一方面能够降低畜禽消化道内食糜粘度，提高饲料利用率，另一方面生成的木寡糖可作为益生元促进肠道有益菌的繁殖，改善畜禽肠道环境，解决畜禽料便、拉稀、糊肛等问题。因此，饲料中普遍添加了木聚糖酶，从而提高饲料的消化吸收率，改善畜禽的生产性能，降低饲料成本。
4、gh11家族木聚糖酶比活较高，但是耐温性较差。在饲料生产过程中，高温制粒（80-85℃）极易导致木聚糖酶失活。通过定向进化和半理性设计改造提升酶的耐温性，是解决该问题的重要手段。
技术实现思路
1、本发明为解决现有技术问题，对来自瘤胃厌氧真菌（ neocallimastix frontalis）的木聚糖酶进行蛋白质工程改造，筛选获得了耐高温木聚糖酶突变体。所述突变体可广泛应用于饲料加工领域。
2、本发明一方面涉及一种木聚糖酶突变体，是氨基酸序列为seq id no:2的木聚糖酶的第128位氨基酸由asn突变为leu。
3、本发明一方面涉及一种木聚糖酶突变体，是氨基酸序列为seq id no:2的木聚糖酶的第128位氨基酸由asn突变为leu，和第212位氨基酸由gly变为val。
4、所述木聚糖酶突变体的氨基酸序列为seq id no:5或seq id no:7。
5、本发明还涉及编码上述木聚糖酶突变体的dna分子。
6、本发明还涉及包含上述dna分子的重组表达质粒。
7、本发明还涉及一种宿主细胞，包含上述重组表达质粒。
8、将上述质粒转入宿主细胞中，重组表达的木聚糖酶突变体的耐热性得到显著提升。
9、在本发明的一些实施例中，宿主细胞为毕赤酵母（ pichia pastoris）。
10、本发明在野生型木聚糖酶pt基础上，提供了分别含n128l、g212v单个突变位点的木聚糖酶突变体，其在95℃条件下处理5min后，酶活残留率分别提高了21.5%和16.4%；本发明提供的包含n128l和g212v两个突变位点组合的突变体在95℃条件下处理5min后，酶活残留率高达90.16%，耐热性比单点突变体进一步增强，取得了意料不到的技术效果。所述木聚糖酶突变体具有更强的耐热性，比野生型更适合应用于饲料领域，前景广阔。
1.一种木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体是氨基酸序列为seq id no:2的木聚糖酶的第128位氨基酸由asn突变为leu。
2.一种木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体是权利要求1所述木聚糖酶突变体的第212位氨基酸由gly突变为val。
3.编码权利要求1或2所述木聚糖酶突变体的dna分子。
4.包含权利要求3所述dna分子的重组表达质粒。
5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求4所述的重组表达质粒；所述宿主细胞为毕赤酵母（pichia pastoris）。
