本发明涉及药物分析，尤其涉及一种np-01中有关物质的检测方法。
背景技术：
1、化合物np-01的结构式如式(i)所示，其在胃癌、肝癌、肺癌、前列腺癌等多种肿瘤动物模型中表现出优异的抗肿瘤活性。
2、
3、在现有工艺合成np-01原料药的过程中可能会引入副产物、起始物料或中间体等，如杂质bzp00177、杂质bzp00181、杂质bzp00176、杂质bzp00178、杂质bzp00129、杂质bzp00128、杂质bzp00155、杂质bzp00171、杂质bzp00170、杂质bzp00127以及杂质bzp00268等11种杂质，且目前并没有相关文献报道该11种杂质的检测方法。因此，开发一种能够实现对np-01原料药中有关物质的检测方法，对提高用药安全和np-01原料药的质量控制具有重要意义。
技术实现思路
1、鉴于此，本申请提供一种np-01中有关物质的检测方法，专属性强，并具有优异的灵敏度、准确度和线性关系，能够满足np-01原料药中杂质bzp00177、杂质bzp00181、杂质bzp00176、杂质bzp00178、杂质bzp00129、杂质bzp00128、杂质bzp00155、杂质bzp00171、杂质bzp00170、杂质bzp00127以及杂质bzp00268等11种杂质的检测要求。
2、上述11中杂质的结构分别如下所示：
3、
4、
5、为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：
6、一种np-01中有关物质的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
7、步骤一、配制供试品溶液和系统适用性溶液：
8、供试品溶液的配制：取np-01样品，用溶剂配制成供试品溶液；
9、系统适用性溶液：取杂质bzp00177、杂质bzp00181、杂质bzp00176、杂质bzp00178、杂质bzp00129、杂质bzp00128、杂质bzp00155、杂质bzp00171、杂质bzp00170、杂质bzp00127、杂质bzp00268和np-01对照品，用溶剂配制成系统适用性溶液；
10、步骤二、采用液相色谱对所述供试品溶液和所述系统适用性溶液进行检测，所述液相色谱的色谱条件为：
11、采用agilent zorbax bonus-rp色谱柱，以体积浓度为0.08％～0.1％的三氟乙酸水溶液为流动相a，以甲醇为流动相b，梯度洗脱，检测波长为243nm～247nm。
12、相对于现有技术，本申请提供的np-01中有关物质的检测方法具有以下优势：
13、本申请提供的np-01中有关物质的检测方法，实现对原料药中杂质bzp00177、杂质bzp00181、杂质bzp00176、杂质bzp00178、杂质bzp00129、杂质bzp00128、杂质bzp00155、杂质bzp00171、杂质bzp00170、杂质bzp00127以及杂质bzp00268等11种杂质的定量分析，该方法专属性强，灵敏度高，满足np-01原料药中11种杂质的检测要求，而且，其线性关系良好，重复性高，标准曲线的线性范围内的相关系数都大于0.99；此外，该检测方法还具有分析时间快，能够快速、准确地对np-01原料药中的杂质进行检测，整个操作过程可靠、可控，适于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。
14、可选的，所述梯度洗脱的程序为：
15、0min→15min，82％～78％→60％流动相a，18％～22％→40％流动相b；
16、15min→25min，60％→50％流动相a，40％→50％流动相b；
17、25min→35min，50％→45％流动相a，50％→55％流动相b；
18、35min→45min，45％→10％流动相a，55％→90％流动相b；
19、45min→49min，10％流动相a，90％流动相b；
20、49min→49.1min，10％→80％流动相a，90％→20％流动相b；
21、49.1min→55min，80％流动相a，20％流动相b。
22、进一步可选的，所述梯度洗脱的程序为：
23、0min→15min，80％→60％流动相a，20％→40％流动相b；
24、15min→25min，60％→50％流动相a，40％→50％流动相b；
25、25min→35min，50％→45％流动相a，50％→55％流动相b；
26、35min→45min，45％→10％流动相a，55％→90％流动相b；
27、45min→49min，10％流动相a，90％流动相b；
28、49min→49.1min，10％→80％流动相a，90％→20％流动相b；
29、49.1min→55min，80％流动相a，20％流动相b。
30、梯度洗脱对检测目标物的分离效果和峰形有着显著影响，因此，本申请优选的梯度洗脱顺序能将11种杂质与np-01进行分离，分离效果优异，杂质间分离度大于1.2，主峰与相邻杂质峰分离度大于1.5。
31、可选的，所述流动相a为体积浓度为0.1％的三氟乙酸水溶液。
32、可选的，所述检测波长为245nm。
33、可选的，柱温为30℃～40℃，流速为1.0ml/min～1.2ml/min。
34、进一步可选的，所述柱温为35℃，流速为1.1ml/min。
35、优选的流速和柱温，能够使得11种杂质和np-01既能在较短时间内出峰，减少分析时间，且分离效果优异，峰型较好。
36、可选的，所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm×5μm。
37、可选的，所述溶剂为体积比为7:3的甲醇和水的混合溶液。
38、优选的溶剂能尽可能的将np-01原料药及其中含有的11种杂质提取出来，且对液相色谱的检测基本无干扰，保证本发明提供的液相色谱检测结果更准确。
39、可选的，进样量为10μl。
1.一种np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱的程序为：
3.如权利要求2所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱的程序为：
4.如权利要求1所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述流动相a为体积浓度为0.1％的三氟乙酸水溶液。
5.如权利要求1所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述检测波长为245nm。
6.如权利要求1所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：柱温为30℃～40℃，流速为1.0ml/min～1.2ml/min。
7.如权利要求6所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述柱温为35℃，所述流速为1.1ml/min。
8.如权利要求1所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm×5μm。
9.如权利要求1～8任一项所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：所述溶剂为体积比为7:3的甲醇和水的混合溶液。
10.如权利要求1～8任一项所述的np-01中有关物质的检测方法，其特征在于：进样量为10μl。
