本发明涉及药物分析与检测，更具体的公开了一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法。
背景技术：
1、蒙脱石，英文名montmorillonite。其名称来源于首先发现的产地—法国的蒙脱里隆（montmorillon）。蒙脱石主要由基性火成岩在碱性环境中风化而成，也有的是海底沉积的火山灰分解后的产物。我国膨润土的储量世界第一位，种类齐全，分布广。蒙脱石是一种铝硅酸盐粘土矿物，其特殊的2:1型层状结构中部分al3+可被mg2+或ca2+取代而带上负电荷，置换后基本层中带负电，层间带正电。晶胞中浓度高的阳离子会取代浓度低的阳离子。层间发生离子交换使得蒙脱石电荷不均匀而产生强大的静电吸附能。蒙脱石热稳定性高，724℃-775℃时结构才会歪扭导致特性丧失。化学性质稳定，不易被氧化剂和还原剂破坏（冯雪梅, 蒙脱石散的质量标准研究[d].吉林大学, 2020）。蒙脱石散，商品名思密达，原研厂家为法国博福-益普生制药公司，适应症为用于儿童及成人急、慢性腹泻。目前国内仿制药厂家数量众多，市场用量巨大。2020版中国药典规定含蒙脱石应为标示量的95.0%-105.0%；含三氧化二铝（al2o3）应为蒙脱石标示量的12.0%-25.0%。含量测定项下三氧化二铝（al2o3）的含量测定使用的滴定法。药物有效成分的含量关系到药物的安全性、有效性、质量可控性，在目前仿制药质量要求不断提高的行业背景下，对药物质量的研究投入了越来越多的研发精力与成本。由于蒙脱石为天然无机产物，故无法使用液相色谱直接进行分析。而对于没有紫外-可见光吸收的有机化合物，其在使用液相色谱分析时，普通的紫外检测器则无法满足分析要求，但是目前，已经开发出了多种衍生化的方法，液相色谱仪的衍生化技术是指将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较低的物质与某种试剂（即衍生化试剂）反应，使之生成易于检测的化合物的过程。紫外衍生化是指将紫外吸收弱或无紫外吸收的有机化合物与带有紫外吸收基团的衍生化试剂反应，使之生成可以用紫外检测的化合物，如胺类化合物容易与卤代烃、羰基、酰基类衍生试剂反应。对于过渡金属离子，其方法一是与显色剂反应，生成有色的配合物、螯合物或离子缔合物后用可见光检测；二是用于有机离子的检测，在流动相中加入被测离子的反离子，使之形成有色的离子对化合物后，分离检测。而上述描述的液相色谱衍生化方法，均未能很好的解决蒙脱石中的三氧化二铝（al2o3）分析检测，其存在的问题一是：蒙脱石为无机矿物，与带有紫外吸收基团的衍生化试剂很难发生反应；其二，直接使用金属螯合剂，显然无法直接与三氧化二铝（al2o3）螯合，也不能使用离子色谱进行分析。
技术实现思路
1、本发明主要是提供了一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，能够解决目前的液相色谱衍生化方法未能很好的解决蒙脱石中三氧化二铝的分析检测问题。具体包括以下内容：
2、s1、精密称取蒙脱石，进行酸解0.5-1.5h，酸解结束后，调节体系ph至4-6，向溶液中加入金属离子螯合剂5-甲氧基喹啉-8-醇，搅拌10min，使其与铝离子形成螯合物，过滤，水洗滤渣三次，极性有机溶剂洗涤滤渣三次，蒙脱石∶酸∶螯合剂的质量比为1∶（7-20）∶（3-6）；
3、 s2、向步骤s2所得滤渣中加入萃取溶剂，过滤，滤液用萃取溶剂稀释后得供试品溶液；
4、s3、精密称取5-甲氧基喹啉-8-醇对照品，加稀释剂稀释得对照品溶液；
5、s4、将步骤s2供试品溶液、步骤s3对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图；
6、色谱条件包括：
7、色谱柱：hypersil gold c18柱250mm×4.6mm×5μm或效能相当的色谱柱；
8、流动相：甲醇：0.04mol/l磷酸二氢钾溶液：三乙胺的体积比为300∶500∶0.5；
9、检测波长：254±5nm；
10、洗脱方式：等度；
11、流速：0.9-1.2ml/min；
12、柱温：20-35℃；
