一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法与流程

1.本发明属于检测化学领域，具体涉及一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法。


背景技术：

2.多氟和全氟烷基化合物是重要的含氟有机化合物，具有高表面活性、高热稳定性、高化学稳定性、憎油、憎水的独特性能，用途极为广泛。多氟和全氟烷基化合物可作为整理剂或表面活性剂广泛的应用到制备皮革制品中。氟调聚醇是一种重要的生产多氟和全氟烷基化合物的原材料。
3.然而氟调聚醇，特别是1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇，这三种氟调聚醇具有很强的毒性，中间代谢产物能够与多种生物分子共价结合，引起严重的毒性效应；工业上长期使用氟调聚醇会造成严重的污染，且氟调聚醇易挥发，难以发生化学降解或生物降解，生物累积性极高。
4.皮革制品中大量使用整理剂和表面活性剂，制品中不可避免的残留氟调聚醇，人类长期接触此类物质，势必造成永久性伤害。鉴于3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)的污染和毒性，世界各国逐渐开始严格限制这类化合物在皮革制品中的应用，其检测方法也成为了各国皮革制品化学安全检测的研究热点。
5.暨南大学公开了一种超声萃取、气相色谱质谱(gc-ms)同时测定不同作物(生菜、胡萝卜、青瓜、芹菜、土豆)和不同理化性质土壤中3种典型全氟调聚醇(ftohs)(6:2ftoh、8:2ftoh、10:2ftoh)的高效分析方法；但是作物及土壤中测得的目标ftohs的标准偏差均小于20.0％，分析方法不具备良好的重复性，不具备良好的稳定性(李新洪.典型全氟调聚醇及其降解产物的分析方法及在高/低积累生菜品种中的代谢转化和积累[d].暨南大学，2020)。
[0006]
目前，还没有文献报道皮革制品中氟调聚醇的检测方法。因此，如何提供一种简单快捷的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，使其具有较强的抗基质干扰能力、优异的重复性及再现性，成为目前亟待解决的问题。


技术实现要素：

[0007]
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法能够实现一次进样，同时对1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇进行定性和/或定量检测，提高了检测效率；且本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法具有较强的抗基质干扰能力、优异的重复性及再现性。
[0008]
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
[0009]
本发明提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
[0010]
(1)将标准品与溶剂混合，配制成标准工作溶液；提取皮革制品中的氟调聚醇，配
制成试样溶液；
[0011]
(2)将步骤(1)得到的标准工作溶液和试样溶液进行超高效液相色谱-质谱检测，从而对皮革制品中氟调聚醇进行定性和/或定量检测；
[0012]
所述氟调聚醇包括1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇或1h,1h,2h,2h-全氟癸醇中的任意一种或至少两种的组合。
[0013]
在本发明中，采用超高效液相色谱-质谱测定皮革制品中氟调聚醇的峰面积及其定量离子对，根据出峰时间以及定量离子对丰度比进行定性分析；通过测定标准工作溶液，得到标准曲线方程；通过标准曲线方程，得到待测皮革制品中氟调聚醇的含量。
[0014]
在本发明中，步骤(1)中，所述标准工作溶液中标准品的浓度为0.001-0.5mg/l，例如可以是0.001mg/l、0.01mg/l、0.1mg/l、0.15mg/l、0.2mg/l、0.25mg/l、0.3mg/l、0.35mg/l、0.4mg/l、0.45mg/l、0.5mg/l等。
[0015]
优选地，步骤(1)中，所述试样溶液中氟调聚醇的浓度为0.05-0.2mg/l，例如可以是0.05mg/l、0.07mg/l、0.09mg/l、0.10mg/l、0.12mg/l、0.14mg/l、0.16mg/l、0.18mg/l、0.2mg/l等。
[0016]
在本发明中，步骤(1)中，所述标准品包括1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇标准品、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇标准品或1h,1h,2h,2h-全氟癸醇标准品中的任意一种或至少两种的组合。
[0017]
优选地，步骤(1)中，所述标准工作溶液中1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇标准品的浓度为0.001-0.5mg/l，例如可以是0.001mg/l、0.01mg/l、0.1mg/l、0.15mg/l、0.2mg/l、0.25mg/l、0.3mg/l、0.35mg/l、0.4mg/l、0.45mg/l、0.5mg/l等。
[0018]
优选地，步骤(1)中，所述标准工作溶液中1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇标准品的浓度为0.001-0.5mg/l，例如可以是0.001mg/l、0.01mg/l、0.1mg/l、0.15mg/l、0.2mg/l、0.25mg/l、0.3mg/l、0.35mg/l、0.4mg/l、0.45mg/l、0.5mg/l等。
