本发明涉及抗体,具体而言,涉及抗脂联素抗体、检测脂联素的试剂和试剂盒。
背景技术:
1、脂联素(adiponectin,apn),也称为acrp30、gbp28、adipoq或脂连蛋白,是一种主要由脂肪细胞分泌的蛋白质激素。人脂联素单体由244个氨基酸组成,包括有3个区域:氨基末端信号序列、胶原结构域和羧基末端的球形结构域。其在血清中的浓度范围为5~30mg/l,约占人血清蛋白总量0.01%。
2、脂联素的主要生物学作用是调节机体的能量代谢,促进葡萄糖、脂肪的分解代谢,改善胰岛素的敏感性。近年来越来越多的研究表明,脂联素水平与肥胖、糖尿病、高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、胰岛素抵抗等心血管危险因素密切相关,患者血清的脂联素水平较健康人明显降低。脂联素具有增强胰岛素敏感性、抗动脉粥样硬化形成、抗炎症和血管损伤后抗内膜增生的作用。因此,检测血中脂联素的含量对于认识其生理学功能、调控机制及与ii型糖尿病、冠心病、高血压等疾病发生发展的关系有重要意义。
3、目前,脂联素的检测方法主要有荧光免疫层析法,其是基于抗体和抗原的特异性反应,同时利用荧光对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法。类似的免疫学检测方法还有放射免疫法、酶联免疫分析法、化学发光法等。上述免疫学检测方法都需要针对于脂联素的抗体。因此,本领域对于有效且结合脂联素并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。
4、有鉴于此,特提出本发明。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供抗脂联素抗体、检测脂联素的试剂和试剂盒。
2、本发明是这样实现的:
3、第一方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体,所述抗体包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3,所述hcdr1/hcdr2/hcdr3组合与seq id no:20至seq id no:26任一所示重链可变区包含的hcdr1/hcdr2/hcdr3组合相同,所述lcdr1/lcdr2/lcdr3组合与seq id no:27所示轻链可变区包含的lcdr1/lcdr2/lcdr3组合相同。
4、在可选的实施方式中,所述cdrs由kabat、chothia、abm、contact或imgt系统定义。
5、第二方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体,所述抗体包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3,所述hcdr1的氨基酸序列包括seq id no:1,或如seq id no:1所示;所述hcdr2的氨基酸序列包括seq id no:2,或如seq id no:2所示;所述hcdr3的氨基酸序列包括seq id no:3、4、5或6,或如seq id no:3、4、5或6所示;所述lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列依次包括seq id no:7~9或依次如seq id no:7~9所示。
6、第三方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体,所述抗体包含重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区含有hfr1-hcdr1-hfr2-hcdr2-hfr3-hcdr3-hfr4的序列结构,所述轻链可变区区含有lfr1-lcdr1-lfr2-lcdr2-lfr3-lcdr3-lfr4的序列结构,所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列为上述的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列。
7、第四方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体,所述抗体包括重链可变区和/或轻链可变区,所述重链可变区包括seq id no:20至26任一所示的氨基酸序列;或,由seqid no:20至26任一所示的氨基酸序列组成;所述轻链可变区包括seq id no:27所示的氨基酸序列;或,由seq id no:27所示的氨基酸序列组成。
8、第五方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体,所述抗体包括重链和轻链;所述重链包括seq id no:30至36任一所示的氨基酸序列;或,由seq id no:30至36任一所示的氨基酸序列组成;所述轻链包括seq id no:37所示的氨基酸序列;或,由seq id no:37所示的氨基酸序列组成。
9、第六方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体,所述抗体与前述实施例所述的抗体结合脂联素氨基酸序列中的相同表位;或,所述抗体与前述实施例所述的抗体竞争性结合脂联素。
10、第七方面,本发明实施例提供了一种抗脂联素抗体偶联物,其包括如前述实施例所述的抗体。
11、第八方面,本发明实施例提供了一种试剂或试剂盒,其包括如前述实施例所述的抗体或如前述实施例所述的抗体偶联物。
