一种无水酵母精华滤液及其制备方法与流程

1.本发明涉及一种无水酵母精华滤液及其制备方法，属于化妆品技术领域。


背景技术：

2.二裂酵母溶胞物是经双歧杆菌培养、灭活及分解得到代谢产物、细胞质片段、细胞壁组分及多糖复合体。它具有很强的抗免疫抑制活性并能促进dna修复，可有效保护皮肤，不受紫外线引起的损伤，用于乳化、水基及水醇体系的护肤、防晒及晒后护理产品，帮助预防表皮及真皮的光老化。
3.酵母菌发酵产物滤液提取物是酵母菌经发酵后去除酵母菌把分泌物提炼出来的产物。其中富含小分子氨基酸、多肽、核苷酸、维生素等天然活性成分物质，是非常好的综合皮肤调理剂。
4.酵母提取物是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末。其中氨基酸含量30％以上，总蛋白50％以上，核苷酸10％以上，在化妆品中具有保湿、赋活等功效，提高皮肤抗自由基能力，使老化的表皮恢复弹性，延缓皮肤衰老。
5.但是，普通的二裂酵母溶胞物、酵母菌发酵产物滤液提取物或酵母提取物存在皮肤吸收率不足，导致养护肌肤的产品效果不够理想，给使用者带来困扰。