[0019]
优选地，步骤(1)中，所述标准工作溶液中1h,1h,2h,2h-全氟癸醇标准品的浓度为0.001-0.5mg/l，例如可以是0.001mg/l、0.01mg/l、0.1mg/l、0.15mg/l、0.2mg/l、0.25mg/l、0.3mg/l、0.35mg/l、0.4mg/l、0.45mg/l、0.5mg/l等。
[0020]
优选地，步骤(1)中，所述溶剂包括二氯甲烷、正己烷、甲基叔丁基醚、异丙醇、乙腈或甲醇中任意一种或至少两种的组合。
[0021]
在本发明中，由于3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)属于极性化合物，根据相似相容原理，选择异丙醇、乙腈、二氯甲烷或甲醇等极性溶剂作萃取剂；同时考虑到非极性溶剂对皮革制品中含有的3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)萃取效果，故同时可以选择正己烷、甲基叔丁基醚等非极性萃取剂。
[0022]
优选地，步骤(1)中，所述皮革制品的任意维度尺寸为0.01-5mm，例如可以是0.01mm、0.05mm、0.08mm、0.1mm、0.5mm、1mm、1.5mm、2mm、2.5mm、3mm、3.5mm、4mm、4.5mm、5mm等。
[0023]
在本发明中，步骤(1)中，所述试样溶液的配制包括以下步骤：
[0024]
(a)将皮革制品与萃取剂混合，进行超声萃取，得到萃取液；
[0025]
(b)将步骤(a)得到的萃取液进行柱层析分离，得到净化液；
[0026]
(c)将步骤(b)得到的净化液浓缩后，定容，得到所述试样溶液。
[0027]
在本发明中，步骤(a)中，所述萃取剂包括二氯甲烷、正己烷、甲基叔丁基醚、异丙醇、乙腈或甲醇中任意一种或至少两种的组合。
[0028]
优选地，步骤(a)中，所述超声萃取的功率为70-150w，例如可以是70w、80w、90w、100w、110w、120w、130w、140w、150w等；超声萃取的时间为0.5-3h，例如可以是0.5h、0.8h、1h、1.2h、1.4h、1.6h、1.8h、2h、2.2h、2.4h、2.6h、2.8h、3h等。
[0029]
优选地，步骤(a)中，所述萃取剂与皮革制品的重量比为(10-50):1，例如可以是10:1、15:1、20:1、25:1、30:1、35:1、40:1、45:1、50:1等。
[0030]
优选地，步骤(b)中，所述柱层析分离前还需要将萃取液进行浓缩，所述浓缩后的样品含液量为2-5％，例如可以是2.0％、2.5％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、5.0％等。
[0031]
优选地，步骤(b)中，所述柱层析分离采用的洗脱剂包括正己烷、甲苯或甲醇中任意一种或至少两种的组合，优选为正己烷和甲苯。
[0032]
优选地，所述正己烷和甲苯的体积比为(3-5):1，例如可以是3:1、3.2:1、3.4:1、3.6:1、3.8:1、4:1、4.2:1、4.4:1、4.6:1、4.8:1、5:1等。
[0033]
优选地，所述洗脱剂的用量为浓缩后的样品重量的10-20倍，例如可以是10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍、16倍、17倍、18倍、19倍、20倍等。
[0034]
优选地，所述洗脱剂的流速为20-40滴/分，例如可以是20滴/分、22滴/分、24滴/分、26滴/分、28滴/分、30滴/分、32滴/分、34滴/分、36滴/分、38滴/分、40滴/分等。
[0035]
优选地，步骤(c)中，所述浓缩后的样品含液量为5-10％，例如可以是5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、10％等。
[0036]
优选地，步骤(c)中，所述浓缩采用旋转蒸发浓缩。
[0037]
优选地，所述旋转蒸发浓缩的真空度为5-10kpa，例如可以是5kpa、6kpa、7kpa、8kpa、9kpa、10kpa等；旋转蒸发浓缩的温度为40-60℃，例如可以是40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、52℃、54℃、56℃、58℃、60℃等。
[0038]
优选地，步骤(c)中，所述定容采用的溶剂包括二氯甲烷、正己烷、甲基叔丁基醚、异丙醇、乙腈或甲醇中任意一种或至少两种的组合。
[0039]
优选地，步骤(c)中，所述过滤采用0.15-0.8μm的滤膜，例如可以是0.15μm、0.2μm、0.22μm、0.45μm、0.8μm等。
[0040]
在本发明中，所述超高效液相色谱-质谱检测中色谱柱包括acquity uplc beh c18色谱柱、acquity uplc beh shield rp8或acquity uplc beh phenyl中的任意一种，优选为acquity uplc beh c18色谱柱。
[0041]
优选地，所述色谱柱的柱长为50-100mm，例如可以是50mm、52mm、54mm、56mm、58mm、60mm、62mm、70mm、75mm、80mm、85mm、90mm、95mm、100mm等；内径为1.8-2.2mm，例如可以是1.8mm、1.9mm、2mm、2.1mm、2.2mm等；填料粒径为1.5-2.0μm，例如可以是1.5μm、1.6μm、1.7μm、1.8μm、1.9μm、2μm等。
[0042]
