本发明属于生物医药领域，尤其是涉及ar-man@dsh水凝胶及其制备方法和应用。
背景技术：
1、结直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，每年占所有新病例的10.0％以上。免疫治疗，特别是免疫检查点抑制剂(ici)如程序性细胞死亡蛋白1(pd-1)阻断，由于持续激活抗肿瘤免疫以预防、控制和消除癌症，已在临床上受到迅速关注。与传统疗法相比，免疫治疗可以通过激活抗肿瘤免疫杀死癌细胞，并针对癌症抗原以防止正常细胞受到攻击。然而，ici如pembrolizumab和toripalimab在结直肠癌中的治疗效果仅在少部分病理类型(不到10％)中表现出令人满意的效果。对于大多数晚期结直肠癌患者来说，由于缺乏良好的客观反应率和总生存率，治疗效果可能并不理想。因此，开发增强pd-1抑制剂治疗强度的有效策略是结直肠癌的当务之急。
2、肿瘤免疫抑制微环境(time)由各种细胞亚群组成，在抗pd-1治疗的耐药中发挥关键作用。与此同时，肿瘤相关巨噬细胞(tams)是time的关键组成部分，具有m1(促炎和抗肿瘤效应)和m2(促进组织修复和肿瘤发展)两种不同类型的激活状态。m2 tams是这种免疫抑制微环境的重要贡献者，可以表达pd-1，进一步消耗精氨酸并抑制t细胞的抗肿瘤功能。此外，它们可以通过分泌白细胞介素-10(il-10)和转化生长因子-beta(tgf-β)等细胞因子促进肿瘤转移。缺氧是另一个重要因素，通过增加免疫抑制调节因子的表达来减弱对肿瘤的免疫应答。研究表明，在缺氧条件下pd-1途径可以上调，进一步抑制t细胞激活，从而促进肿瘤免疫逃逸。肿瘤缺氧还可以通过抑制药物效力、限制免疫细胞浸润和加速结直肠癌转移来降低治疗效果。因此，通过重新编程m2 tams为m1表型并纠正肿瘤缺氧，是颇具前景的治疗策略，其可以双重逆转time以增强抗pd-1治疗。
3、作为全球最常见的自然腔道恶性肿瘤之一，结直肠癌已通过类似消化内镜检查、经肛门微创手术和经肛门全直肠间隙切除等方式得到广泛检查和治疗。开发用于肿瘤内注射的药物载体，以实现稳定负载和持续释放，对于结直肠癌的治疗具有巨大的治疗意义。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明旨在提出ar-man@dsh水凝胶及其制备方法和应用，以针对性的双重逆转肿瘤免疫抑制微环境，显著增强抗肿瘤免疫治疗效果。
2、为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
3、第一方面，本发明提供一种ar-man纳米颗粒，包括阿托伐醌、r848和甘露糖聚乙二醇磷脂。
4、第二方面，本发明提供一种ar-man@dsh水凝胶，包括dsh载体及负载于dsh载体上的ar-man纳米颗粒。
5、进一步地，所述dsh载体由y-dna和l-dna自组装而成。
6、进一步地，所述y-dna和l-dna为经热退火处理的。
7、进一步地，制备y-dna使用的单链dna包括三种，分别为y1、y2、y3，制备l-dna使用的单链dna包括两种，分别为l1、l2。其中，y1的核苷酸序列如seq id no.1所示，y2的核苷酸序列如seq id no.2所示；y3的核苷酸序列如seq id no.3所示；l1的核苷酸序列如seq idno.4；l2的核苷酸序列如seq id no.5所示。
8、第三方面，本发明提供ar-man@dsh水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
9、s1、合成ar-man纳米颗粒；
10、s2、将ar-man纳米颗粒、y-dna溶液和l-dna溶液混合均匀，得到ar-man@dsh水凝胶。
