本发明涉及抗体，尤其是涉及一种ssa/ro52结合蛋白、制备方法和应用。
背景技术：
1、ssa/ro52是一种和非编码小rna(h-y rna)分子非共价结合的细胞浆核糖核蛋白，其分子量为52kd。其中，ro52蛋白又称作三结构域蛋白21(trim21)，属于trim家族，具有e3泛素化连接酶活性，参与泛素化过程，调节免疫反应、抑制细胞增殖促进细胞凋亡等功能。
2、抗ssa/ro抗体通常和抗ssb抗体作为干燥综合征(ss)的标志性抗体，前者提高检测敏感性，后者提高诊断特异性。抗ssa/ro抗体在原发性干燥综合征(pss)中的阳性率为40～94％，系统性红斑狼疮(sle)阳性率为9～35％等。其中，抗ssa/ro52抗体在pss病的阳性率可达到60％。此外，该抗体还常见于肌炎、自身免疫性肝炎以及先天性房室传导阻滞等疾病。
3、抗ssa/ro52抗体作为检测试剂盒中的校准品和质控品，需达到性能稳定、来源稳定等要求。因此开发出可规模化生产，批间差异小以及高亲和力的抗ssa/ro52重组单抗对临床检测试剂盒的开发具有着重要意义和价值。
4、有鉴于此，特提出本发明。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供ssa/ro52结合蛋白，该结合蛋白与ssa/ro52具有良好的特异性结合能力。基于本发明提供的ssa/ro52结合蛋白，本发明的目的还在于提供其应用。本发明的另一目的在于以操作更简单的方法开发结合活性好的ssa/ro52结合蛋白，可用于ssa/ro52抗体的鉴定，以辅助进行ssa/ro52抗体阳性疾病的诊断检测。
2、为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：
3、名词定义：
4、ssa/ro蛋白质成分包括60kd蛋白和52kd蛋白，其中52kd蛋白又称作三结构域蛋白21(trim21)，属于trim家族，具有e3泛素化连接酶活性，参与泛素化过程，调节免疫反应、抑制细胞增殖促进细胞凋亡等功能。本文中“ssa/ro52”指其中分子量为52kd的抗原(蛋白)。
5、本发明提供的ssa/ro52结合蛋白能够与ssa/ro52特异性结合，ssa/ro52结合蛋白结合的ssa/ro52包括由细胞天然表达或经ssa/ro52基因转染的细胞表达的ssa/ro52。ssa/ro52结合蛋白结合的ssa/ro52还包括经人工改造的ssa/ro52，所述人工改造包括但不限于突变、截短或者与其他结构域融合后的多肽或蛋白，且保留与抗体结合的必要的抗原表位。
6、在本文中“结合蛋白”此技术术语是指结合特定抗原的蛋白，其泛指包含互补决定区(cdr区)的一切蛋白及蛋白片段。蛋白及蛋白片段可以为抗体，“抗体”特别指全长抗体。“抗体”和“全长抗体”此用语包括多克隆抗体及单克隆抗体。此外，“抗体”此用语包括天然发生的抗体以及非天然发生的抗体，包括例如嵌合型(chimeric)、双功能型(bifunctional)和人源化(humanized)抗体，以及相关的合成异构形式(isoforms)。非天然发生的抗体在本文中也被称为“重组抗体”，“抗体”此用语可和“免疫球蛋白”互换使用。
7、蛋白及蛋白片段也可以是包含抗体cdr的一部分或全部的抗原结合片段，其缺乏至少一些存在于全长链中的氨基酸但仍能够特异性结合至抗原。此类片段具生物活性，因为其结合至靶抗原，且可与其他抗原结合分子(包括完整抗体)竞争结合至给定表位。此类片段选自但不限于f(ab’)2、fab’、fab、fv(由vh和vl构成)，scfv(单链抗体，vh和vl之间由一连接肽连接而成)、dsfv(二硫键稳定性fv抗体(disulfide stabilized fv fragments,dsfv))、双特异抗体、纳米抗体和抗体最小识别单位中的任意一种。除上述功能片段外，还包括半衰期已增加的任何片段。
