背景技术：
1、难以明确限定、自我更新的成体多能间充质干细胞(mesenchymal stemcell，msc)存在于几乎所有成体结缔组织(包括真皮)中。通常来说，它们维持生态位环境，是保护长期自我更新能力的关键要求，这对于组织稳态、修复和器官维持至关重要。
2、atp结合盒亚家族b成员5，简称abcb5，也称为p-糖蛋白abcb5，是跨质膜蛋白。活性转运体的abc超家族，包括被认为导致在癌症患者中引起药物抗性的转运体如abcb1(mdr1)、abcb4(mdr2/3)和abcg2(bcrp1，mxr1)，在非恶性细胞类型中发挥正常的细胞转运、分化和存活功能。已显示这些公知的abc转运体在干细胞群体和祖细胞群体上以高水平表达。由这些和相关的abc转运体介导的荧光染料罗丹明(rhodamine)123和hoechst 33342的外排(efflux)能力已用于从多种组织中分离这样的细胞亚类。例如，abcb5鉴定了新的真皮细胞亚群和眼细胞亚群。
技术实现思路
1、本文中公开了abcb5+干细胞群体的组合物，其被可靠地分离并以精确的治疗量包装到使用单位容器(unit of use container)中。
2、在本公开内容的一些方面中，提供了包含含有以下的使用单位小瓶(1)的装置：10.4×106±20％至15.6×106±20％个abcb5+干细胞/ml，任选地容积为1至2ml、1.45至1.50ml、4至5ml、1至5ml、或4.05至4.96ml，其中所述使用单位小瓶(1)是封闭系统冻存管(cryogenic vial)。
3、在一些方面中，提供了包含在解冻之后含有以下的使用单位小瓶(1)的装置：8×106±20％至13×106±20％、8.5×106±20％至12.5×106±20％、8.9×106±20％至12.1×106±20％、或8.9×106±20％至12.4×106±20％个abcb5+干细胞/ml，任选地容积为1.5至5ml、1.5至4ml、2至5ml、或2至4ml，其中所述使用单位小瓶(1)是封闭系统冻存管。
4、在一些实施方案中，小瓶(1)包含至少一个与细胞容器(6)连接的填充管(3)。在一些实施方案中，小瓶(1)包含4.50ml的容积。在一些实施方案中，小瓶(1)包含4.0ml的容积。
5、在一些实施方案中，小瓶(1)包含13×106±20％个abcb5+干细胞/ml。
6、在一些实施方案中，在小瓶解冻之后，小瓶(1)包含10×106±20％至11×106±20％个abcb5+干细胞/ml。在另一些实施方案中，在小瓶解冻之后，小瓶(1)包含8×106至13×106±20％、8.5×106±20％至12.5×106±20％、8.9×106±20％至12.1×106±20％、或8.9×106±20％至12.4×106±20％个abcb5+干细胞/ml。
7、在一些实施方案中，小瓶(1)包含具有顶端和底端的细胞容器(6)，其中顶端与通气口(4)和填充管(3)连接。通气口(4)和填充管(3)各自具有远表面和近表面，并且其中各自的近表面与细胞容器(6)的顶端相邻。在一些实施方案中，填充管(3)将填充接口(2)与细胞容器(6)的顶端连接。在一些实施方案中，填充接口(2)包含用于连接细胞递送装置(16)的气密密封的填充连接件。在一些实施方案中，填充连接件是鲁尔锁(luer lock)。在一些实施方案中，微生物过滤器(5)位于通气口(4)内。
8、在另一些方面中，提供了用于制备单位剂量的治疗性细胞溶液的方法。该方法涉及制备包含abcb5阳性细胞的合并群体，浓缩细胞并将所浓缩的细胞重悬以产生细胞浓度为16×106个/ml至24×106个/ml、13×106个/ml至24×106个/ml、13×106个/ml±20％、13×106个/ml±10％、13×106个/ml±5％、13×106个/ml±1％、或13×106个/ml的合并样品，从合并样品中等分细胞的单位样品，并通过封闭系统冻存管(1)的填充接口(2)将单位样品转移至填充管(3)，并且将单位样品转移到细胞容器(6)中以产生单位剂量的治疗性细胞溶液(7)。
9、在一些实施方案中，该方法还包括在将单位样品转移至细胞容器(6)之后使小瓶(1)成角度以使单位样品暴露于填充管(3)并使无菌测试样品进入到填充管(3)中，使小瓶(1)成角度至直立位置并将无菌测试样品从填充管(3)移出。在一些实施方案中，合并样品的细胞浓度为约20×106个/ml或约13×106个/ml±10％。在一些实施方案中，使小瓶(1)以约90度角成角度。
10、在一些实施方案中，单位样品为约5ml。
11、在一些实施方案中，使用与填充接口(2)连接的鲁尔锁注射器(16)将单位样品转移至填充管(3)。
12、在一些实施方案中，填充接口(2)包含用于连接细胞递送装置(16)的气密密封的填充连接件。在一些实施方案中，使用注射器将无菌测试样品从填充管(3)移出。
13、在一些实施方案中，小瓶(1)中的治疗性细胞溶液(7)的单位剂量包含约1.5ml或4.0至4.50ml的容积。
