本发明属于药物分析，具体涉及一种注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦杂质a的检测方法。
背景技术：
1、注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠为头孢噻肟钠和他唑巴坦钠的复方制剂，目前已有南京优科制药有限公司和湘北威尔曼制药股份有限公司两家获批上市。在该复方制剂中，头孢噻肟钠为第三代半合成头孢菌素，他唑巴坦钠为半合成β-内酰胺酶抑制剂，二者联合用药可以增强抑菌效果并拓宽抗菌谱。
2、在该复方制剂的杂质谱研究过程中，研究者发现他唑巴坦杂质a将直接影响制剂的质量和性能，甚至对患者产生严重后果，因此需要合适的方法来检测复方制剂中他唑巴坦杂质a，以便控制其在注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中含量限度，确保注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠质量符合相关药典的质量要求。
3、目前，尚未见如何检测注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦杂质a含量的公开报道。专利文献cn108802206a公开了一种同时测定注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中主要成分和主要杂质含量的方法，该方法通过hplc检测方法对头孢噻肟杂质b和杂质f进行定位。专利文献cn101592637a公开了一种新的复方头孢噻肟钠他唑巴坦钠的检测方法，该方法使用能够检测头孢噻肟钠和他唑巴坦钠的含量以及有关杂质头孢噻肟钠聚合物的含量。这两篇专利文献的方法均不能检测他唑巴坦杂质a的含量。非专利文献《注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠（6∶1)含量测定方法的研究》[1]和《注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠含量测定方法的研究》[2]等只能检测这两种成分的含量，而不能用于检测他唑巴坦杂质a的含量。
4、[1]陈爱萍,朱雪萍,戴云志.注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠(6∶1)含量测定方法的研究[j].天津药学,2016,28(05):23-25.
5、[2]董伍爱,黄红谦,周毓惠.注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠含量测定方法的研究[j].中国现代医学杂志,2002,(24):96-98.
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦杂质a的检测方法，而且本发明的检测方法准确度高，分离度好，稳定性好，操作简便，重复性好，针对性强，具有很好的应用价值。
2、本发明提供一种注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦杂质a的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法，步骤如下：
3、(1) 制备供试品溶液：取待测头孢噻肟钠他唑巴坦钠，溶解，即得；
4、(2) 制备杂质对照品溶液；
5、(3) 分别吸取供试品溶液和杂质对照品溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；所述色谱柱为sepax hp-c18；
6、流动相由a相和b相组成，a相由每份磷酸二氢钾4.08g加水900ml溶解，加10%四丁基氢氧化铵溶液15ml，加水稀释至1000ml，混匀，用磷酸调节ph值至4.0制得，b相为乙腈；
7、所述高效液相色谱仪检测时，检测波长为230nm；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；进样量为20μl；
8、所述高效液相色谱仪检测时，流动相洗脱程序为梯度洗脱程序，梯度洗脱程序为：
9、；
10、步骤(1)中，所述供试品溶液中，待测头孢噻肟钠他唑巴坦钠中的他唑巴坦的浓度为0.5-1.5mg/ml；
11、步骤(1)中，溶解待测头孢噻肟钠他唑巴坦钠的溶剂为磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液。
12、在一个实施方案中，步骤(1)中，所述供试品溶液中，待测头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦的浓度为1.0mg/ml。
13、在一个实施方案中，步骤(1)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为(85-95):(5-15)。
14、在一个实施方案中，步骤(1)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为90:10。
15、在一个实施方案中，步骤(2)中，所述杂质对照品溶液的制备方法为：称取他唑巴坦杂质a对照品，利用磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液溶解得杂质对照品贮备液，再取贮备液于量瓶中稀释即得。
16、在一个实施方案中，步骤(2)中，所述杂质对照品溶液中，他唑巴坦杂质a对照品浓度为5-15μg/ml；
17、和/或，步骤(2)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为(85-95):(5-15)。
18、在一个实施方案中，步骤(2)中，所述杂质对照品溶液中，他唑巴坦杂质a对照品浓度为10μg/ml。
19、在一个实施方案中，步骤(2)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为90:10。
20、在一个实施方案中，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。
21、本发明的注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦杂质a的检测方法可以将他唑巴坦杂质a有效分离，可以用于检测注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中的杂质a，准确测量他唑巴坦杂质a的含量，测定结果准确度高，分离度好，稳定性好，操作简便，重复性好，针对性强，具有很好的应用价值，保证产品质量，应用前景广阔。
22、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
23、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
1.一种注射用头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦杂质a的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱法，步骤如下：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液中，待测头孢噻肟钠他唑巴坦钠中他唑巴坦的浓度为1.0mg/ml。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为(85-95):(5-15)。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为90:10。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述杂质对照品溶液的制备方法为：称取他唑巴坦杂质a对照品，利用磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液溶解得杂质对照品贮备液，再取贮备液于量瓶中稀释即得。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述杂质对照品溶液中，他唑巴坦杂质a对照品浓度为5-15μg/ml；
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述杂质对照品溶液中，他唑巴坦杂质a对照品浓度为10μg/ml。
8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液中磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为90:10。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。
