本发明属于生物医药，更具体地，涉及一种lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用。
背景技术：
1、多发性骨髓瘤(mm)是一种骨髓浆细胞异常增生的恶性肿瘤，目前尚无法治愈。尽管新药不断问世，但几乎所有患者都面临复发难治阶段。对于多线治疗后复发/难治型(rr)mm患者，预后非常差，平均生存期不足半年。嵌合抗原受体(car t)治疗的出现给rrmm的治疗带来希望，很有可能成为未来治愈mm的重要手段。嵌合抗原受体t细胞(car t细胞)是指通过将识别肿瘤相关抗原的单链抗体和胞内信号域“免疫受体酪氨酸活化基序”在体外进行基因重组，生成重组质粒，再在体外通过转染技术转染到患者的t细胞，使患者t细胞表达肿瘤抗原受体，转染后经过纯化和大规模扩增后的t细胞。car t细胞在体内、外都具有对特定肿瘤抗原高度亲和性及对抗原负载细胞高效杀伤特性，是近几年被改良应用到临床上的一种细胞免疫疗法。
2、目前，对mm的car t细胞免疫治疗，主要集中在靶点bcma，虽其疗效良好，但由于靶点抗原的表达丢失或降低，仍有50％以上患者在应用car t细胞治疗后3年出现复发难治；尤其是对于bcma阴性或bcma低表达的mm病患来说，在接受靶向bcmacar t细胞治疗后不仅会复发，还存在靶向逃逸的问题。最近研究表明，gprc5d在多发性骨髓瘤细胞中特异性高表达，而在其他肿瘤细胞系中无实质性的表达，且与bcma表达无关，是现有多发性骨髓瘤cart细胞治疗的热门靶点。
3、但gprc5d作为gpcr家族的一员，同样也存在细胞表面gprc5d抗原低表达，而且还可能会受到细胞内吞作用的调控，导致gprc5d在多发性骨髓瘤细胞表面的表达量降低甚至丢失，进而影响car t细胞治疗疗效。如何提高靶向gprc5d car t细胞治疗的疗效还需要进一步深入研究，而寻找能够促进靶点gprc5d表达的途径，利于提升靶向gprc5d car t细胞治疗疗效，因此研究一种多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，具有重大的临床应用前景和实践意义。
技术实现思路
1、针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其目的在于发现通过lpar拮抗剂来拮抗lpar1或lpar5蛋白功能，能够稳定促进多发性骨髓瘤细胞膜表面gprc5d靶点的表达，而且还意外发现同时能提升gprc5d car t细胞的杀伤力，利于提升gprc5d car t细胞对多发性骨髓瘤的治疗效果，由此解决现有gprc5d car t细胞在gprc5d抗原低表达的多发性骨髓瘤患者中治疗效果较差，易出现复发、耐药的技术问题。
2、为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其所述lpar拮抗剂包括lpar1、lpar5拮抗剂中任意一种或组合。
3、优选地，所述lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其所述lpar拮抗剂为lpar1拮抗剂和lpar5拮抗剂。
4、优选地，所述lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其所述lpar1拮抗剂包括特异性拮抗剂am966；所述lpar5拮抗剂包括特异性拮抗剂tc lpa54。
5、优选地，所述lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其应用于制备复发型多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物。
6、按照本发明的另一方面，还提供了一种多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其所述联合治疗药物，包括lpar1拮抗剂和/或lpar5拮抗剂，以及靶向gprc5d car t细胞。
7、优选地，所述多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其以gprc5dcar t细胞与多发性骨髓瘤细胞效靶比为1:1计，所述拮抗剂添加浓度为0.5μm以上。
8、优选地，所述多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其以gprc5dcar t细胞与多发性骨髓瘤细胞效靶比为1:1计，所述lpar1拮抗剂添加浓度为1μm以上；所述lpar5拮抗剂添加浓度为5μm以上。
9、优选地，所述多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其所述lpar1拮抗剂包括特异性拮抗剂am966；所述lpar5拮抗剂包括特异性拮抗剂tc lpa5 4。
10、优选地，所述多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其所述lpar1拮抗剂为am966，其添加浓度为1μm，所述lpar5拮抗剂为tc lpa5 4，其添加浓度为5μm。
11、优选地，所述多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其所述联合治疗药物，包括lpar1拮抗剂和lpar5拮抗剂，以及靶向gprc5d car t细胞。
12、总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，能够取得下列有益效果：
13、本发明发现lpar1、lpar5能够与gprc5d形成异二聚体复合物，当lpar1、lpar5功能激活后加强内化作用，导致已形成的lpar1/lpar5-gprc5d复合物从细胞膜表面进入细胞内，导致细胞膜表面gprc5d表达量降低，而当lpar1、lpar5存在但其功能不被激活，细胞膜表面gprc5d表达量增加，通过lpar拮抗剂拮抗lpar1、lpar5功能，能够抑制lpar1和lpar5的内化作用，稳定lpar1/lpar5-gprc5d蛋白复合物在细胞膜表面的锚定，从而促进多发性骨髓瘤细胞膜表面gprc5d表达，进而增强靶向gprc5d car-t细胞对mm细胞的识别，提升gprc5dcar t细胞对多发性骨髓瘤细胞的杀伤力，并发现靶抗原gprc5d表达的提高同时刺激了靶向gprc5d car t细胞的效应功能，表现为tnf-α、il-2阳性表达的car t细胞比例的升高，多方面结果显示联合应用lpar拮抗剂可以实现提升gprc5d car t细胞的治疗效果。
14、在本发明中将lpar1、lpar5拮抗剂联合gprc5d car t细胞制备药物，可用于治疗多发性骨髓瘤，尤其是用于治疗gprc5d抗原低表达的多发性骨髓瘤患者。
1.一种lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其特征在于，所述lpar拮抗剂为lpar1特异性拮抗剂am966；所述car t细胞为靶向gprc5d car t细胞。
2.如权利要求1所述的lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其特征在于，所述lpar拮抗剂，还包括lpar5特异性拮抗剂tc lpa5 4。
3.如权利要求1或2所述的lpar拮抗剂在制备多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物中的应用，其特征在于，应用于制备复发型多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物。
4.一种多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其特征在于，所述联合治疗药物以gprc5d为靶点，其包括lpar1特异性拮抗剂am966，以及靶向gprc5d car t细胞。
5.如权利要求4所述的多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其特征在于，所述联合治疗药物，还包括lpar5特异性拮抗剂tc lpa5 4。
6.如权利要求4或5所述的多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其特征在于，以gprc5d car t细胞与多发性骨髓瘤细胞效靶比为1:1计，所述拮抗剂添加浓度为0.5μm以上。
7.如权利要求6所述的多发性骨髓瘤car t细胞联合治疗药物，其特征在于，以gprc5dcar t细胞与多发性骨髓瘤细胞效靶比为1:1计，所述lpar1拮抗剂添加浓度为1μm以上；所述lpar5拮抗剂添加浓度为5μm以上。
