本发明涉及用于药物用途的活性成分的合成方法领域，特别是在工业规模上制备(15α,16α,17β)-雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,15,16,17-四醇(也称为雌四醇，为一水合物形式)的化合物的方法。
背景技术：
1、雌四醇化合物是一种具有药理活性的活性成分，可以用于激素替代疗法(hrt)、女性避孕或与激素失衡相关的自身免疫功能障碍的治疗。
2、雌四醇的结构式如下所述：
3、
4、甾体骨架的15、16和17位(在以上报道的式中突出显示)各自带有一个羟基(如结构式中所示)，具有限定的空间排列。
5、雌四醇是一种从人类尿液中分离的天然产物，多年来一直为人们所知。它已经在文章“synthesis of epimeric 15-hydroxyestriols,new and potential metabolitesof estradiol”，j.fishman 等人,joc vol.33,no.8,august 1968,p.3133-3135(第3133页图中的化合物ia)中被描述。
6、就雌四醇的获取而言，由于该方法的产率低，这篇文章中的获取方法不具有工业适用性。
7、最近公开了几项与新的雌四醇合成方法有关的专利申请，但它们都无法避免具有如下结构式的异构体15β,16β,17β的形成，必须从中纯化雌四醇才能用于药物制剂。
8、
9、例如，申请wo 2004/041839 a2(第6页，第5-10行)描述了一种获得雌四醇的方法，其纯度可以达到99％，单一杂质的总和不超过1％。第28页的实施例11描述了hplc纯度为99.1％的雌四醇(hplc-ms)，然而它没有提供单一杂质含量的信息。国际指南接受的未知药物物质限量为0.1％，已鉴定的药物物质限量为0.15％。
10、活性成分(api)中杂质的含量是允许其在药物制剂中使用的基本且不可减损的要求，也是定义工业上可应用的方法的基本特征。提供杂质含量不符合国际指南限制的api的任何方法，无论产量如何，都不是工业上可用的方法，因为该方法的结果api是不可用的。
11、与雌四醇的生产相关的后续申请是，例如，wo 2012/164096 a1、wo 2013/050553a1和wo 2015/040051a1。
12、在wo 2015/040051 a1中，在实施例10和15中，雌四醇/异构体15β,16β,17β的比率等于99:1，在实施例11和17中等于98:2。但是，在这些实施例中，没有显示将异构体15β,16β,17β的含量降低到至少0.15％。甚至色谱纯化(实施例15)也无法获得该结果。在该文件中(第9页，第5-15行)注意到，所讨论的现有技术中描述的方法(在该文件中由申请wo 2012/164096a1和wo 2013/050553 a1表示)提供了甚至更高且不可接受量的异构体15β,16β,17β。
13、因此，显然所描述的方法都没有提供限制异构体15β,16β,17β形成的解决方案，或者从所述异构体中纯化雌四醇的方法。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供雌四醇和雌四醇一水合物的合成方法，其异构体15β,16β,17β的含量低于0.15％，而不必采用工业上不适用的纯化技术。
2、本发明涉及雌四醇的合成方法，包括以下步骤：
3、a)将化合物(17β)-3-(苯甲氧基)-雌甾-1,3,5(10),15-四烯-17-醇(中间体1)氧化，得到化合物(17β)-3-(苯甲氧基)-雌甾-1,3,5(10)-三烯-15,16,17-三醇(中间体2)：
4、
5、其中bn＝苄基，其中中间体2的甾体骨架的碳原子15和16的构型不固定；
6、b)将中间体2去苄基化，得到化合物(17β)-雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,15,16,17-四醇(中间体3)，其中甾体骨架的碳原子15和16的构型不固定：
7、
8、c)将中间体3乙酰化为(17β)-雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,15,16,17-四乙酸酯((17β)-estra-1,3,5(10)-triene-3,15,16,17-tetrol tetraacetate)(中间体4)，其中甾体骨架的碳原子15和16的构型不固定：
9、
10、d)将步骤c)获得的中间体4纯化为(15α,16α,17β)-雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,15,16,17-四乙酸酯(中间体5)，其中甾体骨架的碳原子15和16的构型固定：
11、
12、e)将存在于中间体5中的乙酸酯(acetates)水解为雌四醇：
13、
14、f)步骤e)中产生的雌四醇转化为雌四醇一水合物的反应：
15、
1.合成雌四醇和雌四醇一水合物的方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1的方法，其中使用锇化合物本身或负载在聚合物上的锇化合物作为氧化剂以及使用有机胺n-氧化物作为共氧化剂，在对锇衍生物呈惰性的溶剂中在20℃和60℃之间的温度下操作至少12小时进行步骤a)。
3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤b)的去苄基化反应在以下条件下进行：
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中使用乙酸酐作为反应物，在选自异丙基乙酸酯、乙酸乙酯、四氢呋喃、吡啶和甲苯的溶剂中，在无机碱或有机碱的存在下，使用三氟乙酸酐或4-二甲氨基吡啶(4-dmap)作为催化剂，在5℃和40℃之间的温度下操作至少2小时进行步骤c)的从中间体3到中间体4的彻底乙酰化反应。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤d)中，通过以下顺序的操作进行纯化中间体4以得到中间体5：
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中根据异构体15β,16β,17β的初始含量将步骤d)的纯化重复所需的次数以获得所需的纯度水平。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述纯度水平对应于异构体15β,16β,17β的含量≤0.15％。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤e)的从中间体5到雌四醇的水解反应在以下条件下进行：
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤f)中，通过以下顺序的操作将雌四醇转化为雌四醇一水合物：
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中操作f.1)的溶液被加热回流直至达到完全溶液。
11.根据权利要求10所述的方法，其中使用基于官能化的硅胶的清除剂处理所述溶液以消除钯的残留含量。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述清除剂是mp。
