本发明涉及细胞培养，尤其涉及一种免疫细胞的培养基、培养方法及其应用。
背景技术：
1、免疫细胞是指参与免疫应答或与免疫应答相关的细胞，包括淋巴细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞等，其在免疫细胞疗法中扮演着至关重要的角色。
2、aim-v培养基是适用于淋巴细胞和t细胞的无血清培养，其作为基础培养基能确保培养基中含有必要的营养成分以支持细胞的生长和繁殖，因此其在细胞培养中取得广泛应用，但其价格会比其他的基础培养基高上不少，因此，需要一种能有效培养免疫细胞且成本低廉的培养基。
技术实现思路
1、本发明提供一种免疫细胞的培养基及其应用，用以解决现有培养基成本高的问题，实现免疫细胞的低成本高效培养。
2、作为本发明的第一方面，本发明提供一种免疫细胞的培养基，所述培养基包括：100～1000u/ml il-2、5～50ng/ml il-4、10～100ng/ml il-15、1～10ng/ml il-21、10～100ng/mlα-galcer、10～100ng/ml gm-csf、0.1～1μm tlr7激动剂、1～10μg/ml转铁蛋白、1～10μg/ml乙醇胺、1～10μg/mlβ-环糊精、1～10μg/ml胰岛素、1～10mm丙氨酸-谷氨酰胺、1～10μg/ml l-抗败血酸及rpmi 1640培养基。
3、优选的，所述培养基包括：200u/ml il-2、10ng/ml il-4、20ng/ml il-15、2ng/mlil-21、20ng/mlα-galcer、50ng/ml gm-csf、0.2μm tlr7激动剂、2μg/ml转铁蛋白、4μg/ml乙醇胺、2μg/mlβ-环糊精、1μg/ml胰岛素、1mm丙氨酸-谷氨酰胺、1μg/ml l-抗败血酸。
4、优选的，所述tlr7激动剂包括imiquimod、compound 2、compound 16b、compound17b、compound 20、bbiq中一种或几种。
5、优选的，所述培养基还包括1～10％自体血浆。
6、作为所述本发明的第二方面，本发明还请求保护上述免疫细胞的培养基的应用，具体为在inkt细胞培养上的应用。
7、具体的，本发明还请求保护一种inkt细胞的培养方法，所述方法包括：
8、获取待处理细胞；
9、基于上述任意一项所述培养基，培养所述待处理细胞，基于培养进度更换或补充所述培养基及1～10％自体血浆，直至到达预定的培养时间；
10、收集培养后的所述待处理细胞。
11、所述inkt细胞的培养方法的优选方案为：所述待处理细胞浓度为3×106～8×106个/ml。
12、所述inkt细胞的培养方法的优选方案为：所述待处理细胞为pbmc，所述培养时长为13天。
13、作为本发明的第三方面，本发明请求保护所述免疫细胞的培养基的具体应用，具体的，对应请求保护一种试剂盒，所述试剂盒包括如上述方案中任意一项的免疫细胞的培养基，所述试剂盒用于免疫细胞的培养或/和外泌体制备。
14、进一步的，所述试剂盒用于inkt细胞的培养或/和外泌体制备。
15、本发明提供一种免疫细胞的培养基，该培养基包括限定范围内的il-2、il-12、il-4、il-15、il-21、α-galcer、gm-csf、tlr7激动剂、转铁蛋白、乙醇胺、β-环糊精胰岛素、丙氨酸-谷氨酰胺、l-抗败血酸及rpmi 1640培养基。该培养基以rpmi 1640培养基为基础培养基，配合tlr7激动剂、转铁蛋白等，具有成本低、扩增速度快、能较好的保持细胞培养存活率的优点。
16、利用该培养基培养inkt细胞，扩增速度快，实现高效培养，可满足临床治疗大量inkt细胞的需求。
1.一种免疫细胞的培养基，其特征在于，所述培养基包括：100～1000u/ml il-2、5～50ng/ml il-4、10～100ng/ml il-15、1～10ng/ml il-21、10～100ng/mlα-galcer、10～100ng/ml gm-csf、0.1～1μm tlr7激动剂、1～10μg/ml转铁蛋白、1～10μg/ml乙醇胺、1～10μg/mlβ-环糊精、1～10μg/ml胰岛素、1～10mm丙氨酸-谷氨酰胺、1～10μg/ml l-抗败血酸及rpmi 1640培养基。
2.根据权利要求1所述的免疫细胞的培养基，其特征在于，所述培养基包括：200u/mlil-2、10ng/ml il-4、20ng/ml il-15、2ng/ml il-21、20ng/mlα-galcer、50ng/ml gm-csf、0.2μm tlr7激动剂、2μg/ml转铁蛋白、4μg/ml乙醇胺、2μg/mlβ-环糊精、1μg/ml胰岛素、1mm丙氨酸-谷氨酰胺、1μg/ml l-抗败血酸。
3.根据权利要求1所述的免疫细胞的培养基，其特征在于，所述tlr7激动剂包括imiquimod、compound 2、compound 16b、compound 17b、compound 20、bbiq中一种或几种。
4.根据权利要求1所述的免疫细胞的培养基，其特征在于，所述培养基还包括1～10％自体血浆。
5.一种inkt细胞的培养方法，其特征在于，所述方法包括：
6.根据权利要求5所述的inkt细胞的培养方法，其特征在于，所述待处理细胞浓度为3×106～8×106个/ml。
7.根据权利要求5所述的inkt细胞的培养方法，其特征在于，所述待处理细胞为pbmc，所述培养时长为13天。
8.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1～4中任意一项培养基，所述试剂盒用于免疫细胞的培养或/和外泌体制备。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于inkt细胞的培养或/和外泌体制备。