技术实现要素：

6.本发明提供了一种无水酵母精华滤液及其制备方法，可以有效解决上述问题。
7.本发明是这样实现的：
8.一种无水酵母精华滤液，包括二裂酵母溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物、酵母提取物、纯露及甘油。
9.作为进一步改进的，所述二裂酵母溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物、酵母提取物、纯露及甘油的质量体积比为0.5
‑
5mg：0.5
‑
5mg：0.5
‑
5mg：15
‑
25ml：1.5
‑
2.5ml。
10.作为进一步改进的，所述二裂酵母溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物、酵母提取物、纯露及甘油的质量体积比为2mg：2mg：2mg：18ml：2ml。
11.作为进一步改进的,所述纯露为玫瑰纯露。
12.一种无水酵母精华滤液的制备方法，包括以下步骤：
13.s1，将纯露和甘油混合均匀，得纯露混合液；
14.s2，将二裂酵母溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物、酵母提取物及纯露混合液混合，搅拌均匀，灭菌后冷藏。
15.作为进一步改进的，所述二裂酵母溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物、酵母提取物、纯露及甘油的质量体积比为0.5
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5mg：0.5
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5mg：0.5
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5mg：15
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25ml：1.5
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2.5ml。
16.作为进一步改进的，所述二裂酵母溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物、酵母提取物、纯露及甘油的质量体积比为2mg：2mg：2mg：18ml：2ml。
17.作为进一步改进的,所述纯露为玫瑰纯露。
18.一种上述无水酵母精华滤液在制备护肤品中的应用。
19.本发明的有益效果是：
20.本发明的无水酵母精华滤液含有二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和酵母发酵产物滤液提取物，用纯露进行溶解，溶解出其中的多种活性物质，同时溶液呈微乳形式，能够提高皮肤对这类营养物质的吸收效率，各活性物质相互配合，在增加皮肤水分含量，改善皮肤干燥，具有良好的祛除皱纹的效果。
21.本发明的无水酵母精华滤液含有二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和酵母发酵产物滤液提取物，其中多种活性成分作用途经多样、安全、无不良反应。
22.本发明的的无水酵母精华滤液采用玫瑰纯露，能够有效溶解出二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和酵母发酵产物滤液提取物中多种活性成分，多种活性成分发挥协同增效的作用，从而有效提高了皮肤水分含量。
附图说明
23.为了更清楚地说明本发明实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
24.图1是本发明试验例1提供的皮肤含水量增加率图。
25.图2是本发明试验例2提供的皱纹去除效率图。
26.图3是本发明试验例4提供的肌肤补水随时间的变化图。
27.图4是本发明实施例2的提供的皮肤含水量变化图。
具体实施方式
28.为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施方式中的附图，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。因此，以下对在附图中提供的本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
29.在本发明的描述中，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
30.实施例1
31.1.二裂酵母发酵溶胞物的制备
32.(1)将长型双歧杆菌接种于培养基中厌氧发酵培养，接种量为10％(v:v)，初始ph
为6.6
‑
7.0，厌氧发酵的培养温度为37
‑
40℃，时间为13h静置培养。发酵培养基质量配比为(质量/体积)：酵母粉1.5％、葡萄糖2.0％、酪蛋白胨1.5％、牛肉蛋白胨1.0％、水解乳蛋白1.5％、无水乙酸钠0.5％、柠檬酸三铵0.2％、吐温
‑
80 0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锰0.02％和磷酸氢二钾0.05％。
33.(2)培养结束后，轻微振荡摇匀菌液，采用超声波破碎法，在低温的条件下进行破碎细胞壁，超声5
‑
6s/次，循环15次。
34.(3)破碎结束后，加入少量的悬浮剂轻微用移液枪吸打，使其完全的融合，高速低温离心(
‑
20℃)，转速为12000r/min，弃上清保留沉淀物质。
35.(4)取沉淀物进行低温冷冻干燥，制备成二裂酵母发酵溶胞物。
36.2.酵母发酵产物滤液提取物的制备
37.培养基为26.7ml 85％磷酸，20g/l蛋白胨，18.2g/l硫酸钾，14.9g/l七水硫酸镁，0.93g/l二水硫酸钙，4.13g/l氢氧化钾；使用25％的氨水调节ph至5.5，接种酵母菌，接种量为10％。在21℃培养24小时后，发酵3天，得到发酵物；再将上述发酵物经过均质、离心后，取上清液过滤后，得到酵母菌发酵产物滤液。所述酵母菌发酵产物滤液经超滤浓缩之后冻干后得到酵母发酵产物滤液提取物。
38.3.酵母提取物的制备
39.上述发酵物经过均质、离心后后所得菌体，用去离子水反复冲洗，离心去除上清，反复洗涤3次之后得到菌体。采用低温超声破碎法对酵母菌进行超声破碎，破碎完成之后离心取上清液，重复破碎三次。收集上清液随后进行超滤浓缩，随后进行低温冻干得酵母提取物。
40.4.纯露混合液的制备：用量筒量取180ml的玫瑰纯露与20ml的甘油混合，不断搅拌至完全融合，放置在4℃冰箱冷却备用。
41.5.物质s8制备：准确称量二裂酵母发酵溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物和酵母提取物各2.0mg依次加入到纯露混合溶液20ml中，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。
42.对比例1
43.物质s1制备：准确称量制备好的二裂酵母发酵溶胞物2.0mg，加入到纯露混合溶液20ml，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。其中，纯露混合溶液的制备与实施例1相同。
44.对比例2