8、结合蛋白的“可变区(variable region)”或“可变结构域”是指抗体的重链或轻链的氨基端识别并结合抗原的结构域，该区段氨基酸的组成和排列决定了抗体识别抗原的特异性。重链可变结构域可以被称为“vh”。轻链的可变结构域可以被称为“vl”。这些结构域通常是抗体的最可变的部分，并含有抗原结合位点。重链和轻链的可变区各自通过4个骨架区(framework region，fr)连接的3个互补性决定区(complementarity-determiningregion，cdr)(也被称作高变区)组成。骨架区和cdr的范围已被精确定义，例如在kabat(参见《免疫重要的蛋白质的序列》((sequences of proteins of immunological interest)，e.kabat等)和chothia中，本领域众所周知的任何cdr确定方法，包括方法的组合，可以鉴别可变结构域的cdr。每个链中的cdr通过fr保持紧密靠在一起构成可变区，通常情况下，重链和轻链的可变区vl/vh可由以下编号的cdr与fr按如下组合排列连接获得：fr1-cdr1-fr2-cdr2-fr3-cdr3-fr4。
9、术语抗体的“恒定区”或“恒定结构域”表示单独的或组合的抗体轻链的恒定区或抗体重链的恒定区。抗体的重链具有一个可变结构域(vh)，继之以许多恒定结构域或区域，例如铰链、ch1、ch2、ch3和ch4中的一个或多个，ch1结构域邻近vh结构域且在抗体重链的铰链区的氨基端，且不形成抗体的fc区的部分；铰链区包括将ch1结构域连接至ch2结构域的重链分子的部分；ch2的n端通常为ch3结构域，ch3结构域通常形成抗体的c-端部分，在一些抗体类型中，例如igm和ige中恒定区还包括ch4结构域。抗体的恒定区可以源自igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige和igd，以及它们的亚类和突变形式的恒定区。
10、本发明不限制ssa/ro52结合蛋白的获得方式。在一些可选的实施方式中，利用编码ssa/ro52结合蛋白的多核苷酸与载体连接后，在细胞表达能够获得相应抗体。可以将上述载体导入到真核细胞、尤其是哺乳动物细胞中，构建获得能够表达所述ssa/ro52结合蛋白。在另一些可选的实施方式中，结合蛋白还可以通过本领域技术人员所知的重组遗传学技术或通过肽合成，如自动肽合成仪获得(例如applied biosystems等销售的自动肽合成仪)；抗原结合片段还可选地通过抗原结合分子(包括完整抗体)的酶裂解产生，例如胃蛋白酶或木瓜蛋白酶裂解；或化学裂解产生，例如通过化学还原分裂二硫键的方法获得上述的抗原结合片段。
11、术语“特异性识别”、“选择性结合”、“选择性地结合”和“特异性地结合”或其类似表述是指结合蛋白对预先确定的抗原上的表位的结合。通常，结合蛋白以大约小于10-5m，例如大约小于10-5m、10-6m、10-7m、10-8m、10-9m或10-10m或更小的kd值结合。使用本领域中充分确立的方法可以确定抗体的kd值。用于评价配体诸如抗体对靶标的结合能力的其它标准测定是本领域已知的，包括例如，elisa、蛋白质印迹、ria和流式细胞计量术分析。