12、第九方面,本发明实施例提供了一种检测脂联素的方法,其包括:将如前述实施例所述的抗体、抗体偶联物、试剂或试剂盒与待测样本中的脂联素接触,形成免疫复合物。
13、第十方面,本发明实施例提供了一种分离的核酸,其编码前述实施例所述的抗体。
14、第十一方面,本发明实施例提供了一种载体,其含有前述实施例所述的分离的核酸。
15、第十二方面,本发明实施例提供了一种细胞,其含有前述实施例所述的分离的核酸或前述实施例所述的载体。
16、第十三方面,本发明实施例提供了一种制备前述实施例所述的抗体的方法,其包括:培养前述实施例所述的细胞。
17、第十四方面,本发明实施例提供了如前述实施例所述的抗体、抗体偶联物、试剂或试剂盒在检测脂联素或制备检测脂联素的产品中的应用。
18、本发明具有以下有益效果:
19、本发明公开的抗脂联素抗体包括上述重链互补决定区和轻链互补决定区,该抗体为脂联素的检测提供了重要的原料来源,具有改善的亲和力或活性。
1.一种抗脂联素抗体,所述抗体包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3,其特征在于,所述hcdr1/hcdr2/hcdr3组合与seq id no:20至seq id no:26任一所示重链可变区包含的hcdr1/hcdr2/hcdr3组合相同,所述lcdr1/lcdr2/lcdr3组合与seq id no:27所示轻链可变区包含的lcdr1/lcdr2/lcdr3组合相同。
2.根据权利要求1所述的抗体,其特征在于,所述cdrs由kabat、chothia、abm、contact或imgt系统定义。
3.一种抗脂联素抗体,其特征在于,所述抗体包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3,所述hcdr1的氨基酸序列包括seq id no:1,或如seq id no:1所示;所述hcdr2的氨基酸序列包括seq id no:2,或如seq id no:2所示;所述hcdr3的氨基酸序列包括seq idno:3、4、5或6,或如seq id no:3、4、5或6所示;所述lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列依次包括seq id no:7~9或依次如seq id no:7~9所示。
4.根据权利要求1~3任一项所述的抗体,还包括hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3和lfr4;所述hfr1至hfr4依次包括seq id no:10至seq id no:13或与其具有至少80%同一性的氨基酸序列;或,依次如seq id no:10至seq id no:13或与其具有至少80%同一性的氨基酸序列所示;所述lfr1至lfr4依次包括seq id no:14至seq id no:17或与其具有至少80%同一性的氨基酸序列;或,依次如seq id no:14至seq id no:17或与其具有至少80%同一性的氨基酸序列所示。
5.一种抗脂联素抗体,其特征在于,所述抗体包含重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区含有hfr1-hcdr1-hfr2-hcdr2-hfr3-hcdr3-hfr4的序列结构,所述轻链可变区区含有lfr1-lcdr1-lfr2-lcdr2-lfr3-lcdr3-lfr4的序列结构,所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列为权利要求1~3任一项所述的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列,所述hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3、lfr4的氨基酸序列为权利要求4所述的hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3、lfr4的氨基酸序列。
6.一种抗脂联素抗体,其特征在于,所述抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区包括seq id no:20至26任一所示的氨基酸序列;或,由seq id no:20至26任一所示的氨基酸序列组成;
7.根据权利要求1~6任一所述的抗体,其特征在于,所述抗体还包含恒定区;
8.一种抗脂联素抗体,其特征在于,所述抗体包括重链和轻链;所述重链包括seq idno:30至36任一所示的氨基酸序列;或,由seq id no:30至36任一所示的氨基酸序列组成;所述轻链包括seq id no:37所示的氨基酸序列;或,由seq id no:37所示的氨基酸序列组成。
9.一种抗脂联素抗体,所述抗体与权利要求1~8任一项所述的抗体结合脂联素氨基酸序列中的相同表位;或,所述抗体与权利要求1~8任一项所述的抗体竞争性结合脂联素。
10.根据权利要求1~9任一项所述的抗体,其特征在于,所述抗体以kd≤5.87×10-7m的亲和力结合脂联素;
11.一种抗脂联素抗体偶联物,其特征在于,其包括如权利要求1~10任一项所述的抗体;
12.一种试剂或试剂盒,其特征在于,其包括如权利要求1~10任一项所述的抗体或如权利要求11所述的抗体偶联物。
13.一种检测脂联素的方法,其特征在于,其包括:
14.一种分离的核酸、载体、细胞或制备权利要求1~10任一项所述的抗体的方法,其特征在于,所述核酸编码权利要求1~10任一项所述的抗体;
15.如权利要求1~10任一项所述的抗体、如权利要求11所述的抗体偶联物或如权利要求12所述的试剂或试剂盒在制备检测脂联素的产品中的应用。