本发明涉及微生物培养，具体涉及一种适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法及应用。
背景技术：
1、杀虫真菌是自然界中能够主动侵染并杀死昆虫或其它节肢动物的一大类真菌的总称，据统计60％以上昆虫的自然死亡是由真菌侵染引起，因此杀虫真菌可以被开发成生物农药用于农林牧业害虫的生物防治，其中球孢白僵菌是研究和应用最为广泛的杀虫真菌之一。在实际生产过程中，一般利用谷壳、玉米、油饼、大米、黄豆等农副产品为原料配成固体产孢培养基，通过固体发酵生产孢子粉并制成菌剂用于田间喷施杀虫。现有的杀虫真菌孢子粉固体发酵工艺一般采用浅盘发酵法，即：将种子培养物同浅盘中的固体培养基搅拌混匀接种，然后直接将浅盘置于相对洁净的环境中进行浅盘光照培养，直至培养物充分产孢(图1)。不论是进行工厂化大规模生产还是进行小规模家庭作坊生产，浅盘培养过程中都存在培养物容易被杂菌污染的问题。而在西藏等高寒干燥地区，通过常规的浅盘培养生产球孢白僵菌孢子粉，还存在固体培养基水分挥发流失快，菌丝生长不充分，最终产孢量较低的问题。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法，在常规浅盘培养法基础上，增加一个菌袋培养环节，因为菌袋具有密封、保湿、透气和隔离功能，可以减少球孢白僵菌初级生长阶段(菌丝生长阶段)固体培养基的水分蒸发，保证菌丝充分生长，并且能够减少产孢培养物被环境中的杂菌污染，从而提高孢子粉的产量和纯度。
2、为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明是通过以下技术方案实现：
3、一种适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法，在浅盘培养法基础上增加菌袋培养，减少球孢白僵菌初级生长阶段(菌丝生长阶段)固体培养基的水分蒸发，促进菌丝生长降低杂菌污染。
4、具体包括以下步骤：
5、s1：将球孢白僵菌斜面菌种无菌操作接种到种子培养基中，置于26℃进行恒温震荡培养3-5天，获得种子培养物；
6、s2：按照固体培养基配方，以农副产品为原料配制固体发酵培养基；
7、s3：将固体发酵培养基分装到耐高温材料的菌袋中进行湿热灭菌；
8、s4：将种子培养物按1：10(v/v)的比例无菌操作接种到高温灭菌后的袋装培养基中；
9、s5：将接种混匀的菌袋密封后置于26℃或常温条件的洁净环境进行光照菌袋培养；
10、s6：菌袋培养大约1个星期，因为菌袋的保湿透气功能，菌袋中的球孢白僵菌菌丝得以充分生长，积累了充足的生物量；
11、s7：将菌袋培养物转移到浅盘中，进行浅盘光照培养1-2个星期，此阶段的光照和干燥条件，使得浅盘中的培养物能够充分产孢，加上培养物中球孢白僵菌已成为绝对的优势菌群，所以不容易被杂菌污染，从而提高了孢子粉的产量和纯度。
12、进一步的，所述步骤s2中农副产品包括但不限于谷壳、玉米、油饼、大米、黄豆。
13、进一步的，所述步骤s2中固体发酵培养基包括：以青稞粉为主要基质、谷壳为载体，质量比为6：1。
14、另一方面，上述方法还适用于培养其它种类的杀虫真菌，包括但不限于假球孢白僵菌、布氏白僵菌、蜡蚧轮枝菌、莱氏野村菌、蝉拟青霉、金龟子绿僵菌与黄绿绿僵菌。
15、另一方面，本发明提出上述方法在高寒干燥地区球孢白僵菌孢子粉生产中的应用。
16、本发明的有益效果：
17、1.提高产孢量和孢子粉纯度：本发明通过在菌袋中先行培养球孢白僵菌，利用菌袋的密封、保湿、透气和隔离功能，减少了在干燥地区培养材料中水分的蒸发和流失，为菌丝的充分生长提供了良好的条件。菌丝生长充分后转移至浅盘进行光照培养，这样可以在保证菌丝生长的基础上，再通过适当的干燥和光照条件诱导孢子的形成。相比于常规方法，这种两阶段的培养方式能显著提高孢子粉的产量，并且由于菌丝的大量积累，使球孢白僵菌成为绝对的优势菌群，从而减少杂菌污染，提高孢子粉的纯度。
18、2.降低生产成本：使用简易的固体产孢培养基，如青稞粉与谷壳，这些材料成本较低，易于在当地获取，从而降低了生产成本。同时，由于球孢白僵菌在菌袋阶段的培养能够减少水分流失，所以对水资源的需求较低，这在干燥地区尤为重要。
19、3.适用性强：本发明培养方法不但适用于球孢白僵菌，还适用于培养其他杀虫真菌，如假球孢白僵菌、布氏白僵菌等，因此这一技术方案在生物农药的生产领域中有很好的应用前景。
20、在菌袋培养阶段，由于菌袋的保湿透气性良好，在减少水分蒸发的同时，还能保持适宜的气体交换，这对于真菌的代谢和生长至关重要。而且，由于菌丝在密封环境中生长，其与外界杂菌的接触机会减少，降低了被污染的风险。
21、在光照培养阶段，适当的光照和温度会诱导球孢白僵菌形成孢子，同时干燥条件可以促使孢子脱水成熟，这对提高孢子的存活率和感染能力都是必需的。过渡到浅盘光照培养，由于菌袋已经形成了足够的菌丝量，这些菌丝已经占据了绝对优势，因此在外界条件对杂菌不利的同时，这些优势菌群能更有效地进行产孢。
22、总之，本技术方案在兼顾菌丝生长和孢子产生的同时，考虑到了干燥地区的特殊环境条件，通过创新地结合菌袋培养和浅盘培养的优点，实现了在特定区域更高效、高纯度地生产球孢白僵菌孢子粉的目标。
23、当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
1.一种适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法，其特征在于，在浅盘培养法基础上增加菌袋培养，减少球孢白僵菌初级生长阶段固体培养基的水分蒸发，促进菌丝生长降低杂菌污染；
2.如权利要求1所述的适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法，其特征在于：所述步骤s2中农副产品包括但不限于谷壳、玉米、油饼、大米与黄豆。
3.如权利要求1所述的适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法，其特征在于：所述步骤s2中固体发酵培养基包括：以青稞粉为主要基质、谷壳为载体，质量比为6：1。
4.如权利要求1所述的适合于干燥地区生产球孢白僵菌孢子粉的方法，其特征在于：还适用于培养其它种类的杀虫真菌，包括但不限于假球孢白僵菌、布氏白僵菌、蜡蚧轮枝菌、莱氏野村菌、蝉拟青霉、金龟子绿僵菌与黄绿绿僵菌。
5.如权利要求1-4任一项所述方法在高寒干燥地区球孢白僵菌孢子粉生产中的应用。
