本发明属于单克隆抗体制备，具体涉及一种鸡fgl2蛋白单克隆抗体的制备方法。
背景技术：
1、纤维蛋白原样蛋白2（fibrinogen-like protein 2，fgl2 ）属于纤维蛋白原超家族成员之一，与纤维蛋白原β和γ的同源性为36%。fgl2蛋白有2种不同的表达形式，分别为膜结合表达(产物为mfgl2)和可溶性表达(产物为sfgl2)，蛋白的功能与其细胞定位和表达形式有关。mfgl2主要表达于巨噬细胞和内皮细胞，其氨基段结构域具有凝血酶原酶的活性，可通过将凝血酶原直接裂解为凝血酶，发挥免疫凝血活性。sfgl2主要由cd4+t细胞、cd8+t细胞和调节性t细胞(tregs)表达，只含有羧基端结构域，其羧基端的fred区域为其免疫抑制活性功能区，具有免疫调节作用。
2、fgl2主要作为一种新的免疫调节分子，通过作用于抗原递呈细胞（apc），不仅可抑制t细胞的增殖和分化，而且可抑制单核巨噬细胞（dc）的成熟，诱导b细胞凋亡，发挥免疫调节作用。研究表明，fgl2在多种疾病中发挥重要的免疫调节功能，包括病毒诱导的炎症、移植排斥反应、免疫抑制性疾病和肿瘤生成。
3、目前关于fgl2的功能研究主要在于人、小鼠和大鼠上，对于猪、牛、羊、禽类等研究较少，缺乏对应的特异性抗体是其主要原因之一。目前市场上商业化的fgl2单克隆抗体主要是人、小鼠和大鼠，未见关于鸡的fgl2单克隆抗体，所以，研制鸡fgl2单克隆抗体可为研究鸡fgl2蛋白的功能提供重要材料。
技术实现思路
1、针对上述，本发明的目的一在于提供一种杂交瘤细胞株，目的二在于提供一种鸡fgl2单克隆抗体，目的三在于提供上述鸡fgl2单克隆抗体的应用。所述单克隆抗体对鸡fgl2具有较强的特异性、较高的亲和力，其中单克隆抗体fgl2-4a1能用于鸡fgl2的ifa、western blot和ihc等检测。
2、为了实现上述目的，本发明采用的具体方案为：
3、一种杂交瘤细胞株fgl2，保藏编号为cctcc no：c202442。
4、一种鸡fgl2单克隆抗体4a1，由上述杂交瘤细胞株分泌得到。
5、进一步地，所述单克隆抗体为igg1亚类。所述单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列如seq id no.1所示、氨基酸序列如seq id no.3所示，轻链可变区的核苷酸序列如seqid no.2所示、氨基酸序列如seqid no.4所示。
6、上述鸡fgl2单克隆抗体在免疫学检测中的应用。所述应用是指采用所述单克隆抗体特异性结合鸡fgl2。所述免疫学检测方法为间接免疫荧光ifa、免疫组织化学ihc或蛋白质免疫印迹分析western-blot。
7、有益效果：本发明实施例通过克隆编码鸡fgl2基因片段，构建重组表达载体，将诱导表达获得的鸡fgl2重组蛋白作为免疫原免疫小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合，获得了可分泌抗鸡fgl2抗体的杂交瘤细胞株fgl2，其可以稳定地分泌单克隆抗体4a1，该单克隆抗体对鸡fgl2具有较高的特异性，能用于鸡fgl2的ifa、western blot和ihc等技术检测。
8、保藏情况说明：分泌鸡fgl2单克隆抗体4a1的杂交瘤细胞株fgl2(hybridoma cellline fgl2)，保藏编号为cctcc no：c202442，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2024年1月20日。
1.一种杂交瘤细胞株，其特征在于：所述杂交瘤细胞株fgl2的保藏编号为cctcc no：c202442。
2.一种鸡fgl2单克隆抗体，由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌得到。
3.根据权利要求2所述的鸡fgl2单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体为igg1亚类。
4.根据权利要求2所述的鸡fgl2单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列如seq id no.1所示、氨基酸序列如seq id no.3所示，轻链可变区的核苷酸序列如seq id no.2所示、氨基酸序列如seq id no.4所示。
5.根据权利要求2-4任意一种所述的鸡fgl2单克隆抗体在免疫学检测中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述应用是指采用所述单克隆抗体特异性结合鸡fgl2。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述免疫学检测方法为间接免疫荧光ifa、免疫组织化学ihc或蛋白质免疫印迹western-blot。
