本发明涉及免疫层析，尤其是涉及多联荧光免疫层析检测试纸卡及检测方法。
背景技术：
1、目前市面上的对于两种抗原进行联合检测的荧光免疫检测试剂多采用双抗体夹心法原理，试剂卡上包括两条测试线(t带)和一条质控线(c带)。层析过程中，荧光标记的抗体-抗原复合物会先流经检测带，与检测带中包被抗体结合产生荧光信号。剩余的游离的荧光标记的抗体-抗原复合物流经质控带，与质控带中抗体结合，但是两种抗体共用同一条质控带，荧光信号会同时受到待测样品中抗原浓度影响，导致不同抗原的检测结果存在相互干扰，准确性差。例如当抗原a浓度高而抗原b浓度低的时候，多余的游离抗原b标记抗体会拉高质控线的荧光信号，导致检测到的抗原a浓度值比实际浓度低。
2、以抗原crp和saa的检测为例，crp是肝脏产生的一种急性时相反应蛋白。在感染、炎症、免疫复合物沉积等时，数小时内显著升高，并诱发机体产生炎症反应。细菌感染时，crp能和细菌细胞壁的磷酸胆碱相结合，激活补体，调节细胞的吞噬功能，但在病毒感染时crp含量无显著变化。血清crp的含量不受性别、年龄、身体状况等因素的影响，能反映机体炎症反应程度，可作为疾病急性期的一个衡量指标。saa是机体急性时相反应蛋白之一。正常情况下，血清saa含量极微，但受到病毒、细菌等病原体刺激后可大量分泌入血液，在发病6h内即可提高约1000倍。联合检测crp/saa浓度水平能够有效的预测疾病及其发病的危险程度，此外crp和saa联合检测能够有效的鉴别、诊断细菌和病毒感染，对小儿感染性疾病的鉴别有非常重要的意义。crp与saa联合检测可提高检测敏感性和特异性，对鉴别诊断提供更充分的依据，二者联合检测能够优势互补，比单独检测一个项目更具有意义。但是，二者联合检测时存在互相干扰的问题，因此迫切需要一种方法来解决这个原因带来的检测误差。
3、鉴于此，特提出本发明。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种层析膜，期望通过针对不同目标蛋白引入不同标记分子作为质控指标，从而实现同一待测样本中不同目标蛋白的无干扰独立检测。
2、为了解决上述技术问题，实现上述目的，本发明提供以下技术方案：
3、第一方面，本发明提供层析膜，所述层析膜含有至少两组对应设置的检测线和质控线，所述检测线分别包被不同目标蛋白的捕获结合分子，所述质控线分别包被不同标记分子的质控结合分子；
4、所述层析膜上还含有不同目标蛋白的标记结合分子，所述标记结合分子上分别带有不同的标记分子，且所述标记结合分子上带有供检出的功能基团。
5、在可选的实施方式中，所述标记分子包括蛋白质标签。
6、优选地，所述蛋白质标签选自his、flag、ha、myc、gst、sumo或gfp。
7、在可选实施方式中，所述蛋白质标签的中的至少一个分子量小于10kda。
8、在可选的实施方式中，所述目标蛋白包括至少一种待测抗原和/或至少一种待测抗体。
9、在可选的实施方式中，所述检测线包括第一检测线和第二检测线，所述质控线包括第一质控线和第二质控线；或者，所述检测线包括第一检测线、第二检测线和第三检测线，所述质控线包括第一质控线、第二质控线和第三质控线。
10、在可选的实施方式中，所述目标蛋白包括crp和saa，或者所述目标蛋白包括ctni、ck-mb和myo。
11、可选地，所述标记结合分子含有抗crp第一单克隆抗体和抗saa第一单克隆抗体；所述抗crp第一单克隆抗体、所述抗saa第一单克隆抗体中的一种带有所述蛋白质标签为his，另一种带有所述蛋白质标签myc、flag或ha中的一种。
12、可选的，所述标记结合分子含有抗ctni第一单克隆抗体、抗ck-mb第一单克隆抗体和抗myo第一单克隆抗体；所述抗ctni第一单克隆抗体带有蛋白质标签为his，所述抗ck-mb第一单克隆抗体带有蛋白质标签为myc，所述抗myo第一单克隆抗体带有蛋白质标签为flag。