12、本文中术语“多核苷酸”指的是任何长度的核苷酸的聚合物形式，多核苷酸包括核糖核苷酸和/或脱氧核糖核苷酸。多核苷酸的实例包括但不限于单链、双链或多链dna或rna、基因组dna、cdna、dna-rna杂合体或者包含嘌呤和嘧啶碱基或其他天然、化学或生化修饰、非天然或衍生的核苷酸碱基的聚合物。多核苷酸编码上述ssa/ro52结合蛋白，编码可选地为编码正义链或反义链。多核苷酸可以是天然存在的、合成的、重组的或它们的任意组合。术语“多核苷酸”和“核酸”本文中可互换地使用。
13、本文中术语“载体(vector)”是指，可将多核苷酸插入其中的一种核酸运载工具。当载体能使插入的多核苷酸编码的蛋白获得表达时，载体称为表达载体。载体可以通过转化，转导或者转染导入宿主细胞，使其携带的遗传物质元件在宿主细胞中获得表达。
14、所述载体是本领域技术人员公知的，包括但不限于：质粒；噬菌粒；柯斯质粒；人工染色体，例如酵母人工染色体(yac)、细菌人工染色体(bac)或p1来源的人工染色体(pac)；噬菌体如λ噬菌体或m13噬菌体及动物病毒等。可用作载体的动物病毒包括但不限于，逆转录酶病毒(包括慢病毒)、腺病毒、腺相关病毒、疱疹病毒(如单纯疱疹病毒)、痘病毒、杆状病毒、乳头瘤病毒、乳头多瘤空泡病毒。在一些实施方式中，本发明所述载体中包含基因工程中常用的调控元件，例如增强子、启动子、内部核糖体进入位点(ires)和其他表达控制元件(例如转录终止信号，或者多腺苷酸化信号和多聚u序列等)。
15、本文使用的表述“细胞”、“细胞系”和“细胞培养物”可互换使用，并且所有这类名称都包括后代。后代可以由于天然的、偶然的或故意的突变不一定与原代细胞完全相同，在形态学上和/或在基因组dna上与原代细胞存在差异。“转化体”和“转化细胞”包括原代受试细胞和由其衍生的培养物。
16、本文中，与多肽或核酸相关联的术语“纯化的”或“分离的”是指多肽或核酸不是处于其天然介质中或天然形式下。因此，术语“分离的”包括从其原始环境，例如如果它是天然存在的，从天然环境取出的多肽或核酸。例如，分离的多肽通常不含通常与其结合或通常与其混合或在溶液中的至少某些蛋白质或其他细胞组分。分离的多肽包括细胞裂解物中包含的天然生产的所述多肽，纯化或部分纯化形式的所述多肽，重组多肽，被细胞表达或分泌的所述多肽，以及在异源宿主细胞或培养物中的所述多肽。与核酸相关联，术语分离的或纯化的指示例如所述核酸不在其天然的基因组背景中(例如在载体中，作为表达盒，连接到启动子，或人工引入到异源宿主细胞中)。
17、本文中“ssa/ro52抗体阳性疾病”是指能够导致患者ssa/ro52抗体高于未患疾病时水平的疾病，示例性的ssa/ro52抗体阳性疾病包括但不限于自身免疫性疾病(例如干燥综合征、系统性红斑狼疮、肌炎和自身免疫性肝炎)和先天性房室传导阻滞。
18、第一方面，提供了一种ssa/ro52结合蛋白，其包含轻链可变区和重链可变区；
19、所述重链可变区包括互补决定区vh-cdr1、vh-cdr2和vh-cdr3；所述轻链可变区包括互补决定区vl-cdr1、vl-cdr2和vl-cdr3；
20、vh-cdr1的氨基酸序列为gytftnyg(seq id no.1)；
21、vh-cdr2的氨基酸序列为intytgep(seq id no.2)；
22、vh-cdr3的氨基酸序列为ardwevrregrdy((seq id no.3)；
23、vl-cdr1的氨基酸序列为qsisdy(seq id no.4)；
24、vl-cdr2的氨基酸序列为yas；
25、vl-cdr3的氨基酸序列为qnghsfpyt(seq id no.5)。
26、可选的实施方式中，所述ssa/ro52结合蛋白的重链可变区氨基酸序列如seq idno.6所示，轻链可变区氨基酸序列如seq id no.7所示。
