本发明属于蛋白质工程，具体涉及一种具有保护皮肤弹性及抗炎功效的燕窝肽ⅰ及其应用。
背景技术：
1、燕窝是雨燕科动物金丝燕及多种同属燕类用唾液与绒羽等混合凝结所筑成的巢窝，主要产于东南亚各国以及我国南海诸岛。《本草纲目拾遗》载：“燕窝味甘淡平，大养肺阴，化痰止嗽，补而能清，为调理虚损劳疾之圣药。一切病之由于肺虚不能清肃下行者，用此者可治之。”《本草再新》载：“燕窝大补元气，润肺滋阴，治虚劳咳嗽、咯血、吐血，引火归源，润肠开胃”。可食用燕窝含有多种营养素，其主要营养素包括蛋白质、糖类、脂质、维生素、氨基酸和多种重要无机元素，其中蛋白质含量高达50％左右，其主要的功能成分是唾液酸和表皮生长因子，具有抗氧化、抗衰老、增强免疫力等生理功能。因此，燕窝一直被用作滋补、美容和养生的保健食品。
2、弹性蛋白是细胞外基质中不溶性、大分子纤维状蛋白质，它和微纤维共同组成结缔组织中的弹性纤维。弹性蛋白占皮肤总蛋白含量的2～4％，具有高度的延伸性和韧性，能够赋予皮肤较强的弹性和反冲力，负责将变形后的皮肤恢复到正常形态。皮肤衰老是当今社会备受关注的话题，皮肤老化的主要特征为表皮变薄、真表皮连接处变平和真皮细胞外基质(ecm)的整体降解。弹性纤维在皮肤老化中具有重要作用，如果弹性蛋白发生降解和破坏就会造成皮肤弹性减退、皮肤松垂、各种皱纹。弹性蛋白酶的高度表达会使弹性蛋白发生酶解，破坏弹性蛋白。因此，弹性蛋白酶抑制率是考察产品抗皮肤衰老能力的指标之一。
3、燕窝中蛋白质含量虽然高，但其中的糖蛋白耐消化成分占比很高，消化产物包括不溶物、大分子量的蛋白，不能被有效地吸收利用。并且燕窝多肽中总糖的溶解度低于40％，未溶解态唾液酸质量分数达到56％左右。caco-2细胞模拟吸收也表明燕窝消化产物吸收率有限。现有燕窝肽的制备方法研究很多，例如：专利cn110468176a公开了一种利用菠萝蛋白酶酶解获得燕窝小分子肽的制备方法、专利cn115807049a公开了一种高抗氧化活性燕窝肽的制备方法、专利cn115261433a公开了一种高活性抗疲劳肽的加工方法。但采用这些方法制备的燕窝肽分子量大、肽含量高、糖含量和唾液酸含量低。目前关于燕窝肽抑制弹性蛋白酶活性和燕窝肽抗炎作用的研究较少。
技术实现思路
1、为了解决上述的技术问题，充分利用燕窝中多肽的功效，促进燕窝在人体内的消化和吸收，提高人们的健康水平和燕窝的应用价值，本发明提供以下技术方案：
2、第一方面，本发明提供一种具有保护皮肤弹性及抗炎功效的燕窝肽ⅰ，其氨基酸序列为darfedlpvy(seq id no:1)。
3、第二方面，本发明提供一种多肽混合物，其包含第一方面所述的燕窝肽ⅰ。
4、优选地，所述多肽混合物中的糖肽比为0.2～0.8，例如：0.20、0.40、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80。
5、优选地，所述多肽混合物中的唾液酸含量为9～18wt％，例如：9.0wt％、11.0wt％、13.0％、15.0wt％、16.25wt％、17.50wt％、18.0wt％。
6、优选地，所述多肽混合物中相对分子质量为4000～6000da的多肽的含量≥60％，例如：60％、60.25％、65.38％、68.31％、70％、75％、80％。
7、优选地，所述多肽混合物中相对分子质量为3000～4000da的糖链的含量≥55％，例如：55％、56.28％、58.30％、60.25％、63.15％、66.37％、70.25％。
8、优选地，所述多肽混合物中相对分子质量为1000～2000da的肽链的含量≥65％，例如：65％、66.35％、68.25％、70.24％、70.26％、72.35％、75.16％。
9、第三方面，本发明提供第二方面所述多肽混合物的制备方法，具体包括以下步骤：
10、(1)将燕窝泡发、粉碎得到燕窝浆；
11、(2)向所述燕窝浆中加入蛋白酶，在100～300mpa静水压下酶解，然后灭酶、离心得到上清液；
12、(3)将所述上清液经过醇沉、离心、旋蒸、干燥制得所述多肽混合物。
13、优选地，步骤(1)中的泡发为将燕窝加入水中，然后充分混合均匀。
14、进一步的，水的质量为所述燕窝干重的20～50倍，例如：20倍、25倍、30倍、35倍、40倍、45倍、50倍。
15、优选地，将泡发后的燕窝采用胶体磨粉碎，胶体磨磨齿间隙在80～120μm。从而使得所述燕窝浆中的颗粒达到微米级。
16、优选地，所述胶体磨的研磨时间为20～40min，例如：20min、25min、30min、35min、40min。
17、优选地，步骤(2)中的蛋白酶选自风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶中的任意一种或多种的组合。
18、进一步的，当蛋白酶为风味蛋白酶时，调节燕窝浆ph至7.0～8.0，以酶底比为5000～7000u/mg(酶活性/燕窝干重)加入风味蛋白酶，混合后真空包装在聚乙烯袋中，立即放入高静水压处理(hpp)设备中，在45～55℃、静水压100～300mpa条件下处理10～14h。
19、进一步的，当蛋白酶为木瓜蛋白酶时，调节燕窝浆ph至5.5～7.5，以酶底比为5000～7000u/mg(酶活性/燕窝干重)加入木瓜蛋白酶，混合后真空包装在聚乙烯袋中，立即放入高静水压处理(hpp)设备中，在37～60℃、静水压100～300mpa条件下处理10～14h。
20、进一步的，当蛋白酶为碱性蛋白酶时，调节燕窝浆ph至9.5～10.5，以酶底比为5000～7000u/mg(酶活性/燕窝干重)加入碱性蛋白酶，混合后真空包装在聚乙烯袋中，立即放入高静水压处理(hpp)设备中，在35～50℃、静水压100～300mpa条件下处理10～15h。
21、优选地，步骤(2)中的灭酶温度为90～100℃，例如：90℃、92℃、95℃、97℃、100℃。灭酶时间10～30min，例如：10min、15min、20min、25min、30min。
22、优选地，步骤(2)中的离心转速为5000～10000r/min，例如：5000r/min、6000r/min、7000r/min、8000r/min、9000r/min、10000r/min.