优选地，所述色谱柱的柱温为40-50℃，例如可以是40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃、46℃、47℃、48℃、49℃、50℃等。
[0043]
在本发明中，所述超高效液相色谱-质谱检测中，流动相包括甲醇、氨水、甲酸水溶液、乙腈、四氢呋喃或异丙醇中任意一种或至少两种的组合，优选为甲醇和氨水。
[0044]
优选地，所述氨水的浓度为4-6mmol/l，例如可以是4mmol/l、4.2mmol/l、4.4mmol/l、4.6mmol/l、4.8mmol/l、5mmol/l、5.2mmol/l、5.4mmol/l、5.6mmol/l、5.8mmol/l、6mmol/l等。
[0045]
优选地，所述甲醇和氨水的体积比为(85-95):(5-15)，例如可以是85:15、86:14、87:13、88:12、89:11、90:10、91:9、92:8、93:7、94:6、95:5等。
[0046]
优选地，所述流动相的流量为0.2-0.4ml/min，例如可以是0.2ml/min、0.22ml/min、0.24ml/min、0.26ml/min、0.28ml/min、0.3ml/min、0.32ml/min、0.34ml/min、0.36ml/min、0.38ml/min、0.4ml/min等。
[0047]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中，进样量为4-6μl，例如可以是4μl、4.2μl、4.4μl、4.6μl、4.8μl、5μl、5.2μl、5.4μl、5.6μl、5.8μl、6μl等。
[0048]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测的检测时间为0.1-5min，例如可以是0.1min、0.5min、1min、1.5min、2min、2.5min、3min、3.5min、4min、4.5min、5min等。
[0049]
在本发明中，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用的电离源包括电喷雾离子源、电子轰击源或大气压化学电离源中任意一种，优选为电喷雾离子源。
[0050]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用负离子扫描模式。
[0051]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用多反应检测模式。
[0052]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中离子源的温度为140-160℃，例如可以是140℃、142℃、144℃、146℃、148℃、150℃、152℃、154℃、156℃、158℃、160℃等。
[0053]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中脱溶剂气温度为340-360℃，例如可以是340℃、342℃、344℃、346℃、348℃、350℃、352℃、354℃、356℃、358℃、360℃等。
[0054]
优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中毛细管电压为2.5-3.5kv，例如可以是2.5kv、2.7kv、2.9kv、3kv、3.1kv、3.3kv、3.5kv等。
[0055]
在本发明中，所述氟调聚醇的质谱分析参数如下所示：
[0056][0057][0058]
其中“*”为定量离子对。
[0059]
本发明通过选择合适的定量离子对，使得本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检
测方法具有较强的抗基质干扰能力。
[0060]
作为本发明优选的技术方案，所述皮革制品中氟调聚醇的检测方法，包括以下步骤：
[0061]
(1)将标准品与溶剂混合，配制成标准工作溶液；所述标准工作溶液中标准品的浓度为0.001-0.5mg/l；提取皮革制品中的氟调聚醇，配制成试样溶液；所述试样溶液中氟调聚醇的浓度为0.05-0.2mg/l；
[0062]
(2)将步骤(1)得到的标准工作溶液和试样溶液进行超高效液相色谱-质谱检测，从而对皮革制品中氟调聚醇进行定性和/或定量检测；
[0063]
所述超高效液相色谱-质谱检测中液相色谱分析的色谱条件为：采用acquity uplc beh c18色谱柱；所述色谱柱的柱长为40-60mm，内径为1.8-2.2mm，膜厚为1.5-2.0μm；所述色谱柱的柱温为40-50℃；进样量为4-6μl；流动相为体积比为(85-95):(5-15)的甲醇和5mmol/l的氨水溶液；流动相的流量为0.2-0.4ml/min；
[0064]
所述超高效液相色谱-质谱检测中质谱检测的条件：采用电喷雾离子源；采用负离子扫描模式；采用多反应检测模式；离子源温度140-160℃；脱溶剂气温度340-360℃；毛细管电压2.5-3.5kv。
[0065]
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
[0066]
(1)本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，可以实现对皮革制品中的3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)进行定性和/或定量检测。
[0067]
(2)本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，操作简单，抗干扰效果明显，具有优异的重复性和再现性。
