本发明涉及一种戊二醛交联胶原蛋白纤维及其制备和应用。
背景技术：
1、随着年龄的增长，体内的胶原蛋白含量逐渐减少，会出现皮肤松弛、皱纹增多、关节疼痛等问题。因此，如何补充胶原蛋白一直备受美容和健康保健领域的关注。高纯度的动物源性胶原蛋白具有良好生物相容性，可以作为组织填充剂使用。然而由于体内胶原酶的存在，临床使用发现天然胶原蛋白在体内存在维持时间3-6个月。因此，为了增加胶原蛋白在体内的保留时间，研究发现了各种交联技术。最早应用于临床除皱的交联胶原蛋白填充剂产品collagen implants和目前已获批上市的双美科技有限公司的交联胶原蛋白产品“肤丽美”均采用戊二醛作为交联剂，在控制戊二醛残留的基础上，体内维持时间6个月。现有填充剂，都是在中性条件制备的胶原蛋白纤维，再进行化学交联(us 4582640)。虽然戊二醛交联能提高胶原蛋白纤维的熔点，提升耐胶原酶降解能力，但是高浓度的戊二醛交联反应不均匀完全，戊二醛的残留会降低填充剂的生物安全性。有研究通过多步骤(cn101648989)，多种交联剂(cn 102924731)反应提高胶原蛋白纤维熔点和交联度，但是随着增加交联反应步骤，生产过程过程繁琐，交联胶原蛋白纤维得率低，生产成本增加，且其他类型交联剂的生物安全性还有待临床实验进一步验证。
技术实现思路
1、为了保证生物安全性的同时，增加交联胶原蛋白纤维的熔点和交联度，以及进一步提高交联胶原蛋白纤维在体内的稳定性和保留时间，本发明提供一种戊二醛交联胶原蛋白纤维，可用于填充剂。
2、作为本发明的一个方面，涉及一种戊二醛交联胶原蛋白纤维，由胶原蛋白纤维以戊二醛为交联剂交联而成；所述胶原蛋白纤维直径在15-80nm之间；所述戊二醛交联胶原蛋白纤维直径在150-200nm之间；所述戊二醛交联胶原蛋白纤维的戊二醛残留量小于等于10ppm，交联度在48.3％-75％之间，优选73.6％-75％之间；tm值＝69.08℃-75.72℃，优选73.7℃-75.72℃。也就是说，本发明是用戊二醛将直径在15-80nm之间的胶原蛋白纤维进行交联，得到直径150-200nm之间的戊二醛交联胶原蛋白纤维。
3、作为本发明的另一个方面，涉及一种交联胶原蛋白填充剂，所述填充剂含有上述戊二醛交联胶原蛋白纤维。所述填充剂还可以含有利多卡因。
4、作为本发明的又一个方面，涉及制备上述交联胶原蛋白填充剂的方法，其特征在于，所述方法包括：使用生理盐水调节蛋白浓度35mg/ml，利多卡因浓度0.2％，匀浆后无菌灌装于1ml规格的针管中，密封。
5、作为本发明的又一个方面，涉及制备上述戊二醛交联胶原蛋白的方法，包括：
6、去除免疫原性和病毒的纯化胶原蛋白分子酸性条件下纤维化后进行戊二醛交联，其中，酸性条件ph值5.0-6.0，戊二醛浓度0.02％-0.06％(v:v)。
7、由本发明实施例可知，本发明在酸性条件下制备得到直径较小的胶原蛋白纤维，经戊二醛交联后，具有良好的热稳定性和耐胶原酶降解能力，可以维持较长的降解周期。这些性能的综合展示，使得本发明所制备的戊二醛交联胶原蛋白纤维可以作为交联胶原蛋白填充剂的成分，配合利多卡因用于整形外科等领域。本发明所制备戊二醛交联胶原蛋白纤维具有较高的产量和较低的交联剂残留，适合大规模生产并保证产品的生物安全性。
1.一种戊二醛交联胶原蛋白纤维，由胶原蛋白纤维以戊二醛为交联剂交联而成，其特征在于，所述胶原蛋白纤维直径在15-80nm之间；所述戊二醛交联胶原蛋白纤维直径在150-200nm之间；所述戊二醛交联胶原蛋白纤维的戊二醛残留量小于等于10ppm，交联度在48.3％-75％之间；tm值＝69.08℃-75.72℃。
2.权利要求1所述戊二醛交联胶原蛋白纤维，其特征在于，所述交联胶原蛋白纤维的戊二醛残留量小于等于10ppm，交联度在73.6％-75％之间；tm值＝73.7℃-75.72℃。
3.权利要求2所述戊二醛交联胶原蛋白纤维，其特征在于，所述交联胶原蛋白纤维的戊二醛残留量小于等于10ppm，交联度75％；tm值＝75.72℃。
4.制备权利要求1-3任一所述戊二醛交联胶原蛋白纤维的方法，其特征在于，包括：猪皮组织经预处理、提取、纯化，得到的去除免疫原性和病毒的胶原蛋白分子在酸性条件下纤维化后，进行戊二醛交联。
5.权利要求4所述方法，其特征在于，所述酸性条件ph值5.0-6.0。
6.权利要求4所述方法，其特征在于，所述胶原蛋白纤维中加入戊二醛溶液至终浓度为0.02％-0.06％。
7.权利要求4所述方法，其特征在于，所述酸性条件为磷酸盐缓冲液，所述胶原蛋白分子为动物源胶原蛋白分子。
8.一种交联胶原蛋白填充剂，其特征在于，所述填充剂包含权利要求1-3任一所述戊二醛交联胶原蛋白纤维。
9.权利要求8所述交联胶原蛋白填充剂，其特征在于，所述填充剂还含有利多卡因。
10.制备权利要求9所述交联胶原蛋白填充剂的方法，其特征在于，所述方法包括：使用生理盐水调节蛋白浓度35mg/ml，利多卡因浓度0.2％，匀浆后无菌灌装于1ml规格的针管中，密封。
