本发明涉及一种缺氧标志物及制药应用，属于生物医药。
背景技术：
1、在实体肿瘤中，由于肿瘤组织迅速增长，体积高度膨胀，肿瘤组织内部血管系统不完备，这些会导致肿瘤组织内氧气供应不足，有超过一半的晚期原位实体瘤存在局部缺氧，并分散在肿瘤的不同区域。为了应对缺氧情况，肿瘤细胞会释放促血管新生的因子，新生血管快速生长，反而使血管网发生紊乱，易于肿瘤细胞穿透从而形成远端转移。因此，缺氧在肿瘤的发生发展，尤其是转移的过程中起着非常重要的作用。肿瘤缺氧对于其发生发展至关重要，检测肿瘤的缺氧状态意义重大。因此，筛选和发现新的缺氧检测的标志物，具有广泛的临床意义，尤其是一些标志物还进一步影响了肿瘤的转移。
2、本发明的目的就是提供一种缺氧检测的标志物，进而提供其在制备肿瘤治疗药物中的应用。
技术实现思路
1、基于上述目的，本发明首先提供了一种以znf92基因为靶点的分子在制备缺氧类型肿瘤疾病治疗药物中的应用。
2、znf92属于krab-znf (kruppel-associated box domain zinc finger, kruppel相关盒域锌指)家族的灵长类特异性成员，该家族拥有700多个编码组织特异性转录抑制因子的基因，共同特征是在n端包含krab结构域，c端包含dna结合锌指结构域。znf92基因的cdna全场为3038 bp，开放阅读框含1554 bp，编码518个氨基酸，预计分子量为60.1 kda。关于znf92的报道很少，虽然早在1991年就被成功克隆，但直到2014年才首次提及，在肝癌细胞系hepg2中，znf92作为121个基因中的其中之一，其表达水平被降胆固醇药物阿伐他汀改变。在最新的研究中，znf92在乳腺癌中高表达，促进乳腺癌细胞的增殖和迁移，与乳腺癌的转移和预后生存期相关。
3、基于本发明的研究，人肝癌细胞hepg2和smmc7721通过缺氧处理后，znf92 mrna的表达水平显著降低，其蛋白水平也显著降低，显示znf92与缺氧状态下肿瘤细胞的生长具有关联性。在本发明的一个具体实施方案中，转染过表达znf92的肿瘤细胞侵袭能力显著降低，而且促进了上皮细胞标志物e-cadherin的表达，下调了间充质细胞标志物n-cadherin的表达，抑制上皮间质转化（emt）过程，从而发挥了抑制肿瘤细胞转移功能的技术效果，这和以往的znf92在乳腺癌中高表达，促进乳腺癌细胞的增殖和迁移的情况完全不同，显示了以znf92基因为靶点的分子在制备缺氧类型肿瘤疾病治疗药物中的应用前景。缺氧是肿瘤微环境的一个显著特征，是很多实体肿瘤的一种标志，在整个癌症发展过程中，缺氧可能产生不同的影响。特别是它可以刺激血管生成，致使癌细胞恶性增殖、抑制细胞凋亡、免疫逃避等；最终导致更加恶性和致命的癌症。
4、在一个优选的实施方案中，所述以znf92基因为靶点的分子为促进znf92表达的分子。
5、基于本发明的研究，过表达znf92基因可以显著降低肿瘤细胞侵袭能力和皮间质转化能力，因此，促进znf92表达的分子可以作为肿瘤治疗药物应用，以在低氧环境下为肿瘤细胞提供促进znf92表达的分子从而达到抑制肿瘤细胞的迁移和/或侵袭能力、上皮间质转化能力，最终促进肿瘤细胞的凋亡。
6、在一个更为优选的实施方案中，所述促进znf92表达的分子为含有znf92编码基因的载体。
7、在本发明的一个具体实施方案中，所述载体为慢病毒载体。
8、在本发明的一个具体实施方案中，所述znf92编码基因的序列如seq id no.1所示。
9、在本发明的一个具体实施方案中，所述肿瘤疾病治疗药物为抑制肿瘤细胞侵袭和/或抑制上皮间质转化的药物。本发明的实施例显示，过表达znf92编码基因可以显著抑制肿瘤细胞侵袭和/或抑制上皮间质转化。
10、在一个优选的实施方案中，所述缺氧类型肿瘤疾病为znf92 的mrna表达水平和/或蛋白水平显著降低的肿瘤疾病。
11、在一个更为优选的实施方案中，所述缺氧类型肿瘤疾病为肝肿瘤疾病。
12、其次，本发明提供了znf92作为缺氧类型肿瘤疾病诊断试剂盒中诊断标志物的应用，
13、在一个优选的实施方案中，所述试剂盒中含有检测待检测样本中的所述znf92编码基因的含量或者表达量的试剂。
14、在本发明的一个具体实施方案中，所述检测待检测样本中的znf92编码基因的含量的试剂为检测znf92的mrna的rt-pcr试剂盒。所述检测试剂盒含有序列分别如seq idno.2和seq id no.3所示的用于pcr扩增的上游引物和下游引物。
15、在本发明的另一个具体实施方案中，所述检测待检测样本中的znf92编码基因的表达量的试剂为检测znf92蛋白的免疫检测试剂盒。更为具体的，本发明提供一种蛋白免疫印迹法检测znf92蛋白的试剂盒。
16、在一个优选的实施方案中，所述肿瘤疾病为肝肿瘤疾病。
17、本发明通过在常氧与低氧条件下检测znf92在肝肿瘤细胞的mrna水平和蛋白水平的变化，发现znf92与肝肿瘤细胞在缺氧水平中的生长密切相关，提高肝肿瘤细胞的znf92的表达量，可以下调肝肿瘤细胞的侵袭能力、上皮间质转化（emt）能力。其中，升高znf92的表达可以使人肝癌细胞hepg2和smmc7721的侵袭能力分别降低了57.7%和67.6%；以及使人肝癌细胞hepg2和smmc7721的上皮细胞标志物e-cadherin蛋白的表达分别上调了101.7%和75.7%，使间充质细胞标志物n-cadherin的表达分别下调了64.2%和52.5%。由于缺氧是肿瘤微环境的一个显著特征，是很多实体肿瘤的一种标志，因此，znf92有望成为一类用于上述缺氧类型的癌症治疗的药物和诊断标记物。
1.以znf92基因为靶点的分子在制备缺氧类型肿瘤疾病治疗药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述以znf92基因为靶点的分子为促进znf92表达的分子。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述促进znf92表达的分子为含有znf92编码基因的载体。
4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述znf92编码基因的序列如seq idno.1所示。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺氧类型肿瘤疾病治疗药物为抑制肿瘤细胞侵袭和/或抑制上皮间质转化的药物。
6. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺氧类型肿瘤疾病为znf92 的mrna表达水平和/或蛋白水平显著降低的肿瘤疾病。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述肿瘤疾病为肝肿瘤疾病。
8. znf92作为缺氧类型肿瘤疾病诊断试剂盒中诊断标志物的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述试剂盒中含有检测待检测样本中的所述znf92编码基因的含量或者表达量的试剂。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述检测待检测样本中的所述znf92编码基因的含量的试剂为检测znf92的mrna的rt-pcr试剂盒。
11.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述检测待检测样本中的所述znf92编码基因的表达量的试剂为检测znf92蛋白的免疫检测试剂盒。
12.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述缺氧类型肿瘤疾病为肝肿瘤疾病。