附图说明
[0068]
图1为实施例1所测皮革制品中1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇总离子色谱图。
[0069]
图2为mrm模式下实施例1试样溶液中1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇(263.1》155.0*)的质谱图，其中“*”为定量离子对。
[0070]
图3为mrm模式下实施例1试样溶液中1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇(363.2》255.1*)的质谱图，其中“*”为定量离子对。
[0071]
图4为mrm模式下实施例1试样溶液中1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇(363.2》303.1)的质谱图。
[0072]
图5为mrm模式下实施例1试样溶液中1h,1h,2h,2h-全氟癸醇(436.3》355.1*)的质谱图，其中“*”为定量离子对。
[0073]
图6为mrm模式下实施例1试样溶液中1h,1h,2h,2h-全氟癸醇(436.3》403.1)的质谱图。
[0074]
图7为实施例1测得的1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇的标准曲线图。
[0075]
图8为实施例1测得的1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇的标准曲线图。
[0076]
图9为实施例1测得的1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的标准曲线图。
具体实施方式
[0077]
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
[0078]
以下实施例中材料和试剂的来源如下所示：
[0079]
名称纯度等级生产厂家/牌号1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇99.09％lgc/g11419381h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇99.30％坛墨/31721021h,1h,2h,2h-全氟癸醇99.30％lgc/g1128738甲醇梯度级默克/i1143407112正己烷hplc/spectrotedia/21035310甲苯absolvtedia/19080746
[0080]
实施例1
[0081]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述皮革制品中氟调聚醇的检测方法包括以下步骤：
[0082]
(一)标准工作溶液和试样溶液的配制
[0083]
(1)标准工作溶液的配制：准确称取99.09％的1h,1h,2h,2h-全氟-1-癸醇标准品50.32mg、99.30％的1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇标准品50.20mg、99.30％的1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇标准品50.26mg，用甲醇定容至50ml，得到溶液a，则溶液a中氟调聚醇的浓度为1000mg/l，按照表1将溶液a进行稀释得到溶液a1-a7：
[0084]
表1
[0085][0086][0087]
(2)试样溶液的配制：
[0088]
(a)称取1.0022g尺寸为5
×5×
5mm的待测皮革制品，置于超声波萃取瓶中，加入正己烷30ml，密封，置于功率为150w的超声波萃取仪中超声1小时，得到萃取液；
[0089]
(b)将步骤(a)得到的萃取液进行浓缩，浓缩后的样品含液量为3.3％；硅胶层析柱先用20ml体积比为4:1的正己烷和甲苯混合液润洗，舍弃润洗液，将浓缩后的萃取液进行过柱，并用20ml体积比为4:1的正己烷和甲苯混合液淋洗，流速为30滴/分，收集所有洗脱液，得到净化液；
[0090]
(c)在50℃和8kpa真空度条件下将步骤(b)得到的净化液旋转蒸发浓缩至1ml，将浓缩液转移至10ml的容量瓶中，并用正已烷冲洗蒸发瓶3次，冲洗液一并转移至10ml的容量瓶中，用正已烷定容，然后采用0.22μm的滤膜进行过滤，得到试样溶液。
[0091]
(二)仪器条件和参数设置
[0092]
超高效液相色谱-质谱检测中液相色谱分析的色谱条件为：acquity uplc beh c18色谱柱(2.1mm
×
50mm,1.7μm)；柱温45℃；进样体积5μl；流动相a为甲醇，b为5mmol/l氨水溶液；流量0.3ml/min；梯度洗脱程序：0-5.00min时，a为90％，b为10％。
[0093]
所述超高效液相色谱-质谱检测中质谱检测的条件为：电喷雾离子源(esi)；负离子扫描模式；多反应监测(mrm)模式；离子源温度150℃；脱溶剂气温度350℃；毛细管电压3.00kv；所述氟调聚醇的质谱分析参数如表2所示：
[0094]
表2
[0095][0096][0097]
其中“*”为定量离子对。
[0098]
(三)3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)的定性分析：
[0099]
在上述的仪器条件及参数条件下，采用超高效液相色谱-质谱，对试样溶液进行定性分析。
[0100]
定性分析：如图1所示，3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)总离子色谱图，总离子色谱图的保留时间为rt＝0.59min。
