本发明涉及植物技术领域，具体为一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法。
背景技术：
红掌属于多次开花类型，具有一叶对应一花的生长结构特征，其叶片常年处于轮替的源库状态，因此碳同化产物在叶与花之间供应的重点很难被监测到，商业化生产中通常采用摘除叶片的方法加速红掌苞片的出现，但是减少叶面积也会导致后续花序碳源的短缺，因此明确碳同化产物在红掌叶与花之间的流动方向和强度，可以使红掌的开花调控不再盲目进行，利用光合仪对植物叶片的净光合速率进行测定，可以通过比较叶片净光合速率的大小判断叶片的源库状态，但红掌叶片碳同化产物的输出方向，即红掌在“一叶一花”轮替中每个生长阶段侧重生长的是当轮的苞片还是下一轮的叶，这无从得知，且红掌叶片初期被包裹在鳞叶中，钻出鳞叶后会继续保持一段时间的卷曲状，这种状态的净光合速率无法测定，所以本发明提出一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，具备高效的优点，解决了传统的检测方法会导致后续花序碳源的短缺的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，包括如下步骤：
s1、准备处于不同发育时期的红掌；
s2、红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；
s3、13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；
s4、实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；
s5、样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
优选的，所述步骤二中选用的光合仪为li6400xt(美国li-cor)型号。
优选的，所述步骤三中的透明保鲜袋扎紧后6l。
优选的，所述步骤四中烘干时的温度保持在70-75℃，筛网选择80目。
优选的，所述步骤五中r是指样品或标准样pdb的13c/12c同位素比值。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
通过采用本发明设计的鉴定方法，在借助净光合速率测定的基础之上，对不同发育时期的红掌叶片进行了13co2饲喂，通过测定叶片、苞片等组织中稳定同位素值δ13c，更加准确、有效的鉴定红掌在不同发育时期营养流动的方向及通量大小，能够及时掌握红掌的发育时期和状态，对红掌及时采取进一步的干预措施有很好的指导意义，该发明将为生产中调控红掌及具有“一叶一花”特征的其他天南星科植物的生长发育提供更好的指导。
附图说明
图1为本发明流程示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供一种技术方案：
一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，包括如下步骤：
s1、准备处于不同发育时期的红掌；
s2、红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；
s3、13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；
s4、实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；
s5、样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
实施例一：
准备处于不同发育时期的红掌；红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
实施例二：
在实施例一中，再加上下述工序：
步骤二中选用的光合仪为li6400xt(美国li-cor)型号。
准备处于不同发育时期的红掌；红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
实施例三：
在实施例二中，再加上下述工序：
步骤三中的透明保鲜袋扎紧后6l。
准备处于不同发育时期的红掌；红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
实施例四：
在实施例三中，再加上下述工序：
步骤四中烘干时的温度保持在70-75℃，筛网选择80目。
准备处于不同发育时期的红掌；红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
实施例五：
在实施例四中，再加上下述工序：
步骤五中r是指样品或标准样pdb的13c/12c同位素比值。
准备处于不同发育时期的红掌；红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
1.一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，其特征在于：包括如下步骤：
s1、准备处于不同发育时期的红掌；
s2、红掌光合作用的测定：选取目的发育时期的叶片，轻轻擦拭叶片，保证测试叶片的干净，使用光合仪检测测试叶片的净光合速率，连续测定24小时；
s3、13c同位素示踪：对不同时期的红掌叶片进行13co2标记吸收，选择8l透明保鲜袋，每日07:00-08:00分别套在整个叶片上，封口处用脱脂棉围裹一圈，以防漏气和捆扎损伤叶柄；收口扎紧前向保鲜袋内，用气密性进样针注入20ml13co2；然后扎紧封口，轻微摇晃气袋使标气混合均匀，待其反应，每日18:00再解开套袋，让标记叶片恢复，如上处理，每天相应时间重复进行，持续处理3天；
s4、实验结束后，将材料在正常生长条件下放置24-48小时后采收叶片及其对应的佛焰苞，各处理分别以未标记的叶片和对应的佛焰苞作为ck对照，采集的叶片及佛焰苞洗净后，烘干至恒重，研磨过筛，准确称量30mg/样，封袋送测试；
s5、样品利用稳定同位素比率质谱仪(thermofisherscientific，waltham，ma，usa)分析焚烧后样品的co2，再与碳稳定同位素标准样(peedeebelemnite，pdb)相比较，经计算得到测定样品的叶片稳定同位素值(δ13c)：
δ13c(‰)＝(r样品/r标准样-1)×1000。
2.根据权利要求1所述的一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，其特征在于：所述步骤二中选用的光合仪为li6400xt(美国li-cor)型号。
3.根据权利要求1所述的一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，其特征在于：所述步骤三中的透明保鲜袋扎紧后6l。
4.根据权利要求1所述的一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，其特征在于：所述步骤四中烘干时的温度保持在70-75℃，筛网选择80目。
5.根据权利要求1所述的一种红掌不同发育时期碳同化产物主要流动方向的鉴定方法，其特征在于：所述步骤五中r是指样品或标准样pdb的13c/12c同位素比值。
技术总结