本发明涉及生物医药，具体而言，涉及一种il10突变体、融合蛋白和药物。
背景技术：
1、白介素10(interleukin 10，il10)也被称为人类细胞因子合成抑制因子(csif)，是一种抗炎细胞因子，属于同源二聚体分泌物。具有非常广泛的生物活性。il10即有抑制单核细胞，巨噬细胞和t细胞的激活和效应功能的能力，也具有促炎症功能。目前临床上的il10蛋白存在安全性问题，少量的天然二聚化的il10分子与其受体il10rα高亲和力结合后，进一步与il10rβ结合，形成六聚体复合物并激活下游信号，引起生物学功能反应。
2、目前的临床il10药物分子缺乏靶向性，药物分子容易脱靶，并产生副作用；而大部分在开发的il10抗体融合蛋白，其是利用抗体靶向作用将il10引到局部环境中发挥作用。这些融合蛋白分子中的il10往往会形成正常的il10二聚体结构，但是由于il10二聚体与il10rα高亲和力结合，会影响抗体端的靶向作用，在抗体的靶标缺乏的情形下也会产生il10活性，带来副作用，并且如果抗体端的活性需求剂量较大，则il10的剂量也相应增大，这种情形下il10端的副作用仍然是一个棘手的问题。
技术实现思路
1、本发明提供一种il10突变体、融合蛋白和药物，具体而言，本本发明提供一种il10突变体、融合蛋白、核酸分子、重组载体、重组细胞、药物组合物、以及治疗方法。
2、具体地，一方面，本发明提供一种il10突变体，其相对于seq id no.1在如下位点中的至少一处具有氨基酸突变：p20、r24、r27、k34、t35、q38、d41、l46、l48、e50、s141、d144、i145、n148、t155、和r159。在一些实施例中，其相对于seq id no.1在如下位点中的至少一处具有氨基酸突变：p20、r24、t35、d41、l46、l48、e50、s141、i145、t155、和r159。
3、在另一方面，本发明还提供一种融合蛋白，其包括前述的il10突变体。
4、在另一方面，本发明还提供一种分离的核酸分子，其编码前述的il10突变体或融合蛋白。
5、在另一方面，本发明还提供一种重组载体，其含有前述的核酸分子。
6、在另一方面，本发明还提供一种重组细胞，其含有前述的核酸分子或重组载体。
7、在另一方面，本发明提供药物组合物，其包括前述的il10突变体，融合蛋白，核酸分子，重组载体，或重组细胞。
8、在另一方面，本发明提供一种治疗肿瘤的方法，其包括向需要治疗的主体施用治疗有效量的前述的药物组合物。
9、在另一方面，本发明提供前述的il10突变体、融合蛋白、核酸分子、重组载体、和重组细胞在制备用于预防或治疗肿瘤的药物中的应用。
10、本发明提供的il10突变体的有益效果包括：其与il10受体的结合活性弱，当其与抗体融合后，在抗体的靶标存在下融合蛋白才显示出il10活性，副作用减少，提高安全性。
1.一种il10突变体，其特征在于，其相对于seq id no.1在如下位点中的至少一处具有如下氨基酸突变：p20、r24、r27、k34、t35、q38、d41、l46、l48、e50、s141、d144、i145、n148、t155、和r159。
2.根据权利要求1所述的il10突变体，其特征在于，其相对于seq id no.1在如下位点中的至少一处具有如下氨基酸突变：p20、r24、t35、d41、l46、l48、e50、s141、i145、t155、和r159；
3.根据权利要求2所述的il10突变体，其特征在于，所述il10突变体相对于seq idno.1在如下位点具有如下氨基酸突变：i145；
4.根据权利要求3所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体相对于seq idno.1在如下位点中的至少一处还具有如下氨基酸突变：p20、r24、r27、k34、t35、q38、d41、l46、l48、e50、s141、d144、n148、t155、和r159。
5.根据权利要求3-4任一项所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体相对于seq id no.1还具有如下突变中的至少一种：
6.根据权利要求1或2所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体相对于seq idno.1具有如下氨基酸突变中的至少一种：p20g、p20f、r24g、r24p、r27d、r27g、t35r、d41w、l46g、l48g、e50g、s141l、s141f、s141q、t155r、r159e、和r159h。
7.根据权利要求6所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体相对于seq idno.1在如下位点中的至少一处还具有如下氨基酸突变：k34、q38、l46、d144、n148、和i145。
8.根据权利要求7所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体相对于seq idno.1还具有如下氨基酸突变中的至少一种：k34s、k34d、q38p、l46k、d144s、n148e、i145g、i145a、i145r、i145l、i145k、i145n、i145m、i145d、i145f、i145c、i145p、i145q、i145s、i145e、i145t、i145w、i145h、i145y、和i145v。
9.根据权利要求1-2、6-8中任一项所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体相对于seq id no.1具有如下氨基酸突变：
10.根据权利要求1-9任一项所述的il10突变体，其特征在于，所述il-10突变体与seqid no.1具有至少80％的同一性；
11.根据权利要求1-10任一项所述的il10突变体，其特征在于，所述il10突变体选自单体或二聚体；
12.一种融合蛋白，其特征在于，其包括权利要求1-11任一项所述的il10突变体。
13.根据权利要求12所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括抗原结合分子，所述il10突变体连接至所述抗原结合分子；
14.根据权利要求13所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫检查点分子选自pd-1、cd137、cd134、kir、lag-3、pd-l1、ctla-4、b7.1、b7h3、ccry、ox-40和cd40。
15.根据权利要求13或14所述的融合蛋白，其特征在于，所述抗原结合分子为抗体或其抗原结合片段；
16.根据权利要求12-15任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述il10突变体相对于seq id no.1具有如下氨基酸突变中的至少一种：k34s、k34d、q38p、l46k、和d144s。
17.一种分离的核酸分子，其特征在于，其编码如权利要求1-11任一项所述的il10突变体，或权利要求12-16任一项所述的融合蛋白。
18.一种重组载体，其特征在于，其含有权利要求17所述的核酸分子。
19.一种重组细胞，其特征在于，其含有权利要求17所述的核酸分子，或含有权利要求18所述的重组载体。
20.如权利要求1-11任一项所述的il10突变体、如权利要求12-16任一项所述的融合蛋白、如权利要求17所述的核酸分子、如权利要求18所述的重组载体、或如权利要求19所述的重组细胞在制备用于预防或治疗肿瘤的药物中的应用。
21.一种制备如权利要求1-11任一项所述的il10突变体或如权利要求12-16任一项所述的融合蛋白的方法，其特征在于，其包括：培养表达所述il10突变体或所述融合蛋白的细胞，从培养产物中分离纯化得到所述il10突变体或所述融合蛋白。
22.一种药物组合物，其特征在于，其包括如权利要求1-11任一项所述的il10突变体，权利要求12-16任一项所述的融合蛋白，权利要求17所述的核酸分子，权利要求18所述的重组载体，或权利要求19所述的重组细胞。
23.一种治疗肿瘤的方法，其特征在于，其包括：向需要治疗的主体施用治疗有效量的如权利要求1-11任一项所述的il10突变体、权利要求12-16任一项所述的融合蛋白、或权利要求22所述的药物组合物。