[0101]
图2至图6分别为mrm模式下，选择性离子对1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇(263.1》155.0*)、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇(363.2》255.1*)、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇(363.2》303.1)、1h,1h,2h,2h-全氟癸醇(436.3》355.1*)和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇(436.3》403.1)对应的质谱图，其中“*”为定量离子对；从图中可以看出，1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的总离子色谱图的保留时间分别为rt＝0.51min、rt＝0.55min、rt＝0.66min。从图中可以看出本发明提供的皮革制品
中氟调聚醇的检测方法具有较强的抗基质干扰能力。
[0102]
(四)标准曲线绘制
[0103]
在上述的仪器条件及参数条件下，采用超高效液相色谱-质谱，对标准工作溶液中的a3、a4、a5、a6、a7溶液和空白溶液进行测试，对应的标准样品浓度和峰强度如表3所示，标准曲线的线性要求均在0.99以上；空白溶液即不加3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)的正己烷溶液。
[0104]
表3
[0105][0106]
图7-图9分别为1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇、1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的标准曲线图，1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇校准曲线：y＝1.656x-7.046、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇校准曲线：y＝7.035x+1.667、1h,1h,2h,2h-全氟癸醇校准曲线：y＝1.581x-2.876。从图中可以看出，所述3种氟调聚醇标准曲线线性关系良好。
[0107]
(五)3种氟调聚醇(1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇)的定量分析：
[0108]
定量分析：
[0109]
(1)采用标准曲线测得试样溶液中1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇和1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的浓度分别为0.259mg/l、0.706mg/l、0.078mg/l；
[0110]
(2)采用如下公式计算皮革制品中氟调聚醇的含量：
[0111][0112]
式中：
[0113]
xi—试样中氟调聚醇的含量，单位为mg/kg；c
is
—标准工作溶液中氟调聚醇的浓度，单位为mg/l；a—试样溶液中氟调聚醇的峰强度；a
ib
—空白溶液中氟调聚醇的峰强度；v—试液定容体积，单位为ml；a
is
—标准工作溶液中氟调聚醇的峰强度；m—试样质量，单位为g。
[0114]
取同一皮革样品分为10份，分别为试样1-10；按照上述方法配制成试样溶液，在同一实验室，按照上述实验条件进行定量检测，测得最终样品中的含量如表4所示：
[0115]
表4
[0116][0117][0118]
由表4数据可知，在同一实验室，本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，测得1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇的相对标准偏差为1.490％，1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇的相对标准偏差为1.072％，1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的相对标准偏差为1.059％；综上可知本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法变异系数小，稳健度高，具有很好的重复性。
[0119]
取上述同一皮革样品分为5份，分别由实验室1-5进行再现性测试，测得最终样品中的含量如表5所示：
[0120]
表5
[0121][0122]
由表5数据可知，针对同一份皮革样品，由不同实验室测试，测得1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇的相对标准偏差为1.794％，1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇的相对标准偏差为1.906％，1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的相对标准偏差为2.681％；表明本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，在不同实验室之间也具有良好的再现性。
[0123]
实施例2
[0124]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