27、可选的实施方式中，所述ssa/ro52结合蛋白为完整抗体、f(ab’)2、fab’、fab、fv、scfv、dsfv、双特异抗体和抗体最小识别单位中的一种。
28、可选的实施方式中，所述抗体其余部分序列来源物种包括小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、雪貂、猫、狗、山羊、绵羊、奶牛、猪、马、猴和人中的一种或多种。抗体其余部分序列包括但不限于任意一个、多个或全部骨架区(fr)，和/或部分或全部恒定区。
29、可选的实施方式中，ssa/ro52结合蛋白为包括恒定区的抗体或抗原结合片段。
30、可选的实施方式中，ssa/ro52结合蛋白的恒定区序列的至少一部分是人恒定区序列。
31、可选的实施方式中，ssa/ro52结合蛋白的恒定区序列选自igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige或igd任何其中之一的部分或全部恒定区的序列，以及它们的亚类和突变形式。
32、可选的实施方式中，所述ssa/ro52结合蛋白含有重链恒定区。
33、可选的实施方式中，所述ssa/ro52结合蛋白的重链恒定区序列选自人igg1的恒定区序列的部分或全部序列，优选包括人igg1的恒定区的包括ch1、ch2和ch3。
34、可选的实施方式中，重链恒定区的氨基酸序列如seq id no.8所示。
35、可选的实施方式中，所述ssa/ro52结合蛋白含有轻链恒定区。
36、可选的实施方式中，所述轻链恒定区序列选自小鼠的轻链恒定区。
37、可选的实施方式中，轻链恒定区的氨基酸序列如seq id no.9所示。
38、可选的实施方式中，所述ssa/ro52结合蛋白为人鼠嵌合抗体，所述ssa/ro52结合蛋白的重链氨基酸序列如seq id no.10所示，轻链氨基酸序列如seq id no.11所示。
39、第二方面，还提供了一种生物材料，包括多核苷酸、载体或细胞；其中，所述多核苷酸编码上述ssa/ro52结合蛋白；所述载体携带所述多核苷酸；所述细胞携带所述多核苷酸、或含有所述载体或能够表达所述ssa/ro52结合蛋白。
40、利用编码ssa/ro52结合蛋白的多核苷酸与载体连接后，可以将上述载体导入到真核细胞、尤其是哺乳动物细胞中，构建获得能够表达ssa/ro52结合蛋白的细胞系，在细胞表达能够获得相应蛋白。
41、可选的实施方式中，用于表达ssa/ro52结合蛋白的宿主细胞为293细胞(人肾上皮细胞系)，优选为293f细胞。
42、可选的实施方式中，用于表达ssa/ro52结合蛋白的宿主细胞为cho细胞(中国仓鼠卵巢细胞)。
43、第三方面，还提供了第一方面的ssa/ro52结合蛋白的制备方法，包括培养能够表达所述ssa/ro52结合蛋白的细胞。
44、可选的实施方式中，所述制备方法还包括将编码含有所述ssa/ro52结合蛋白的多核苷酸转化至宿主细胞并表达，通过纯化获得ssa/ro52结合蛋白。
45、可选的实施方式中，所述制备方法还包括根据需要合成含有所述ssa/ro52结合蛋白编码基因的多核苷酸，和/或，根据需要制备合适的表达载体，将表达载体转化至所需的宿主细胞中并表达，通过纯化可得到所述ssa/ro52结合蛋白。
46、可选的实施方式中，所述细胞为将编码包括如第一方面的所述的ssa/ro52结合蛋白的多核苷酸转化至宿主细胞制得，所述的ssa/ro52结合蛋白的多核苷酸包括重链表达质粒和轻链表达质粒，所述表达所述ssa/ro52结合蛋白的细胞为将所述重链表达质粒和所述轻链表达质粒共转化至宿主细胞制得。
47、可选的实施方式中，包括将重链可变区c端融合恒定区片段，构建完整的重链表达质粒，所述恒定区片段包括ch1、ch2和ch3中的一种或多种。