13、进样量：20μl；
14、然后通过公式计算得到蒙脱石中三氧化二铝的含量：
15、
16、其中，mv为三氧化二铝的摩尔质量（101.96），mr为金属螯合剂的摩尔质量（175.18），sv为液相色谱中供试品溶液峰面积，sr为液相色谱中对照品溶液峰面积，cr为对照品溶液的浓度，m为蒙脱石的质量，v为供试品溶液体积。
17、更进一步的，所述s1中，酸解使用的酸可选自浓盐酸、硝酸中的一种或组合；s1中，极性有机溶剂为中等极性有机溶剂可选自乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸异丙酯、甲酸乙酸中的一种或组合；s1中，螯合物中螯合剂与铝离子摩尔比为3:1，金属螯合剂及其与铝离子的螯合物结构式如下所示：
18、。
19、更进一步的，所述s2中，萃取溶剂为60-90%甲醇水溶液；s2中，供试品溶液中螯合物的浓度为0.1-0.4mg/ml。
20、更进一步的，所述s3中，稀释剂为60-90%甲醇水溶液；s3中，5-甲氧基喹啉-8-醇对照品溶液的浓度为0.1-0.4mg/ml。
21、更进一步的，所述s4中，记录色谱图中供试品溶液、对照品溶液色谱图峰面积，外标法对蒙脱石药物有效成分定量分析。
22、本发明提供的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法的有益效果为：该方法首次采用液相色谱法对蒙脱石药物中的有效成分三氧化二铝（al2o3）进行检测，在中国药典的滴定法基础上，进一步丰富了检测手段，与滴定法相比较，本发明具有以下明显优势：（1）无需滴定法检测过程中的煮沸，沙浴等高温操作，减少安全风险；（2）避免滴定法过程各种终点的判断，提高分析方法的精密度；（3）样品液相分析时间只需不到5分钟，与滴定法比较，大大缩短了检测时间成本；（4）样品用量大大减少，滴定法测试样品数量在1.0g以上，而本发明方法样品用量只需100mg左右，同时，强酸的用量也只有滴定法的十分之一左右。本技术方案采用酸解，与蒙脱石中有效成分三氧化二铝（al2o3）反应得到al3+，从而与金属螯合剂5-甲氧基喹啉-8-醇形成螯合物，解决了三氧化二铝（al2o3）不能与金属螯合剂络合的问题；螯合剂5-甲氧基喹啉-8-醇具有芳香性，具有强的紫外吸收光谱，解决了蒙脱石中有效成分三氧化二铝（al2o3）无紫外吸收的问题，从而通过配备紫外检测器的液相色谱仪实现对蒙脱石中有效成分三氧化二铝（al2o3）的检测。
1.一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s1中，所述酸解使用的酸可选自浓盐酸、硝酸中的一种或组合。
3.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s1中，螯合物中螯合剂与铝离子摩尔比为3:1，金属螯合剂及其与铝离子的螯合物结构式如下所示：
4.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s1中，极性有机溶剂可选自乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸异丙酯、甲酸乙酸中的一种或组合。
5.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s2中，萃取溶剂为甲醇水溶液。
6.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s2中，供试品溶液中螯合物的浓度为0.1-0.4mg/ml。
7.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s3中，稀释剂为甲醇水溶液。
8.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s3中，对照品溶液的浓度为0.1-0.4mg/ml。
9.根据权利要求1所述的一种治疗腹泻的蒙脱石药物有效成分检测方法，其特征在于：所述s4中，蒙脱石药物有效成分定量方法为外标法。