[0125]
(一)试样溶液的配制：
[0126]
(a)称取10份1.0018g尺寸为4.8
×
4.8
×
4.8mm的待测皮革制品，置于超声波萃取瓶中，加入乙腈28ml，密封，置于功率为150w的超声波萃取仪中超声1.2小时，得到萃取液；
[0127]
(b)将步骤(a)得到的萃取液进行浓缩，浓缩后的样品含液量为3.5％；硅胶层析柱先用18ml体积比为4:1的正己烷和甲苯混合液润洗，舍弃润洗液，将浓缩后的萃取液进行过柱，并用18ml体积比为4:1的正己烷和甲苯混合液淋洗，流速为28滴/分，收集所有洗脱液，得到净化液；
[0128]
(c)在48℃和7.8kpa真空度条件下将步骤(b)得到的净化液旋转蒸发浓缩至0.9ml，将浓缩液转移至10ml的容量瓶中，并用乙腈冲洗蒸发瓶3次，冲洗液一并转移至10ml的容量瓶中，用乙腈定容，然后采用0.22μm的滤膜进行过滤，得到试样溶液。
[0129]
(二)仪器条件和参数设置
[0130]
采用超高效液相色谱-质谱对试样溶液进行测试，超高效液相色谱-质谱检测中液相色谱分析的色谱条件为：acquity uplc beh c18色谱柱(2.1mm
×
50mm,1.7μm)；柱温44℃；进样体积4.8μl；流动相a为甲醇，b为5mmol/l氨水溶液；流量0.28ml/min；梯度洗脱程序：0-5.00min时，a为88％，b为12％。
[0131]
所述超高效液相色谱-质谱检测中质谱检测的条件为：电喷雾离子源(esi)；负离子扫描模式；多反应监测(mrm)模式；离子源温度148℃；脱溶剂气温度352℃；毛细管电压3.10kv；所述氟调聚醇的质谱分析参数如上述表2所示。
[0132]
经过计算得到皮革制品中氟调聚醇的含量。
[0133]
实施例3
[0134]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
[0135]
(一)试样溶液的配制：
[0136]
(a)称取10份1.0025g尺寸为4.7
×
4.7
×
4.7mm的待测皮革制品，置于超声波萃取瓶中，加入甲醇31ml，密封，置于功率为150w的超声波萃取仪中超声1.3小时，得到萃取液；
[0137]
(b)将步骤(a)得到的萃取液进行浓缩，浓缩后的样品含液量为3.2％；硅胶层析柱先用22ml体积比为4:1的正己烷和甲苯混合液润洗，舍弃润洗液，将浓缩后的萃取液进行过柱，并用22ml体积比为4:1的正己烷和甲苯混合液淋洗，流速为32滴/分，收集所有洗脱液，得到净化液；
[0138]
(c)在51℃和8.2kpa真空度条件下将步骤(b)得到的净化液旋转蒸发浓缩至1.1ml，将浓缩液转移至10ml的容量瓶中，并用甲醇冲洗蒸发瓶3次，冲洗液一并转移至10ml的容量瓶中，用甲醇定容，然后采用0.22μm的滤膜进行过滤，得到试样溶液。
[0139]
(二)仪器条件和参数设置
[0140]
采用超高效液相色谱-质谱对试样溶液进行测试，超高效液相色谱-质谱检测中液相色谱分析的色谱条件为：acquity uplc beh c18色谱柱(2.1mm
×
50mm,1.7μm)；柱温46℃；进样体积5.1μl；流动相a为甲醇，b为5mmol/l氨水溶液；流量0.32ml/min；梯度洗脱程序：0-5.00min时，a为91％，b为9％。
[0141]
所述超高效液相色谱-质谱检测中质谱检测的条件为：电喷雾离子源(esi)；负离子扫描模式；多反应监测(mrm)模式；离子源温度151℃；脱溶剂气温度348℃；毛细管电压2.90kv；所述氟调聚醇的质谱分析参数如上述表2所示。
[0142]
经过计算得到皮革制品中氟调聚醇的含量。
[0143]
实施例4
[0144]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法与实施例1的区别仅在于，试样溶液的配制中，步骤(a)和步骤(c)中将正己烷替换为同等体积的乙腈，其他步骤同实施例1。
[0145]
实施例5
[0146]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法与实施例1的区别仅在于，试样溶液的配制中，步骤(a)和步骤(c)中将正己烷替换为同等体积的甲基叔丁基醚，其他步骤同实施例1。
[0147]
实施例6
[0148]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法与实施例1的区别仅在于，将色谱柱替换为acquity uplc beh phenyl柱，其他步骤同实施例1。
[0149]
实施例7
[0150]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法与实施例1的区别仅在于，流动相中将氨水替换为同等流量的甲醇，其他步骤同实施例1。
[0151]
实施例8
[0152]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法与实施例1的区别仅在于，流动相中甲醇和氨水的体积比为1:1，其他步骤同实施例1。
[0153]
实施例9
[0154]
本实施例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法与实施例1的区别仅在于，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用正离子扫描模式，其他步骤同实施例1。
[0155]
对比例1
[0156]
本对比例提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，与实施例1的区别仅在于，采用气相色谱-串联质谱对皮革制品中氟调聚醇的含量进行检测，其他步骤同实施例1。