48、可选的实施方式中，所述恒定区片段包括人igg1的恒定区片段。
49、可选的实施方式中，所述宿主细胞为真核细胞，优选为哺乳动物细胞。
50、可选的实施方式中，所述哺乳动物细胞包括293细胞或cho细胞，优选为293f细胞。
51、第四方面，还提供了第一方面的ssa/ro52结合蛋白、或第二方面的生物材料在如下(ⅰ)～(ⅶ)任意一项中的应用：
52、(ⅰ)非诊断和治疗目的地检测ssa/ro52抗体；
53、(ⅱ)制备用于检测ssa/ro52抗体的产品；
54、(ⅲ)制备诊断ssa/ro52抗体阳性疾病的产品；
55、(iv)非诊断和治疗目的地检测ssa/ro52；
56、(ⅶ)制备用于检测ssa/ro52的产品；
57、(ⅵ)用于纯化ssa/ro52；
58、(ⅶ)制备用于纯化ssa/ro52的产品；
59、对于检测ssa/ro52抗体或在诊断ssa/ro52抗体阳性疾病中，ssa/ro52结合蛋白能够作为检测时的标准品和/或质控品使用，以为检测结果提供可靠的参考，也可以用于构建标准曲线。
60、可选的实施方式中，上述第(ⅲ)方面的应用中，所述疾病包括自身免疫性疾病和先天性房室传导阻滞中的一种或多种，所述自身免疫性疾病包括但不限于干燥综合征(ss)(例如原发性干燥综合征(pss))、系统性红斑狼疮(sle)、肌炎和自身免疫性肝炎中的至少一种。
61、上述第(iv)方面的应用可以利用ssa/ro52结合蛋白能够特异性靶向结合ssa/ro52，基于免疫检测技术实现ssa/ro52或表达ssa/ro52的细胞的检测，如当ssa/ro52结合蛋白为免疫偶联物，例如连接有荧光基团，可以采用荧光检测装置实现对ssa/ro52的定位或实时检测。例如可以用于免疫印迹、免疫沉淀或流式细胞技术等涉及到利用ssa/ro52抗原和抗体的特异性结合性能来检测ssa/ro52。基于ssa/ro52结合蛋白能够特异性靶向结合ssa/ro52，其还可以用于第(ⅵ)方面的纯化ssa/ro52。
62、可选的实施方式中，上述第(ⅱ)、(ⅲ)、(ⅴ)或(ⅶ)方面，本领域技术人员可以根据实际的用途制备相应的产品(如上述提到的免疫偶联物)，并选配产品中的其他试剂组成，包括但不限于示踪标记物、固相载体、缓冲试剂、盐、二抗、显色底物、封闭液、洗涤液、溶剂、洗脱液、偶联剂、阴性对照、阳性对照、标准品、质控品和标记物中的一种或多种。
63、第五方面，还提供了一种试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包含第一方面的ssa/ro52结合蛋白、或第二方面的生物材料。
64、可选的实施方式中，所述试剂盒用于检测ssa/ro52抗体或用于检测ssa/ro52抗体阳性疾病；所述试剂盒包括标准品和/或质控品，所述标准品和/或所述质控品含有所述ssa/ro52结合蛋白；
65、可选的实施方式中，所述试剂盒还包括检测试剂，所述检测试剂包括ssa/ro52抗体检测试剂。
66、可选的实施方式中，所述ssa/ro52抗体检测试剂包括偶联有ssa/ro52抗原的固相载体。
67、可选的实施方式中，所述试剂或试剂盒还包括示踪标记物。
68、可选的实施方式中，所述试剂盒还包括如下至少一种物质的抗体的检测试剂：dsdna、histone、nucleosome、ribosomal p、ssa/ro60、ssb/la、pm-scl、scl-70、jo-1、u1-snrnp、sm、cenp-b、ama m2、mi-2、pcna、srp-54、mda-5、sae-1、nxp-2、pl-7、pl-12、ej、hmgcr、ku、oj、tif1-γ和sae-2。
