本发明属于生物医药,具体涉及一种全人源抗人cd36抗体及其应用。
背景技术:
1、cd36也称血小板膜糖蛋白iv,是一个高度糖基化的跨膜蛋白。它属于b型清道夫受体家族,在人类许多细胞表面均有表达,如血小板、单核/巨噬细胞、小神经胶质细胞、树突状细胞、微血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞等。
2、cd36缺失表达与疾病相关。cd36作为模式识别受体识别的配体与疾病的发展机理息息相关,如动脉粥样硬化,阿尔茨海默病等等。cd36表达缺失的个体,在怀孕、移植或输血过程中可诱导产生抗cd36同种抗体。含有抗体的个体在怀孕或再次输血的情况下可发生胎儿/新生儿同种免疫性血小板减少症(fnait)、血小板输注无效(ptr)、输血后紫癜(ptp)以及输血相关性急性肺损伤(trali)。
3、在疾病诊断及治疗方面,常用的是鼠源、兔源单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体以及全人源抗体,但在实际的临床应用中,异源单克隆抗体会因为其免疫原性高,而引起hama反应,导致单抗药物半衰期短,治疗效果变差,同时也容易引发安全问题。为了克服这一困难,治疗性抗体的发展经历了鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体等多个阶段。全人源抗体组成抗体的氨基酸序列100%来自人类,因此具有免疫原性更低,安全性更好的优势。
4、现有技术中关于cd36的抗体都是鼠源抗体,或者人源化的鼠源抗体,没有全人源化cd36抗体。如专利申请号cn201810600518.7公开了通过杂交瘤的方法得到鼠源cd36抗体;专利申请号cn202180034204.5公开了人源化cd36抗体及其在癌症治疗中的用途。
5、全人源抗体因为全都来自人类自身,因此排异反应最低,安全性最好。全人源化抗体的轻链和重链都来源于人,是治疗性抗体的发展趋势。但是现有技术中并不存在全人源抗人cd36抗体。
技术实现思路
1、有鉴于此,为了克服现有技术的缺陷,本发明的目的在于提供了一种全人源抗人cd36抗体的氨基酸序列、核苷酸序列和全人源抗体。
2、为了达到上述目的,本发明采用以下的技术方案:
3、本发明提供一种全人源抗人cd36抗体的氨基酸序列,包括重链的可变区的氨基酸序列和轻链的可变区的氨基酸序列;所述重链的可变区的氨基酸序列包括seq id no.2所示的序列;所述轻链的可变区的氨基酸序列包括seq id no.4所示的序列。
4、本发明提供一种全人源抗人cd36抗体的核苷酸序列,包括编码重链的可变区的核苷酸序列和编码轻链的可变区的核苷酸序列;所述编码重链的可变区的核苷酸序列包括seq id no.1所示的序列,所述编码轻链的可变区的核苷酸序列包括seq id no.3所示的序列。
5、本发明提供一种全人源抗人cd36抗体,包括重链和轻链,所述重链的可变区的氨基酸序列为seq id no.2所示的序列,所述轻链的可变区的氨基酸序列为seq id no.4所示的序列。
6、本发明提供一种编码如上所述的全人源抗体的核苷酸序列。
7、根据本发明的一些优选实施方面,编码抗体重链段的核苷酸序列为seq id no.1,相对应的编码抗体轻链段的核苷酸序列为seq id no.3。
8、本发明还提供一种包含根据上述的核苷酸序列的重组表达载体。
9、根据本发明的一些优选实施方面,包括重链抗体的表达载体,其表达框为seq idno.7所示的序列。
10、优选地,所述重链抗体的表达载体为通过将全人源抗人cd36抗体重链序列和人igg1(seq id no.5)构建到pcdna3.4载体中获得。
11、根据本发明的一些优选实施方面,包括轻链抗体的表达载体,其表达框为seq idno.8所示的序列。
12、优选地,所述表达载体为通过将全人源抗人cd36抗体轻链序列和人kappa序列(seq id no.6)构建到pcdna3.4载体中获得。
13、本发明还提供一种用上述的重组表达载体转化的细胞。
14、本发明还提供一种根据上述的抗体,上述的核苷酸序列,上述的重组表达载体,上述的重组细胞在制备脑卒中、阿尔茨海默病、帕金森病和脊髓损伤等中枢神经系统等疾病有关的药物或相关试剂盒中的用途。
15、本发明还提供一种药物组合物,包含上述的抗体,和/或上述的核苷酸序列,和/或上述的表达载体,与一种或多种药学上可接受的赋形剂结合。
16、由于采用了以上的技术方案,相较于现有技术,本发明的有益之处在于:本发明的全人源抗人cd36抗体的氨基酸序列,轻链和重链均来源于人,因此免疫原性更低,安全性更好。
1.一种全人源抗人cd36抗体的氨基酸序列,其特征在于,包括重链的可变区的氨基酸序列和轻链的可变区的氨基酸序列;所述重链的可变区的氨基酸序列包括seq id no.2所示的序列;所述轻链的可变区的氨基酸序列包括seq id no.4所示的序列。
2.一种全人源抗人cd36抗体的核苷酸序列,其特征在于,包括编码重链的可变区的核苷酸序列和编码轻链的可变区的核苷酸序列;所述编码重链的可变区的核苷酸序列包括seq id no.1所示的序列,所述编码轻链的可变区的核苷酸序列包括seq id no.3所示的序列。
3.一种全人源抗人cd36抗体,其特征在于,包括重链和轻链,所述重链的可变区的氨基酸序列为seq id no.2所示的序列,所述轻链的可变区的氨基酸序列为seq id no.4所示的序列。
4.一种编码如权利要求3所述的全人源抗人cd36抗体的核苷酸序列。
5.根据权利要求4所述的核酸苷序列,其特征在于,编码抗体重链段的核苷酸序列为seq id no.1,相对应的编码抗体轻链段的核苷酸序列为seq id no.3。
6.一种包含根据权利要求4或权利要求5所述的核苷酸序列的重组表达载体。
7.根据权利要求6所述的重组表达载体,其特征在于,包括重链抗体的表达载体,其表达框为seq id no.7所示的序列。
8.根据权利要求7所述的重组表达载体,其特征在于,所述重链抗体的表达载体为通过将全人源抗人cd36抗体重链序列和人igg1(seq id no.5)构建到pcdna3.4载体中获得。
9.根据权利要求8所述的重组表达载体,其特征在于,包括轻链抗体的表达载体,其表达框为seq id no.8所示的序列。
10.根据权利要求9所述的表达载体,其特征在于,所述轻链抗体的表达载体为通过将全人源抗人cd36抗体轻链序列和人kappa序列(seq id no.6)构建到pcdna3.4载体中获得。
11.一种用权利要求6-10任意一项所述的重组表达载体转化的细胞。
12.权利要求3所述的抗体,权利要求4或5所述的核苷酸序列,权利要求6-10任意一项所述的重组表达载体,权利要求11所述的重组细胞在制备相关的疾病的药物或试剂盒中的用途。
13.一种药物组合物,包含权利要求3所述的抗体,和/或权利要求4或5所述的核苷酸序列,和/或权利要求6-10任意一项所述的表达载体,与一种或多种药学上可接受的赋形剂结合。