11、进一步地，步骤s1包括以下步骤：
12、将阿托伐醌、r848与甘露糖聚乙二醇磷脂溶液混合均匀，离心得到ar-man纳米颗粒。
13、优选地，步骤s1包括以下步骤：
14、将甘露糖聚乙二醇磷脂溶解于去离子水中，超声处理，得到甘露糖聚乙二醇磷脂溶液；
15、将阿托伐醌、r848加入pbs中，超声处理得到悬浊液；
16、将悬浊液与甘露糖聚乙二醇磷脂溶液混合后，超声处理，离心、去离子水洗涤、干燥，得到ar-man纳米颗粒。
17、优选地，阿托伐醌、r848与甘露糖聚乙二醇磷脂的质量比为1:1:5-15
18、进一步地，步骤s2中y-dna溶液和l-dna溶液为经过从95℃到4℃的热退火处理的。
19、进一步地，步骤s2包括以下步骤：
20、将ar-man纳米颗粒、y-dna溶液混合均匀，之后与l-dna溶液混合均匀。
21、第四方面，本发明提供一种抗肿瘤药物，包括根据上述的水凝胶或根据上述的制备方法制得的水凝胶。
22、进一步地，所述抗肿瘤药物的剂型为注射剂、口服剂、片剂、胶囊剂中的一种；优选为注射剂。
23、第五方面，本发明提供根据上述的水凝胶或根据上述的制备方法在制备以下药物中的应用：抗肿瘤药物、免疫治疗增敏剂或诱导巨噬细胞从m2表型向m1表型重编程的药物。
24、进一步地，所述肿瘤为结直肠癌、肺癌、乳腺癌或肝癌。
25、相对于现有技术，本发明的ar-man@dsh水凝胶及其制备方法和应用具有以下优势：
26、本发明所述的ar-man@dsh水凝胶将阿托伐醌、r848以特定比例共载于甘露糖聚乙二醇磷脂中，形成ar-man纳米颗粒，并负载于dsh载体上，能够实现阿托伐醌与r848的持续释放，抑制肿瘤缺氧微环境，将m2型tams重编程为m1表型，抑制肿瘤生长和复发，同时在长期安全性实验中不会对主要器官造成不良影响，可以以足够安全的方式显著增强抗肿瘤免疫治疗效果。
1.一种ar-man纳米颗粒，其特征在于，包括阿托伐醌、r848和甘露糖聚乙二醇磷脂；优选地，阿托伐醌、r848与甘露糖聚乙二醇磷脂的质量比为1:1:5-15。
2.一种ar-man@dsh水凝胶，其特征在于：包括dsh载体及负载于dsh载体上的如权利要求1所述的ar-man纳米颗粒。
3.根据权利要求2所述的水凝胶，其特征在于：所述dsh载体由y-dna和l-dna自组装而成；
4.一种ar-man@dsh水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s1包括以下步骤：将阿托伐醌、r848与甘露糖聚乙二醇磷脂溶液混合均匀，离心得到ar-man纳米颗粒；优选地，阿托伐醌、r848与甘露糖聚乙二醇磷脂的质量比为1:1:5-15。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤s2中y-dna溶液和l-dna溶液经过从95℃到4℃的热退火处理。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s2包括以下步骤：将ar-man纳米颗粒、y-dna溶液混合均匀，之后与l-dna溶液混合均匀。
8.一种抗肿瘤药物，包括根据权利要求1所述ar-man纳米颗粒或根据权利要求2或3所述的水凝胶或根据权利要求4-7任一所述的制备方法制得的水凝胶。
9.根据权利要求1所述ar-man纳米颗粒或根据权利要求2或3所述的水凝胶或根据权利要求4-7任一所述的制备方法在制备以下药物中的应用：抗肿瘤药物、免疫治疗增敏剂或诱导巨噬细胞从m2表型向m1表型重编程的药物。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为结直肠癌、肺癌、乳腺癌或肝癌。
