本发明属于微生物发酵，具体涉及一种发酵粘液乳杆菌菌株(limosilactobacillusfermentum)a21215发酵上清液及其制备方法和应用。
背景技术：
1、随着人们饮食习惯和生活方式改变，高尿酸血症的日益流行已经成为世界性的公共卫生问题，。高尿酸血症是一种常见的代谢异常综合征，常常伴随着高血压、糖尿病、慢性肾病和心血管疾病等并发症。
2、临床上治疗高尿酸血症的药物根据其成因主要分为两类。一类能够抑制xod活性，如别嘌醇，非布司他等。另一类可抑制尿酸转运蛋白从而阻断尿酸重吸收，如丙磺舒，苯溴马隆等。但这些药物可能具有肝毒性或导致严重的过敏。由于大多数高尿酸血症轻症患者表现为无明显症状，只有少部分严重病人会表现出痛风或急性关节炎等，因此许多国家对高尿酸血症患者使用高风险的药物治疗存在争议。因此，寻找更安全、副作用更小的降尿酸药物迫在眉睫。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液及其制备方法，制备的发酵上清液具有良好的抗氧化能力，同时可降低高尿酸血症中尿酸水平，抑制黄嘌呤氧化酶活性抑制尿酸合成，减轻炎症反应，为制备新型降尿酸药物提供了活性成分。
2、本发明提供了一种发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液的制备方法，包括以下步骤：
3、将发酵粘液乳杆菌菌株a21215的种子液接种于含益生元的mrs液体培养基中厌氧培养，得到的发酵液进行固液分离，收集液相，经乙酸乙酯萃取，收集有机相，得到发酵上清液；
4、所述发酵粘液乳杆菌菌株a21215的保藏编号为gdmccno:62963。
5、优选的，所述含益生元的mrs液体培养基中益生元为低聚半乳糖；
6、所述益生元的浓度为0.01％～0.05％。
7、优选的，所述厌氧培养的温度为36～38℃；所述厌氧培养的时间为16～24h。
8、优选的，所述厌氧培养时，种子液的接种量为1％～5％。
9、优选的，所述种子液的od值为1.5～2.5。
10、优选的，所述固液分离的方法依次包括离心和滤膜过滤；
11、所述离心的速度为9000～11000rpm；所述离心的时间为13～17min；
12、所述滤膜过滤为离心得到的上清液用0.22μm滤膜过滤。
13、优选的，所述萃取时，液相和乙酸乙酯的体积比为1：(0.5～3)；
14、所述萃取的时间为8～16h。
15、本发明提供了所述制备方法制备得到的发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液。
16、本发明提供了所述发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液在制备以下至少一种疾病的药物中应用：
17、a.预防和/或治疗高尿酸血症；
18、b.抑制尿酸生物合成；
19、c.减轻炎症反应；
20、d.抗氧化性。
21、优选的，所述预防和/或治疗高尿酸血症表现为降低血清尿酸水平；
22、所述抑制尿酸生物合成表现为抑制黄嘌呤氧化酶活性；
23、所述减轻炎症反应表现为抑制促炎细胞因子的分泌；
24、所述抗氧化性包括对羟基自由基和/或dpph自由基的清除。
25、本发明提供了一种发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液的制备方法，包括以下步骤：将发酵粘液乳杆菌菌株a21215的种子液接种于含益生元的mrs液体培养基中厌氧培养，得到的发酵液进行固液分离，收集液相，经乙酸乙酯萃取，收集有机相，得到发酵上清液；所述发酵粘液乳杆菌菌株a21215的保藏编号为gdmccno:62963。所述发酵上清液具有良好的抗氧化特性，对羟基自由基和dpph自由基的清除率均达到55％以上。同时所述发酵上清液对由高嘌呤饲料-氧嗪酸钾联合诱导的高尿酸血症表现出良好的缓解作用，具体表现为显著降解高尿酸小鼠的血清尿酸(ua)水平，显著抑制高尿酸血症小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶(xod)活性，显著下调高尿酸血症小鼠血清中促炎细胞因子(il-6、tnf-α、il-1β)的水平。此外，所述发酵上清液来源于可食用的发酵粘液乳杆菌，较传统高尿酸血症的药物不同，其对机体的肝肾副作用极少，具有良好的药物安全性。另外，所述发酵上清液较发酵粘液乳杆菌菌体而言，保存活力更加稳定，降低储存及运输的要求，有助于制备相关药品。可见，本发明提供的发酵上清液对预防和/或治疗高尿酸血症疾病具有重要意义。
1.一种发酵粘液乳杆菌(limosilactobacillusfermentum)菌株a21215发酵上清液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述含益生元的mrs液体培养基中益生元的浓度为低聚半乳糖；
3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述厌氧培养的温度为36～38℃；所述厌氧培养的时间为16～24h。
4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述厌氧培养时，种子液的接种量为1％～5％。
5.根据权利要求1或4所述制备方法，其特征在于，所述种子液的od值为1.5～2.5。
6.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述固液分离的方法依次包括离心和滤膜过滤；
7.根据权利要求1～4和6中任意一项所述制备方法，其特征在于，所述萃取时，液相和乙酸乙酯的体积比为1：(0.5～3)；
8.权利要求1～7中任意一项所述制备方法制备得到的发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液。
9.权利要求8所述发酵粘液乳杆菌菌株a21215发酵上清液在制备以下至少一种疾病的药物中应用：
10.根据权利要求9所述应用，其特征在于，所述预防和/或治疗高尿酸血症表现为降低血清尿酸水平；