14、在一些实施方案中，小瓶(1)中的治疗性细胞溶液(7)的单位剂量包含约13×106个abcb5+干细胞/ml。在一些实施方案中，小瓶(1)中的治疗性细胞溶液(7)在细胞解冻之后的单位剂量包含约10×106至10.5×106个abcb5+干细胞/ml。在小瓶解冻之后，小瓶(1)中的治疗性细胞溶液(7)在细胞解冻之后的单位剂量包含约8×106至13×106、8.5×106至12.5×106、8.9×106至12.1×106、或8.9×106至12.4×106个abcb5+干细胞/ml。
15、在一些实施方案中，提供了这样的abcb5+干细胞群体，其是合成的abcb5+干细胞群体，其中该群体中的大于96％是生理上存在的abcb5阳性干细胞的体外后代。在一些实施方案中，该群体中的大于96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％、99.5％、99.7％、99.9％、99.99％、99.998％、99.999％或99.999997％是生理上存在的abcb5阳性干细胞的体外后代。在一些实施方案中，该群体中的100％是生理上存在的abcb5阳性真皮干细胞或眼干细胞的体外后代。
16、作为本发明的一个方面，还提供了本发明的干细胞群体用于治疗干细胞治疗可用于的任意病症、组织改造、或者使用所储存的细胞进行伤口愈合的用途。
17、本发明的每个限制均可涵盖本发明的多个实施方案。因此，预期涉及任何一种要素或要素组合的本发明的每个限制均可包含在本发明的每个方面中。本发明在其应用方面不限于在以下描述中阐述的或在附图中举例说明的组分的布置和构造的细节。本发明能够具有其他实施方案，并且能够以多种方式被实践或实施。此外，本文中使用的措辞和术语是出于描述的目的，而不应被认为是限制性的。本文中使用“包括”、“包含”、或“具有”、“含有”、“涉及”及其变化形式意指涵盖其后列出的项目及其等同物以及另外的项目。
1.装置，所述装置包含
2.权利要求1所述的装置，其中所述小瓶(1)包含至少一个与细胞容器(6)连接的填充管(3)。
3.权利要求1或2所述的装置，其中所述小瓶(1)包含1至2ml、1.45至1.50ml、4至5ml、1至5ml、或4.05至4.96ml的容积。
4.权利要求1至3中任一项所述的装置，其中所述小瓶(1)包含13×106+/-10％个abcb5+干细胞/ml或10.5×106+/-10％个细胞/ml。
5.权利要求1至4中任一项所述的装置，细胞容器(6)具有顶端和底端，其中所述顶端与通气口(4)和填充管(3)连接，其中所述通气口(4)和所述填充管(3)各自具有远表面和近表面，并且其中各自的近表面与所述细胞容器(6)的顶端相邻。
6.权利要求5所述的装置，其中所述填充管(3)将填充接口(2)与所述细胞容器(6)的顶端连接。
7.权利要求6所述的装置，其中所述填充接口(2)包含用于连接细胞递送装置(16)的气密密封的填充连接件。
8.权利要求7所述的装置，其中所述填充连接件是鲁尔锁。
9.权利要求5所述的装置，其中微生物过滤器(5)位于所述通气口(4)内。
10.用于制备单位剂量的治疗性细胞溶液的方法，其包括
11.权利要求10所述的方法，其还包括在将所述单位样品转移至所述细胞容器(6)之后使所述小瓶(1)成角度，以使无菌测试样品返回到所述填充管(3)中，使所述小瓶(1)成角度至直立位置并将所述无菌测试样品从所述填充管(3)移出。
12.权利要求11所述的方法，其中所述合并样品的细胞浓度为约13×106+/-10％个细胞/ml。
13.权利要求10至12中任一项所述的方法，其中所述单位样品为约2ml或约5ml。
14.权利要求11至13中任一项所述的方法，其中使所述小瓶(1)以约90度角成角度。
15.权利要求10至14中任一项所述的方法，其中使用与所述填充接口(2)连接的鲁尔锁注射器(16)将所述单位样品转移至所述填充管(3)。
16.权利要求10至15中任一项所述的方法，其中所述填充接口(2)包含用于连接细胞递送装置(16)的气密密封的填充连接件。
17.权利要求11所述的方法，其中使用注射器将所述无菌测试样品从所述填充管(3)移出。
18.权利要求10至17中任一项所述的方法，其中所述小瓶(1)中的治疗性细胞溶液(7)的单位剂量包含约至少1.5ml或4.50ml的容积。
19.权利要求10至18中任一项所述的方法，其中所述小瓶(1)中的治疗性细胞溶液(7)的单位剂量包含约13×106±20％个abcb5+干细胞/ml。
20.权利要求10至19中任一项所述的方法，其还包括将细胞的小瓶解冻，将所述细胞从所述小瓶移出并在注射器中重构所述细胞。
21.权利要求10至19中任一项所述的方法，其还包括将细胞的小瓶解冻，将所述细胞从所述小瓶移出并在输注袋中重构所述细胞。
22.用于治疗对象的方法，其包括向所述对象施用单位剂量的治疗性细胞溶液，其中所述单位剂量的治疗性细胞溶液从权利要求1至9中任一项所述的装置获得或者根据权利要求10至21中任一项所述的方法制备。
23.权利要求22所述的方法，其中向所述对象的伤口施用所述细胞溶液。
24.权利要求22或23所述的方法，其中向所述对象施用多个单位剂量的治疗性细胞溶液。