69、可选的实施方式中，所述试剂盒用于检测干燥综合征(ss)，所述试剂盒还包括ssb抗体检测试剂。
70、可选的实施方式中，所述试剂或试剂盒中的ssa/ro52结合蛋白与示踪标记物偶联；或所述试剂或试剂盒中的ssa/ro52结合蛋白与示踪标记物分别独立的包装。
71、通过将所述ssa/ro52结合蛋白与示踪标记物偶联，可用于定位检测ssa/ro52蛋白或通过蛋白印迹检测样品中的ssa/ro52蛋白。
72、可选的实施方式中，所述试剂或试剂盒中的ssa/ro52结合蛋白与固相载体偶联；或所述试剂或试剂盒中的ssa/ro52结合蛋白与固相载体分别独立的包装。
73、通过将所述ssa/ro52结合蛋白与固相载体偶联，可用于纯化ssa/ro52蛋白。
74、上述试剂或试剂盒还任选地包括本领域用于检测反应或纯化蛋白使用的，本领域技术人员熟知的试剂和/或耗材，包括但不限于缓冲试剂、盐、二抗、显色底物、封闭液、洗涤液、溶剂、洗脱液、偶联剂、阴性对照、阳性对照、标准品、质控品和标记物中的一种或多种。
75、上述试剂或试剂盒可用于本领域可接受的、一般的免疫检测方法中，包括但不限于免疫荧光染色、流式分选、免疫印记、免疫组化、elisa、免疫层析或免疫磁珠中，本领域技术人员可根据对应的检测手段配制试剂或试剂盒中的其他试剂，本发明对此不做限制。
76、上述任一实施方式中的示踪标记物包括但不限于酶、发光标记、荧光微球、彩色微球、乳胶微球、胶体金、量子点、生物素、链霉亲和素、放射性核素、放射性造影剂、顺磁离子、金属和光敏剂中的一种或多种。
77、酶的实例例如可以为但不限于为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶，发光标记例如可以为但不限于为荧光蛋白、合成类小分子或聚合物染料等，具体的实例包括但不限于alexa350、alexa 405、alexa430、alexa 488、alexa 555、alexa 647、amca、氨基吖啶、bodipy630/650、bodipy 650/665、bodipy-fl、bodipy-r6g、bodipy-tmr、bodipy-trx、5-羧基-4′，5′-二氯-2′，7′-二甲氧基荧光素、5-羧基-2′，4′，5′，7′-四氯荧光素、5-羧基荧光素、5-羧基罗丹明、6-羧基罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、cascade blue、cy2、cy3、cy5、cy7、6-fam、丹磺酰氯、荧光素、hex、6-joe、nbd(7-硝基苯并-2-氧杂-1，3-二唑)、oregon green 488、oregon green 500、oregon green514、pacific blue、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、间苯二甲酸、甲酚固紫、甲酚蓝紫、亮甲酚蓝、对氨基苯甲酸、赤藓红、酞菁、偶氮甲碱、花青、黄嘌呤、琥珀酰荧光素、稀土金属穴状化合物、三双吡啶基二胺铕、铕穴状化合物或螯合物、二胺、双花青苷、la jolla蓝染料、别藻蓝蛋白、allococyanin b、藻蓝蛋白c、藻蓝蛋白r、硫胺、藻红青蛋白、藻红蛋白r、reg、罗丹明绿、罗丹明异硫氰酸酯、罗丹明红、rox、tamra、tet、trit(四甲基罗丹明异硫醇)、四甲基罗丹明和德克萨斯红中的一种或多种。荧光微球、彩色微球和乳胶微球分别独立的选自本领域可接受的产品，例如来源于市售的产品。