[0157]
实施例1-9与对比例1的检测结果如表6所示：
[0158]
表6
[0159][0160][0161]
由表6数据可知，采用本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法(实施例1-9)，测得1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇的相对标准偏差范围为1.488-1.674％；1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇的相对标准偏差范围为1.071-1.389％；1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的相对标准偏差范围为1.524-2.203％；采用优选技术方案(实施例1-3)提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，测得1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇的相对标准偏差范围为1.488-1.494％；1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇的相对标准偏差范围为1.071-1.117％；1h,1h,2h,2h-全氟癸醇的相对标准偏差范围为1.524-1.559％。
[0162]
通过实施例1、实施例4和实施例5的对比可知，采用乙腈或者甲基叔丁基醚作为萃取剂，不会影响检测结果。
[0163]
通过实施例1和实施例6的对比可知，当将色谱柱替换为acquity uplc beh phenyl柱，会影响检测效果。
[0164]
通过实施例1、实施例7和实施例8的对比可知，当将流动相替换为甲醇或者将甲醇和氨水的体积比替换为1:1均会影响检测效果，这是因为负离子模式下，加入一定量的氨水能增强离子化效应；甲醇和氨水比例为1:1时柱压较最高，在高压下，填料会逐步塌陷，在柱的前端产生死体积，色谱峰变宽，柱效下降，色谱柱的寿命会急剧缩短；严重的塌陷会导致
双峰出现。
[0165]
通过实施例1和实施例9的对比可知，采用正离子扫描模式会影响检测结果，这是因为氟调聚醇含有羟基，在正离子模式酸性系统下不易加合质子，在负离子模式碱性系统中容易失去质子，负离子模式下能促进电离。
[0166]
通过实施例1和对比例1的对比可知，气相色谱-串联质谱不适用于检测皮革制品中氟调聚醇的含量
[0167]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的工艺方法，但本发明并不局限于上述工艺步骤，即不意味着本发明必须依赖上述工艺步骤才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

技术特征：
1.一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)将标准品与溶剂混合，配制成标准工作溶液；提取皮革制品中的氟调聚醇，配制成试样溶液；(2)将步骤(1)得到的标准工作溶液和试样溶液进行超高效液相色谱-质谱检测，从而对皮革制品中氟调聚醇进行定性和/或定量检测；所述氟调聚醇包括1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇或1h,1h,2h,2h-全氟癸醇中的任意一种或至少两种的组合。2.根据权利要求1所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述标准工作溶液中标准品的浓度为0.001-0.5mg/l；优选地，步骤(1)中，所述试样溶液中氟调聚醇的浓度为0.05-0.2mg/l。3.根据权利要求1或2所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述标准品包括1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇标准品、1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇标准品或1h,1h,2h,2h-全氟癸醇标准品中的任意一种或至少两种的组合；优选地，步骤(1)中，所述标准工作溶液中1h,1h,2h,2h-九氟-1-己醇标准品的浓度为0.001-0.5mg/l；优选地，步骤(1)中，所述标准工作溶液中1h,1h,2h,2h-十三氟-1-正辛醇标准品的浓度为0.001-0.5mg/l；优选地，步骤(1)中，所述标准工作溶液中1h,1h,2h,2h-全氟癸醇标准品的浓度为0.001-0.5mg/l；优选地，步骤(1)中，所述溶剂包括二氯甲烷、正己烷、甲基叔丁基醚、异丙醇、乙腈或甲醇中任意一种或至少两种的组合；优选地，步骤(1)中，所述皮革制品的任意维度尺寸为0.01-5mm。4.根据权利要求1-3中任一项所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述试样溶液的配制包括以下步骤：(a)将皮革制品与萃取剂混合，进行超声萃取，得到萃取液；(b)将步骤(a)得到的萃取液进行柱层析分离，得到净化液；(c)将步骤(b)得到的净化液浓缩后，定容，过滤，得到所述试样溶液。5.根据权利要求4所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，步骤(a)中，所述萃取剂包括二氯甲烷、正己烷、甲基叔丁基醚、异丙醇、乙腈或甲醇中任意一种或至少两种的组合；优选地，步骤(a)中，所述超声萃取的功率为70-150w，超声萃取的时间为0.5-3h；优选地，步骤(a)中，所述萃取剂与皮革制品的重量比为(10-50):1；优选地，步骤(b)中，所述柱层析分离前还需要将萃取液进行浓缩，所述浓缩后的样品含液量为2-5％；优选地，步骤(b)中，所述柱层析分离采用的洗脱剂包括正己烷、甲苯或甲醇中任意一种或至少两种的组合，优选为正己烷和甲苯；优选地，所述正己烷和甲苯的体积比为(3-5):1；优选地，所述洗脱剂的用量为浓缩后的样品重量的10-20倍；优选地，所述洗脱剂的流速为20-40滴/分；