23、优选地，步骤(2)中的离心时间为15～30min，例如：15min、20min、25min、30min。
24、优选地，步骤(3)中的醇沉、离心和旋蒸的过程至少重复1次。
25、优选地，步骤(3)中醇沉时，无水乙醇的体积分数为总体系的40～60％，例如：40％、45％、50％、55％、60％。
26、优选地，步骤(3)中醇沉时间为10～30min，例如：10min、15min、20min、25min、30min。
27、优选地，步骤(3)中的离心转速为3000～5000r/min，例如：3000r/min、3500r/min、4000r/min、4500r/min、5000r/min。
28、优选地，步骤(3)中的离心时间为15～30min，例如：10min、15min、20min、25min、30min。
29、优选地，步骤(3)中的旋蒸转速为100～200r/min，例如：100r/min、120r/min、150r/min、180r/min、200r/min。
30、优选地，步骤(3)中的旋蒸温度为30～50℃，例如：30℃、35℃、40℃、45℃、50℃。
31、优选地，步骤(3)中的干燥采用冷冻干燥或者低温烘干，进一步优选为冷冻干燥。
32、进一步的，所述冷冻干燥为将旋蒸后的浓缩液先速冻，然后冻干。
33、进一步的，所述冷冻干燥的温度为-90～-60℃，例如：-90℃、-85℃、-80℃、-75℃、-70℃、-65℃、-60℃。
34、进一步的，所述速冻的时间为10～12h，例如：10h、10.5h、11h、11.5h、12h。
35、进一步的，所述冻干的时间为12～24h，例如：12h、14h、16h、18h、20h、22h、24h。
36、第四方面，本发明提供一种组合物，其包含第一方面所述的燕窝肽ⅰ或者第二方面所述的多肽混合物。
37、优选地，所述组合物包括食品、保健品、化妆品和药品。
38、优选地，所述组合物中包含食品、保健品、化妆品或药品中允许添加的辅料。
39、第五方面，本发明提供第一方面所述的燕窝肽ⅰ或第二方面所述的多肽混合物在制备具有抑制弹性蛋白酶的产品中的应用。
40、优选地，所述产品为食品、保健品、化妆品或药品。
41、优选地，所述产品中包含食品、保健品、化妆品或药品中允许添加的辅料。
42、进一步的，所述燕窝肽ⅰ的服用剂量为10mg/kg体重/天-30mg/kg体重/天，例如：10mg/kg体重/天、15mg/kg体重/天、20mg/kg体重/天、25mg/kg体重/天、30mg/kg体重/天。
43、第六方面，本发明提供第一方面所述的燕窝肽ⅰ或第二方面所述的多肽混合物在制备抗炎产品中的应用。
44、优选地，所述抗炎产品为食品、保健品、化妆品或药品。
45、优选地，所述抗炎产品中包含食品、保健品、化妆品或药品中允许添加的辅料。
46、进一步的，所述燕窝肽ⅰ的服用剂量为10mg/kg体重/天-30mg/kg体重/天，例如：10mg/kg体重/天、15mg/kg体重/天、20mg/kg体重/天、25mg/kg体重/天、30mg/kg体重/天。
47、本发明的有益效果：
48、本发明中的燕窝肽ⅰ具有抑制弹性蛋白酶和抗炎的双重功效，其弹性蛋白酶抑制率为96.60％，可以抑制皮肤中弹性蛋白的降解，延缓皮肤老化。含有燕窝肽的多肽混合物在化妆品、食品、药品等领域具有广阔的应用前景，促进了燕窝产品的进一步开发，提高了燕窝的经济价值与利用价值。
1.一种具有保护皮肤弹性及抗炎功效的燕窝肽ⅰ，其特征在于：所述燕窝肽ⅰ的氨基酸序列为darfedlpvy。
2.一种多肽混合物，其特征在于：所述多肽混合物包含权利要求1所述的燕窝肽ⅰ。
3.一种组合物，其特征在于：所述组合物中包含权利要求1所述的燕窝肽ⅰ或权利要求2所述的多肽混合物。
4.根据如权利要求3所述的组合物，其特征在于：所述组合物中还包含食品、保健品、化妆品或药物中允许添加的辅料。
5.权利要求1所述的燕窝肽或者权利要求2-3中任一项所述的多肽混合物在制备具有抑制弹性蛋白酶活性的产品中的应用。
6.权利要求1所述的燕窝肽或者权利要求2-3中任一项所述的多肽混合物在制备抗炎产品中的应用。
7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于：所述燕窝肽ⅰ的服用剂量为10mg/kg体重/天-30mg/kg体重/天。
8.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于：所述产品为食品、保健品、化妆品或药品。
