本发明涉及一种蛋白突变体，尤其是涉及一种bet蛋白质家族成员的突变体，及其相应的核酸链，作为活性成分在制取抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
1、美国国家癌症研究所将实体肿瘤定义为通常不含有囊肿或液体区域的异常组织块体。实体肿瘤包括良性及恶性(癌性)肉瘤、癌瘤及淋巴瘤，且可发生于任何组织或器官中，如：脑、卵巢、乳房、结肠及其他组织。
2、目前治疗实体肿瘤的方法包括手术、放射疗法、化学疗法及免疫疗法。手术对于未转移的原发肿瘤可为适当治疗，但大型侵袭性肿瘤及大部分转移性恶性肿瘤通常无法通过手术完整切除。其他常用治疗如：放射疗法及化学疗法对人体具有较大的副作用，且单独使用放射疗法及化学疗法通常无法治愈实体肿瘤。晚期实体肿瘤在给患者带来极大痛苦的同时也对医疗系统构成负担。
3、溴结构域蛋白2(bromodomain and extra-terminal domain protein 2,brd2)属于溴结构域和超末端结构域(bromodomain and extra-terminal domain,bet)蛋白质家族成员，是一种重要的转录调节因子和染色质重构因子。brd2的特征是在蛋白质的n端有两个串联的溴结构域(bromodomain,bd)，其属于保守结构域，能够分别与组蛋白或转录因子的乙酰化赖氨酸残基相结合，并通过其c端的超末端(extral-terminal,et)结构域在靶基因位点上招募转录因子或共刺激因子，激活rna聚合酶ii引起转录延长。
4、brd2在维持基因组稳定性、细胞周期、细胞分化和能量代谢等细胞正常生命活动中发挥重要作用，同时其异常表达与炎症、免疫、肿瘤及神经系统疾病等关系密切，并作为潜在的药物靶点而受到广泛关注。作为基因转录的共调控因子，brd2的突变与多种肿瘤的发生、进展、凋亡及耐药有关。此外，brd2的突变或异常表达也可以作为分子标志物，预测肿瘤的遗传易感性及预后。
技术实现思路
1、本发明的一个目的在于提供一种溴结构域蛋白突变体，以实现抑制肿瘤的目的。
2、本发明的另一个目的在于提供一种编码溴结构域蛋白的核酸链，以实现抑制肿瘤的目的。
3、本发明的再一个目的在于提供一种组合物，包括编码溴结构域蛋白的核酸链，以实现抑制肿瘤的目的。
4、本发明的又一个目的在于提供一种活性成分在制备抑制肿瘤药物中的应用。
5、本发明所称的溴结构域蛋白突变体与天然的溴结构域蛋白2(seq id no 1)具有同源性，磷酸化位点被阻断。具体的，天然的溴结构域蛋白2的第298位丝氨酸(s)和第301位丝氨酸(s)单独或同时突变为非极性氨基酸，包括：组氨酸(h)、精氨酸(r)、赖氨酸(k)、异亮氨酸(i)、苯丙氨酸(f)、亮氨酸(l)、色氨酸(w)、丙氨酸(a)、蛋氨酸(m)、脯氨酸(p)、半胱氨酸(c)、天冬酰胺(n)和缬氨酸(v)。
6、一种溴结构域蛋白突变体具体实施方式，将天然的溴结构域蛋白2的第298位丝氨酸(s)突变为组氨酸(h)、精氨酸(r)、赖氨酸(k)、异亮氨酸(i)、苯丙氨酸(f)、亮氨酸(l)、色氨酸(w)、丙氨酸(a)、蛋氨酸(m)、脯氨酸(p)、半胱氨酸(c)、天冬酰胺(n)或缬氨酸(v)。
7、另一种溴结构域蛋白突变体具体实施方式，将天然的溴结构域蛋白2的第301位丝氨酸(s)突变为组氨酸(h)、精氨酸(r)、赖氨酸(k)、异亮氨酸(i)、苯丙氨酸(f)、亮氨酸(l)、色氨酸(w)、丙氨酸(a)、蛋氨酸(m)、脯氨酸(p)、半胱氨酸(c)、天冬酰胺(n)或缬氨酸(v)。
8、另一种溴结构域蛋白突变体具体实施方式，将天然的溴结构域蛋白2的第301位丝氨酸(s)突变为组氨酸(h)、精氨酸(r)、赖氨酸(k)、异亮氨酸(i)、苯丙氨酸(f)、亮氨酸(l)、色氨酸(w)、丙氨酸(a)、蛋氨酸(m)、脯氨酸(p)、半胱氨酸(c)、天冬酰胺(n)或缬氨酸(v)；同时
9、将第301位丝氨酸(s)也突变为组氨酸(h)、精氨酸(r)、赖氨酸(k)、异亮氨酸(i)、苯丙氨酸(f)、亮氨酸(l)、色氨酸(w)、丙氨酸(a)、蛋氨酸(m)、脯氨酸(p)、半胱氨酸(c)、天冬酰胺(n)或缬氨酸(v)。
10、另一种溴结构域蛋白突变体具体实施方式，天然的溴结构域蛋白2的第298位丝氨酸(s)和第301位丝氨酸(s)单独或同时突变为丙氨酸(a)。
11、经验证，本发明的溴结构域蛋白突变体具有抑制肿瘤的作用，具体包括：口腔鳞癌和黑色素瘤。
12、进一步，获得本发明提供的各种溴结构域蛋白突变体相应的核酸链，并以此核酸链为活性成分用于制取rna药物，将此作用于患处，能明显观察到实体肿瘤被抑制。
13、一种组合物，包括溴结构域蛋白突变体的mrna。
14、另一种组合物，系脂质体纳米颗粒(lipid nanoparticles,lnps)，其内包裹编码溴结构域蛋白突变体的mrna，记为：mrna@lnp。
15、将mrna@lnp注射至实体肿瘤内，能够观察到肿瘤体积显著减少。
1.一种溴结构域蛋白突变体，其特征在于与天然的溴结构域蛋白2具有同源性，磷酸化位点被阻断。
2.根据权利要求1所述的溴结构域蛋白突变体，其特征在于所述的天然的溴结构域蛋白2的第298位丝氨酸突变为组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或缬氨酸。
3.根据权利要求1所述的溴结构域蛋白突变体，其特征在于所述的天然的溴结构域蛋白2的第301位丝氨酸突变为组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或缬氨酸。
4.根据权利要求1所述的溴结构域蛋白突变体，其特征在于所述的天然的溴结构域蛋白2的第298位丝氨酸突变为组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或缬氨酸；同时
5.根据权利要求1所述的溴结构域蛋白突变体作为活性成分在制备抑制肿瘤药物中的应用。
6.一种核酸链，其特征在于在生物体内被翻译为权利要求1～4之一所述的溴结构域蛋白突变体。
7.根据权利要求6所述的核酸链，其特征在于系mrna，在生物体内被翻译为权利要求1～4之一所述的溴结构域蛋白突变体。
8.根据权利要求6所述核酸链作为活性成分在制备抑制肿瘤药物中的应用。
9.一种组合物，其特征在于包括权利要求6所述核酸链。
10.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于还包括脂质体纳米颗粒，其内包裹所述的核酸链。