优选地，步骤(c)中，所述浓缩后的样品含液量为5-10％；优选地，步骤(c)中，所述浓缩采用旋转蒸发浓缩；优选地，所述旋转蒸发浓缩的真空度为5-10kpa，旋转蒸发浓缩的温度为40-60℃；优选地，步骤(c)中，所述定容采用的溶剂包括二氯甲烷、正己烷、甲基叔丁基醚、异丙醇、乙腈或甲醇中任意一种或至少两种的组合；优选地，步骤(c)中，所述过滤采用0.15-0.8μm的滤膜。6.根据权利要求1-5中任一项所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-质谱检测中色谱柱包括acquity uplc beh c18色谱柱、acquity uplc beh shield rp8或acquity uplc beh phenyl中的任意一种，优选为acquity uplc beh c18色谱柱；优选地，所述色谱柱的柱长为50-100mm，内径为1.8-2.2mm，填料粒径为1.5-2.0μm；优选地，所述色谱柱的柱温为40-50℃。7.根据权利要求1-6中任一项所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-质谱检测中，流动相包括甲醇、氨水、甲酸水溶液、乙腈、四氢呋喃或异丙醇中任意一种或至少两种的组合，优选为甲醇和氨水；优选地，所述氨水的浓度为4-6mmol/l；优选地，所述甲醇和氨水的体积比为(85-95):(5-15)；优选地，所述流动相的流量为0.2-0.4ml/min；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中，进样量为4-6μl；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测的检测时间为0.1-5min。8.根据权利要求1-7中任一项所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用的电离源包括电喷雾离子源、电子轰击源或大气压化学电离源中任意一种，优选为电喷雾离子源；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用负离子扫描模式；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中采用多反应检测模式；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中离子源的温度为140-160℃；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中脱溶剂气温度为340-360℃；优选地，所述超高效液相色谱-质谱检测中毛细管电压为2.5-3.5kv。9.根据权利要求1-8中任一项所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，所述氟调聚醇的质谱分析参数如下所示：
其中“*”为定量离子对。10.根据权利要求1-9中任一项所述的皮革制品中氟调聚醇的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)将标准品与溶剂混合，配制成标准工作溶液；所述标准工作溶液中标准品的浓度为0.001-0.5mg/l；提取皮革制品中的氟调聚醇，配制成试样溶液；所述试样溶液中氟调聚醇的浓度为0.05-0.2mg/l；(2)将步骤(1)得到的标准工作溶液和试样溶液进行超高效液相色谱-质谱检测，从而对皮革制品中氟调聚醇进行定性和/或定量检测；所述超高效液相色谱-质谱检测中液相色谱分析的色谱条件为：采用acquity uplc beh c18色谱柱；所述色谱柱的柱长为40-60mm，内径为1.8-2.2mm，膜厚为1.5-2.0μm；所述色谱柱的柱温为40-50℃；进样量为4-6μl；流动相为体积比为(85-95):(5-15)的甲醇和5mmol/l的氨水溶液；流动相的流量为0.2-0.4ml/min；所述超高效液相色谱-质谱检测中质谱检测的条件：采用电喷雾离子源；采用负离子扫描模式；采用多反应检测模式；离子源温度140-160℃；脱溶剂气温度340-360℃；毛细管电压2.5-3.5kv。

技术总结
本发明提供一种皮革制品中氟调聚醇的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：(1)将标准品与溶剂混合，配制成标准工作溶液；提取皮革制品中的氟调聚醇，配制成试样溶液；(2)将步骤(1)得到的标准工作溶液和试样溶液进行超高效液相色谱-质谱检测。本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法能够实现一次进样，同时对1H,1H,2H,2H-九氟-1-己醇、1H,1H,2H,2H-十三氟-1-正辛醇和1H,1H,2H,2H-全氟癸醇进行定性和/或定量检测，提高了检测效率；且本发明提供的皮革制品中氟调聚醇的检测方法具有较强的抗基质干扰能力、优异的重复性及再现性。优异的重复性及再现性。优异的重复性及再现性。


技术研发人员：胡爱生 阮大胜 陶小美 熊海瑶
受保护的技术使用者：亿科检测认证有限公司
技术研发日：2021.10.27
技术公布日：2022/1/28