13、在可选的实施方式中，所述第一检测线包被抗crp第二单克隆抗体，第二检测线包被抗saa第二单克隆抗体；所述第一质控线包被抗his抗体，第二质控线包被抗myc抗体、抗flag抗体或抗ha抗体中的一种。
14、可选的，所述第一检测线包被抗ctni第二单克隆抗体，第二检测线包被抗ck-mb第二单克隆抗体，第三检测线包括抗myo第二单克隆抗体；所述第一质控线包被抗his抗体，第二质控线包被抗myc抗体，第三质控线包被抗flag抗体。
15、在可选的实施方式中，所述检测线和质控线按照样品端至吸水端的排列顺序为：第一检测线、第一质控线、第二检测线和第二质控线；或者，第一检测线、第一质控线、第二检测线、第二质控线、第三检测线和第三质控线。
16、第二方面，本发明提供免疫层析检测试剂卡或试剂盒，所述试剂卡或试剂盒包括前述实施方式任一项所述的层析膜，以及样品垫、结合垫和吸水垫；可选地，所述功能基团为荧光发光基团。
17、第三方面，本发明提供免疫层析检测方法，将待测样本上样至前述实施方式所述试剂卡的样品垫，待测样本经过层析膜层析得到具有不同荧光强度的检测线和质控线，根据不同目标蛋白对应检测线和质控线的荧光强度计算得到待测样本中不同目标蛋白的浓度值。
18、本发明提供了用于一次性检出多种的不同目标蛋白的多联免疫层析膜，所述层析膜含有至少两组对应设置的检测线和质控线，所述质控线分别包被不同标记分子的质控结合分子，用于将不同目标蛋白形成的免疫复合物区分开，从而消除了检测中不同抗原浓度对质控带信号的影响，解决灵敏度低、准确度低等技术问题。
19、一些更优选的情况下，本发明提供了使用蛋白质标签或抗蛋白质标签抗体作为标记分子的技术方案，通过考察蛋白质标签分子量以及不同蛋白质标签分子组合对检测结果线性的影响，确定了蛋白质标签的分子量，以及标记多个目标蛋白的不同蛋白质标签分子量大小差距对检测线性有着重要影响，为保证采用多质控线检测多目标蛋白的灵敏度和准确度提供了新思路。
1.层析膜，其特征在于，所述层析膜含有至少两组对应设置的检测线和质控线，所述检测线分别包被不同目标蛋白的捕获结合分子，所述质控线分别包被不同标记分子的质控结合分子；
2.根据权利要求1所述的层析膜，其特征在于，所述标记分子包括蛋白质标签；
3.根据权利要求2所述的层析膜，其特征在于，所述蛋白质标签的中的至少一个分子量小于10kda。
4.根据权利要求1所述的层析膜，其特征在于，所述目标蛋白包括至少一种待测抗原和/或至少一种待测抗体。
5.根据权利要求1所述的层析膜，其特征在于，所述检测线包括第一检测线和第二检测线，所述质控线包括第一质控线和第二质控线；
6.根据权利要求5所述的层析膜，其特征在于，所述目标蛋白包括crp和saa；或者，所述目标蛋白包括ctni、ck-mb和myo；
7.根据权利要求6所述的层析膜，其特征在于，所述第一检测线包被抗crp第二单克隆抗体，第二检测线包被抗saa第二单克隆抗体；所述第一质控线包被抗his抗体，第二质控线包被抗myc抗体、抗flag抗体或抗ha抗体中的一种；
8.根据权利要求1所述的层析膜，其特征在于，所述检测线和质控线按照样品端至吸水端的排列顺序为：第一检测线、第一质控线、第二检测线和第二质控线；或者，第一检测线、第一质控线、第二检测线、第二质控线、第三检测线和第三质控线。
9.免疫层析检测试剂卡或试剂盒，其特征在于，所述试剂卡或试剂盒包括权利要求1～8任一项所述的层析膜，以及样品垫、结合垫和吸水垫；可选地，所述功能基团为荧光发光基团。
10.免疫层析检测方法，其特征在于，将待测样本上样至权利要求9所述试剂卡的样品垫，待测样本经过层析膜层析得到具有不同荧光强度的检测线和质控线，根据不同目标蛋白对应检测线和质控线的荧光强度计算得到待测样本中不同目标蛋白的浓度值。