放射性核素包括但不限于110in、111in、177lu、18f、52fe、62cu、64cu、67cu、67ga、68ga、86y、90y、89zr、94mtc、94tc、99mtc、120i、123i、124i、125i、131i、154-158gd、32p、11c、13n、15o、186re、188re、51mn、52mmn、55co、72as、75br、76br、82mrb和83sr中的一种或多种。顺磁离子包括但不限于铬(iii)、锰(ii)、铁(iii)、铁(ii)、钴(ii)、镍(ii)、铜(ii)、钕(iii)、钐(iii)、镱(iii)、钆(iii)、钒(ii)、铽(iii)、镝(iii)、钬(iii)和铒(iii)中的一种或多种。
78、上述任一实施方式中的固相载体包括但不限于微管、柱、微粒、硝酸纤维素膜、层析基质或侧流装置；更具体的例如可以为但不限于为酶标孔、免疫层析试纸或磁珠。所述层析基质可选择本领域可接受的，已知的任何层析基质，包括但不限于聚苯乙烯、多糖聚合物或硅胶等。可选的实施方式中，所述层析基质包括凝胶颗粒。
79、本发明公开了一种特异性识别结合ssa/ro52抗原的ssa/ro52结合蛋白，进一步制备得到人鼠嵌合的重组单抗。本发明具有如下有益效果：
80、(1)该方法制备过程操作简单，耗时短，且单抗序列可知，能够通过细胞随时进行表达，表达量高，生产工艺可控、产品批间差小。
81、(2)本发明公开的ssa/ro52结合蛋白可用作检测试剂盒中的质控品，可缓解免疫多抗操作繁琐，后续偶联效率低的问题，降低生产成本，稳定产品质量，并能够显著提高反应值；另一方面相较于直接使用人血清，也能够避免样本来源难和高成本问题。
82、(3)本发明公开的ssa/ro52结合蛋白可偶联标记物，用于ssa/ro52抗原的检测。
83、(4)本发明公开的ssa/ro52结合蛋白可偶联凝胶颗粒进行ssa/ro52抗原的免疫亲和层析纯化，蛋白纯度更高。
1.一种ssa/ro52结合蛋白，其特征在于，包含轻链可变区和重链可变区；
2.根据权利要求1所述的ssa/ro52结合蛋白，其特征在于，所述ssa/ro52结合蛋白的重链可变区氨基酸序列如seq id no.6所示，轻链可变区氨基酸序列如seq id no.7所示。
3.根据权利要求1或2所述的ssa/ro52结合蛋白，其特征在于，所述ssa/ro52结合蛋白为完整抗体、f(ab’)2、fab’、fab、fv、scfv、dsfv、双特异抗体和抗体最小识别单位中的一种；
4.根据权利要求1或2所述的ssa/ro52结合蛋白，其特征在于，还包含恒定区；
5.根据权利要求4所述的ssa/ro52结合蛋白，其特征在于，所述ssa/ro52结合蛋白的重链氨基酸序列如seq id no.10所示，轻链氨基酸序列如seq id no.11所示。
6.生物材料，其特征在于，包括多核苷酸、载体或细胞；
7.权利要求1～5任一项所述的ssa/ro52结合蛋白的制备方法，其特征在于，包括培养如权利要求6中所述的细胞；
8.权利要求1～5任一项所述的ssa/ro52结合蛋白、或权利要求6所述的生物材料在如下(ⅰ)～(ⅶ)任意一项中的应用：
9.试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包含权利要求1～5任一项所述的ssa/ro52结合蛋白、或权利要求6所述的生物材料。
10.根据权利要求9所述的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于检测ssa/ro52抗体或用于检测ssa/ro52抗体阳性疾病；所述试剂盒包括标准品和/或质控品，所述标准品和/或所述质控品含有所述ssa/ro52结合蛋白；