45.甘油混合液的制备：用量筒量取180ml的去离子水与20ml的甘油混合，不断搅拌至完全融合，放置在4℃冰箱冷却备用。
46.物质s2制备：准确称量制备好的二裂酵母发酵溶胞物2.0mg，加入到甘油混合液20ml，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。
47.对比例3
48.物质s3制备：准确称量酵母发酵产物滤液提取物2.0mg加入到纯露混合溶液20ml中，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。其中，酵母发酵产物滤液提取物和纯露混合溶液的制备与实施例1相同。
49.对比例4
50.物质s4制备：准确称量酵母发酵产物滤液提取物2.0mg加入到甘油混合液20ml中，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。其中，酵母发酵产物滤液提取物的制备与实施例1相同，甘油混合液的制备同对比例2。
51.对比例5
52.物质s5制备：准确称量酵母提取物2.0mg加入到纯露混合溶液(20ml)中，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。其中，酵母提取物和纯露混合溶液的制备同实施例1。
53.对比例6
54.物质s6制备：准确称量酵母提取物2.0mg加入到甘油混合液20ml中，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。其中，酵母提取物的制备同实施例1，甘油混合液的制备同对比例2。
55.对比例7
56.物质s7制备：准确称量二裂酵母发酵溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物和酵母提取物各2.0mg依次加入到甘油混合溶液20ml中，轻微搅拌至混合均匀，灭菌后，放在4℃冰箱冷中静置冷藏12h。其中，二裂酵母发酵溶胞物、酵母发酵产物滤液提取物和酵母提取物的制备同实施例1，甘油混合液的制备同对比例2。
57.试验例1皮肤的水合度和皮肤弹性
58.随机选择年龄段为20
‑
40岁试用者160名，其中男性和女性分别为80名，随机分配为8组。分别使用物质s1
‑
s8。每天早晚清洁面部后，使用2滴，按摩吸收，左脸涂抹实验组，右脸作为空白对照组涂抹等量去离子水。每天用皮肤水分测试仪测试志愿者脸部皮肤位置的含水量，每次测试选取脸部同样位置五处，求得含水量的平均值，并计算含量增加率。计算公式为：皮肤含水量增加率＝(试验组含水量
‑
空白组含水量)/空白组含水量
×
100％。每天测试一次，共测试30天。测试结果如图1所示。
59.由此可知，在使用物质s1
‑
s8溶液30天之后肌肤的含水量均有所增加，但是物质s8的增加率最大。s8组的增加率显著高于s7组，说明采用纯露溶解二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和酵母发酵产物滤液提取物，比用甘油能溶解出更多的活性物质，从而发挥更好的保水效果。s8组的增加率高于s1、s3、s5组三者之和，说明二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和酵母发酵产物滤液提取物三者的溶出物彼此配合，发挥了协同增效的作用，共同提高了皮肤含水率。
60.试验例2祛除皱纹和持平细纹效果
61.随机选择年龄段为20
‑
40岁试用者160名，其中男性和女性分别为80名，随机分配为8组。分别使用物质s1
‑
s8。每天早晚清洁面部后，使用2滴，按摩吸收，左脸涂抹实验组，右脸作为空白对照组涂抹等量去离子水。以皮肤色差测试仪为测试仪器，通过测试脸部的皱纹，计算皱纹的去除效率。每天测试一次，共测试60天。测试结果如图2所示。
62.由此可知，在使用物质s1
‑
s8溶液60天之后肌肤的皱纹的去除效率均有所增加，但是物质s8的增加率最大。在使用s8溶液60天时，细纹下降幅度接近60％，皱纹深度有明显的改善。s8组的增加率显著高于s7组，说明采用纯露溶解二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和酵母发酵产物滤液提取物，比用甘油能溶解出更多的活性物质，从而发挥更好的皱纹的去除效果。s8组的增加率高于s1、s3、s5组三者之和，说明二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物和
酵母发酵产物滤液提取物三者的溶出物彼此配合，发挥了协同增效的作用，共同提高了皱纹的去除率。
63.试验例3肤质改善
64.为了进一步观察物质s8对化妆前后女性肌肤的改善，我们选择了30位25
‑
30岁且经常化妆的女性来测试该混合溶液，在卸妆之后每天使用本产品2滴，按摩吸收，30天之后，发现肌肤有显著性的改善，其中肌肤含水率提升了20％，细纹去除率达到了50％以上。
65.试验例4肌肤补水随时间的变化图
66.随机选择年龄段为20
‑
40岁试用者30名。使用物质s8。每天早晚清洁面部后，使用2滴，按摩吸收，左脸涂抹实验组，右脸作为空白对照组涂抹等量去离子水。每隔一段时间用皮肤水分测试仪测试志愿者脸部皮肤位置的含水量，每次测试选取脸部同样位置五处，每天测试一次，求得含水量的平均值，并计算含量增加率。计算公式为：皮肤含水量增加率＝(试验组含水量
‑
空白组含水量)/空白组含水量
×
100％。测试72天。测试结果如图3所示。
67.由此可知，使用本产品后，皮肤含水量增加率持续增加维持60天左右，60天后继续使用本产品，皮肤含水量增加率维持在一个稳定的水平。
68.实施例2
69.为了研究二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物、酵母发酵产物滤液提取物的合适的使用浓度，我们采用控制变量法进行研究。随机选择年龄段为20
‑
40岁试用者180名，其中男性和女性分别为90名，随机平均分成三组，即二裂酵母发酵溶胞物实验组、酵母提取物实验组、酵母发酵产物滤液提取物实验组，其中每组又随机平均分为6小组。
70.酵母提取物实验组中，酵母提取物浓度为变量设置为0、1、2、3、4、5mg/ml的6个浓度梯度，其中酵母发酵产物滤液提取物和二裂酵母溶胞产物提取物的添加量分别设置为0.2mg/ml。
71.酵母发酵产物滤液提取物实验组中，酵母发酵产物滤液提取物浓度为变量设置为0、1、2、3、4、5mg/ml浓度梯度，其中酵母提取物和二裂酵母溶胞产物提取物的添加量分别设置为0.2mg/ml。
72.二裂酵母发酵溶胞物实验组中，二裂酵母发酵溶胞物为变量设置为0、1、2、3、4、5mg/ml浓度梯度，其中酵母发酵产物滤液提取物和酵母提取物的添加量分别设置为0.2mg/ml。
73.每天早晚清洁面部后，使用2滴产品，按摩吸收，左脸涂抹实验组，右脸作为空白对照组涂抹等量去离子水。每隔一段时间用皮肤水分测试仪测试志愿者脸部皮肤位置的含水量，每次测试选取脸部同样位置五处，每天测试一次，求测试7天后求得含水量的平均值，并计算含量增加率。计算公式为：皮肤含水量增加率＝(试验组含水量
‑
空白组含水量)/空白组含水量
×
100％。测试结果如图4所示。
74.由此可见，二裂酵母发酵溶胞物、酵母提取物、酵母发酵产物滤液提取物的浓度为1mg/ml后，其作用效果就比较稳定。
75.以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。