本发明涉及生物医药领域，特别涉及一种牛大力来源的纳米囊泡及其制备方法与应用。
背景技术：
1、近年来,随着对细胞微环境的深入研究，发现由细胞分泌的天然纳米颗粒-纳米囊泡是介导细胞间通讯的新方式,其可介导生物活性分子如核酸、脂质、蛋白质及其它功能分子的转运，参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程，在发育、免疫、再生、疾病发生等过程中发挥重要作用，且纳米囊泡有着天然的生物膜结构，具有更好的生物相容性等优势，能够逃避吞噬作用。目前，纳米囊泡在骨修复、抗肿瘤、皮肤修复等领域中早已有了诸多前驱性应用，如骨髓干细胞纳米囊泡可促进骨再生；人脐带间充质干细胞纳米囊泡可通过改善激素水平来修复大鼠卵巢功能，具有治疗卵巢早衰的潜力；肺泡上皮细胞源性纳米囊泡则可通过靶向调节巨噬细胞极化，调控急性肺损伤等。
2、纳米囊泡概念新颖，效果拔群。然而，在临床医学和美容护肤产品等的应用中依然有着不少分歧。一方面，纳米囊泡产量少，质量标准难定；其次，动物源细胞来源少，潜在风险难除，后续纯化不易。应用纳米囊泡，是一件非常耗时耗力耗财的事情，且考虑到免疫原性问题及渐趋严格的化妆品法规，外泌体距离真正的应用还有很长的路要走。
3、在上述背景下，研究人员将目光投向了纳米囊泡的另一个分支即植物纳米囊泡。相较于动物源纳米囊泡，植物纳米囊泡在具有类似结构和功能的同时，原料来源更广，也更容易产业化。有人发现葛根来源的纳米囊泡在促进人骨髓间充质干细胞成骨分化及延缓大鼠骨质疏松进展中具有显著效果。此外，山药来源的纳米囊泡在治疗大鼠骨质疏松疾病模型中也取得了良好的效果。总之，多数研究表明药用植物来源的纳米囊泡在癌症、抗氧化、降糖、免疫调节及骨质疏松预防等方面均具有重要意义。
4、牛大力(millettia specisoa champ.)，别名猪脚笠、金钟根、山莲藕、倒吊金钟、大力薯，为豆科崖豆藤属植物。牛大力的块状根茎是一种特别珍贵的中药药材，具有滋阴壮阳、补气润肺、强筋健骨等多种疗效，对于肾虚、气血不足有良好的疗效。目前，对牛大力根茎的药理研究主要集中在免疫调节、护肝、抗炎抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、祛痰、镇咳、平喘以及抗凝血等方面，在成骨和抗衰老相关方面少有明确研究证明其效果。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种牛大力来源的纳米囊泡。
2、本发明的另一目的在于，提供上述纳米囊泡的制备方法。
3、本发明的再一目的在于，提供上述纳米囊泡的应用。
4、本发明的目的通过下述技术方案实现：
5、一种牛大力来源的纳米囊泡，通过离心分离法从牛大力(millettia specisoachamp.)中提取，为由脂质双分子层形成的圆形囊泡，粒径分布在100～200nm之间。
6、上述牛大力来源的纳米囊泡的制备方法，包括如下步骤：
7、(1)将牛大力切块后浸泡，浸泡得到的溶液经过滤、离心后得到上清液；
8、(2)将步骤(1)得到的上清液过滤、离心后，得到的沉淀重悬、纯化后即得到牛大力来源的纳米囊泡。
9、步骤(1)所述的切块为切成边长1～3cm的正方体小块。
10、步骤(1)所述的浸泡为使用水相溶液浸泡；优选为使用pbs缓冲液浸泡。
11、上述的牛大力与水相溶液的比例为1～2g：1～3ml。
12、步骤(1)所述的浸泡的条件为50～60℃浸泡12～24h。
13、步骤(1)所述的过滤为使用孔径130～40μm的滤器过滤；优选为依次使用120～130μm、60～80μm、30～50μm的滤器过滤。
14、步骤(1)所述的离心的条件为500～10000g下离心20～40min；优选为依次在400～600g、3000～5000g、8000～12000g的条件下离心20～40min。
15、步骤(2)所述的过滤为使用孔径0.4～0.5μm的滤器过滤；优选为使用孔径0.45μm的滤器过滤。
16、步骤(2)所述的离心为80000～120000g下离心60～70min。
17、步骤(2)所述的重悬为使用pbs缓冲液重悬。
18、步骤(2)所述的纯化为使用0.2～0.3μm的滤器过滤得到滤液；优选为使用0.22μm的滤器过滤得到滤液。
19、上述牛大力来源的纳米囊泡在制备促进成骨细胞分化药物中的应用。
20、上述牛大力来源的纳米囊泡在制备抗炎药物中的应用。
21、上述牛大力来源的纳米囊泡在制备抗衰老药物中的应用。
22、上述牛大力来源的纳米囊泡在制备治疗和/或预防骨质疏松药物中的应用。
23、上述牛大力来源的纳米囊泡在制备抗衰老化妆品中的应用。
24、上述牛大力来源的纳米囊泡在诱导m2型巨噬细胞中的应用。
25、本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
26、本研究所提取的牛大力纳米囊泡(m-nvs)形貌完整、分散性好，提取牛大力纳米囊泡具有产率高、分离快速方便、成本低、适合规模化的优点。且通过研究发现牛大力纳米囊泡比牛大力醇提取物具有更明显的促成骨作用，同时发现其抗炎与抗衰老功能显著。这种集多功能于一体的稳定的纳米囊泡，可望作为新一代生物活性药物用于组织再生修复及美容护肤产品开发等领域。
1.一种牛大力来源的纳米囊泡，通过离心分离法从牛大力中提取，为由脂质双分子层形成的圆形囊泡。
2.权利要求1所述的牛大力来源的纳米囊泡的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：
6.权利要求1所述的牛大力来源的纳米囊泡在制备促进成骨细胞分化药物中的应用。
7.权利要求1所述的牛大力来源的纳米囊泡在制备抗炎药物中的应用。
8.权利要求1所述的牛大力来源的纳米囊泡在制备抗衰老药物中的应用。
9.权利要求1所述的牛大力来源的纳米囊泡在制备治疗和/或预防骨质疏松药物中的应用。
10.权利要求1所述的牛大力来源的纳米囊泡在制备抗衰老化妆品中的应用。
