本发明属于生物医药领域，具体涉及一种用于抑制人hla-e基因表达的shrna及其应用。
背景技术：
1、恶性黑色素瘤是人的主要恶性肿瘤之一，常发生于鼻、口腔、肛门和消化道的黏膜以及眼睛的脉络膜等部位，具有较高的侵袭性及迁移性。恶性黑色素瘤起源于胚胎期的神经嵴，常发病部位是皮肤，其次为黏膜，眼睛及肠道部位，致死率极高，预后极差，易发生转移。
2、皮肤恶性黑色素瘤的发病机制仍不完全明确。一项全球大数据统计发现，过度暴露于紫外线成为该病的主要发病因素。早诊断、早治疗是改善恶性黑色素瘤预后的关键因素。
3、人类白细胞抗原i类(human leukocyte antigen i，hla-i)基因可分为经典的hla-1a基因和非经典的hla-1b类基因。hla-e是非经典的hla-1b类基因中的一员，由7个内含子和8个外显子组成。
4、hla-e的多态性由第二、第三外显子的碱基序列决定，在大多数组织中都表达，但其表达水平比经典的主要组织相容性复合体i类(major histocompatibility complex i，mhc i)分子低25倍。nkg2a/cd94(nk cell lectin-like receptor subfamily c member1/killer cell lectin-like receptor subfamily d member 1)蛋白受体与载肽hla-e的结合导致其胞外区的免疫受体酪氨酸抑制基序(itim)磷酸化，阻止了细胞信号的传递，从而抑制nk(natural killer cell，nk)细胞和t细胞的活化。
5、现有技术中，还没有hla-e在恶性黑色素瘤中的报道，如何防治恶性黑色素瘤细胞，hla-e能否应用于防治恶性黑色素瘤的药物开发是本领域需要解决的问题之一。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的方法，本发明通过抑制hla-e的表达来抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖或迁移。本发明还提供了一种能够抑制hla-e表达的shrna靶点序列，本发明提供的抑制hla-e表达的shrna靶点序列通过茎环序列连接其互补序列形成抑制人hla-e基因表达的shrna序列。
2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、本发明提供了一种抑制hla-e表达的shrna靶点序列，其序列为seq id no:1所示。
4、本发明还提供了一种抑制人hla-e基因表达的shrna序列，包括人hla-e基因的shrna靶点序列(seq id no:1所示)及其互补序列，二者中间由茎环序列分隔。
5、优选的，茎环序列的述核苷酸序列如seq id no:2所示，seq id no:2：ctcgag。
6、本发明还提供了一种抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的方法，具体为，抑制hla-e的表达，hla-e的核苷酸序列如seq id no:3所示。
7、优选的，抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的方法具体是：利用rna干扰慢病毒对hla-e的表达进行抑制。
8、优选的，所述rna干扰慢病毒是将抑制hla-e基因表达的shrna序列克隆入慢病毒载体后获得的。
9、本发明还提供了以hla-e基因作为作用靶点制备治疗恶性黑色素瘤药物中的应用。
10、本发明还提供了所述shrna靶点序列在制备治疗恶性黑色素瘤药物中的应用。
11、本发明还提供了所述shrna靶点序列在抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖或迁移中的应用
12、本发明还提供了所述shrna靶点序列在促进恶性黑色素瘤细胞凋亡中的应用。
13、本发明还提供了所述shrna靶点序列在抑制ras-raf-mapk信号通路中的应用。
14、有益效果：
15、本发明中通过抑制hla-e基因表达，可以达到抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的目的，本发明针对hla-e基因设计的rna干扰慢病毒，抑制hla-e表达后能显著抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖，使肿瘤细胞分裂阻滞在g0/g1期，促进细胞的凋亡、抑制细胞的迁移，进而能达到治疗恶性黑色素瘤的目的，同时研究发现hla-e基因可通过ras-raf-mapk信号通路发挥作用，为将来基于hla-e基因的恶性黑色素瘤治疗药物的开发提供了广阔的前景。
1.一种抑制hla-e表达的shrna靶点序列，其特征在于，所述shrna靶点序列的核苷酸序列如seq id no:1所示。
2.一种抑制人hla-e基因表达的shrna序列，其特征在于，所述shrna序列包括seq idno:1所示的shrna靶点序列及其互补序列，二者中间由茎环序列分隔。
3.根据权利要求2所述的shrna序列，其特征在于，所述茎环序列的述核苷酸序列如seqid no:2所示。
4.一种抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的方法，其特征在于，所述方法为抑制hla-e的表达，hla-e的核苷酸序列如seq id no:3所示。
5.根据权利要求4所述的抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的方法，其特征在于，所述抑制hla-e的表达是利用rna干扰慢病毒对hla-e的表达进行抑制。
6.根据权利要求5所述抑制恶性黑色素瘤细胞增殖或迁移的方法，其特征在于，所述rna干扰慢病毒是将抑制hla-e基因表达的shrna序列克隆入慢病毒载体后获得的。
7.以hla-e基因作为作用靶点制备治疗恶性黑色素瘤药物中的应用，其特征在于，hla-e的核苷酸序列如seq id no:3所示。
8.权利要求1所述shrna靶点序列在制备治疗恶性黑色素瘤药物中的应用。
9.权利要求1所述shrna靶点序列在抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖、迁移或促进恶性黑色素瘤细胞凋亡中的应用。
10.权利要求1所述shrna靶点序列在抑制ras-raf-mapk信号通路中的应用。
