番茄SlZHD10基因及其应用的制作方法

番茄slzhd10基因及其应用
技术领域
1.本发明涉及一种番茄slzhd10基因及其应用，属于生物技术领域。


背景技术：

2.种子是园艺生产的重要基础，种子的质量直接影响农业生产的进行。番茄（solanum lycopersicuml.）是世界范围内广泛种植的重要蔬菜作物，而我国的番茄种植面积和产量都位居世界前列。我国的番茄生产通常采用穴盘育苗和设施栽培，对种子的萌发率有较高的要求，种子萌发率低会导致出苗不整齐和用种量的提高，从而延迟栽种计划和增加生产成本。因此，提高番茄种子的萌发率对农业生产具有重要意义。
3.番茄slzhd10基因编码的蛋白属于锌指同源域（zhd，zinc finger
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homodomain）转录因子家族，已有研究表明，该家族蛋白在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要作用，但还没有其参与调控番茄种子萌发的报道。
4.crispr/cas9是一种简单易行且成本较低的基因编辑技术，通过靶点的精准修饰，可以定向改良植物性状，从而加速育种进程。然而，目前还没有通过crispr/cas9技术敲除slzhd10基因，从而提高番茄种子萌发率的方法。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于针对上述问题，提供一种番茄slzhd10基因及其应用，本发明提供了番茄slzhd10基因（序列如seq id no：1所示）及其编码蛋白（序列如seq id no：2所示），和slzhd10基因组编辑材料在提高种子萌发率中的应用。
6.一种番茄slzhd10基因，其特征在于：其序列如seq id no：1所示，seq id no：1为：atggaacacagaggccaagaaaaggatatgggcttgcctaatcccaatcccatgagttataacccatctcaacttaaccagcaagaatcatcttcctctgcagcaaacaagttccttaccgcaccaaatagaacaacaaatgaacatgagaataccatttttagccctaaccaaaccctagatcagcataatattactcaaaattcagatccagatccagttcgacaactatctactagttcagcaagtgagaggaatattacccccgtccggtacaaagaatgtctcaaaaatcatgctgcaaatttgggaggatatgtactagacggttgcggagaattcatgccaagcggagaagaggagacactagaatacctgaaatgtgcagcttgtgattgtcaccgcaattttcataggaaagagactgaggacgaatcacaaacacctggtgtgcatagaaataaccaccgtatacccaaccaaactccgccttctcttccagctgtgcctacgcagcaacaacaccatcataaataccctcacagctatccaagaggtcacatggcaccagtaatgatgagtttcggcgggaacacgggagttgcagctgaatcatcaagtgaagatctgaatatgtttcacggaggacaaggggtaattcagccttgtaatttttcggcatcgaagaagagatttcgaacgaaattcagtcaacaacagaaagatagaatgctagagttcgctgagaaactgggatggagaattcagaaacaagatgaacaagaagtgcatcaattttgtaatgaagtgggcgtgaagagacaagtgttcaaagtgtggatgcacaacagcaaacaagcaaccaagaagaaacaaaattaa其编码的蛋白序列如seq id no：2所示，seq id no：2为：mehrgqekdmglpnpnpmsynpsqlnqqessssaankfltapnrttnehentifspnqtldqhnitqns
green pcr master mix（takara，japan）于实时荧光定量pcr仪（cfx96，bio
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rad，usa）进行分析。使用番茄sltip41为内参基因，基因相对表达量采用2
‑△△
ct
方法计算。实时定量pcr引物为qrt
‑
sltip41
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f：tcagtgggaggattgtaagg（seq id no.14），qrt
‑
sltip41
‑
r：ggttctttagacgccaatgc（seq id no.15），qrt
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s1zhd10
‑
f：atccagatccagttcgacaa（seq id no.16），qrt
‑
s1zhd10
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r：atcacaagctgcacatttca（seq id no.17）。结果如图2c所示，slzhd10的表达量呈逐渐下降的趋势，这进一步说明了番茄slzhd10基因负向调控种子萌发。
18.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明利用crispr/cas9基因编辑技术构建番茄slzhd10突变体，对slzhd10基因进行功能研究。本发明通过实验证明，番茄slzhd10基因编辑材料的种子在正常条件下及nacl胁迫下的萌芽率显著高于野生型番茄种子，说明slzhd10基因在番茄种子萌发的过程发挥负向调控作用。slzhd10基因新功能的发现为创制高萌发率的番茄种质材料提供了依据，具有良好的应用前景。

技术特征：
1.一种番茄slzhd10基因，其特征在于：其序列如seq id no：1所示，seq id no：1为：atggaacacagaggccaagaaaaggatatgggcttgcctaatcccaatcccatgagttataacccatctcaacttaaccagcaagaatcatcttcctctgcagcaaacaagttccttaccgcaccaaatagaacaacaaatgaacatgagaataccatttttagccctaaccaaaccctagatcagcataatattactcaaaattcagatccagatccagttcgacaactatctactagttcagcaagtgagaggaatattacccccgtccggtacaaagaatgtctcaaaaatcatgctgcaaatttgggaggatatgtactagacggttgcggagaattcatgccaagcggagaagaggagacactagaatacctgaaatgtgcagcttgtgattgtcaccgcaattttcataggaaagagactgaggacgaatcacaaacacctggtgtgcatagaaataaccaccgtatacccaaccaaactccgccttctcttccagctgtgcctacgcagcaacaacaccatcataaataccctcacagctatccaagaggtcacatggcaccagtaatgatgagtttcggcgggaacacgggagttgcagctgaatcatcaagtgaagatctgaatatgtttcacggaggacaaggggtaattcagccttgtaatttttcggcatcgaagaagagatttcgaacgaaattcagtcaacaacagaaagatagaatgctagagttcgctgagaaactgggatggagaattcagaaacaagatgaacaagaagtgcatcaattttgtaatgaagtgggcgtgaagagacaagtgttcaaagtgtggatgcacaacagcaaacaagcaaccaagaagaaacaaaattaa；其编码的蛋白序列如seq id no：2所示，seq id no：2为：mehrgqekdmglpnpnpmsynpsqlnqqessssaankfltapnrttnehentifspnqtldqhnitqnsdpdpvrqlstssasernitpvrykeclknhaanlggyvldgcgefmpsgeeetleylkcaacdchrnfhrketedesqtpgvhrnnhripnqtppslpavptqqqhhhkyphsyprghmapvmmsfggntgvaaesssedlnmfhggqgviqpcnfsaskkrfrtkfsqqqkdrmlefaeklgwriqkqdeqevhqfcnevgvkrqvfkvwmhnskqatkkkqn。2.权利要求1所述基因或蛋白质在能提高番茄种子萌发率中的应用。
技术总结
本发明涉及一种番茄SlZHD10基因及其应用，其序列如SEQ ID NO：1所示；其编码的蛋白序列如SEQ ID NO：2所示。还包含番茄SlZHD10基因用于构建SlZHD10番茄基因组编辑材料的应用，该材料能提高种子萌发率。通过本发明，本发明首次构建了SlZHD10番茄基因组编辑材料，并进行功能研究，发现该基因在种子萌发过程中起调控作用。控作用。控作用。


技术研发人员：钱红梅 全珠玲 祁典 蔡丛希
受保护的技术使用者：扬州大学
技术研发日：2021.04.06
技术公布日：2021/6/29