本发明专利属于疫苗生产领域领域，具体涉及一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂及其制备方法与使用方法。
背景技术：
1、口蹄疫（foot-and-mouth disease，fmd）是由口蹄疫病毒（foot-and-mouthdisease virus，fmdv）引起的感染猪、牛、羊等偶蹄类动物的一种急性、热性、高度传染性疾病。其特征是受感染的动物口、足等部位皮肤出现水泡，可导致部分动物死亡。由于口蹄疫由7个血清型且型间不能交叉保护、感染性强、传播速度快、危害面积广，可造成巨大的经济损失和社会影响，该病被世界动物卫生组织（office international des epizooties，oie）列在15个a类动物疫病之首。在我国口蹄疫被分类为一类动物疫病。这些充分表明国内外对口蹄疫的高度关注。
2、病毒样颗粒（virus-like particles，vlps）是由病毒的一种或多种结构蛋白组成。口蹄疫病毒样颗粒是由口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，fmdv）的三种结构蛋白（vp0、vp1、vp3）组装而成的空壳结构。它是具有与天然病毒颗粒相似结构的生物纳米颗粒，其在形态和结构上与病毒粒子相同或相近，可以通过和源病毒粒子相同的感染途径呈递给免疫细胞，从而激发机体的免疫系统产生有效的细胞免疫和体液免疫应答。病毒样颗粒因内部不含有病毒感染物质核酸，故不能自主复制而具有较好的生物安全性。口蹄疫病毒样颗粒因其形态均一、生物相容性好、易功能化等优点成为了一种广泛关注的新型基因工程亚单位疫苗形式。
3、然而，病毒样颗粒的稳定性往往较弱，在生产、储存、运输和应用过程中易受温度、ph值、离子浓度和机械作用等因素的影响而发生裂解、聚集或沉淀。
4、因此，如果能提高口蹄疫病毒样颗粒的稳定性，维持其完整性，抑制其有效成分75s的降解和聚集，保证其免疫原性，延长其保存期，对我国口蹄疫病毒样颗粒疫苗的工业转化和临床应用具有极为重要的意义。
5、截至目前国内无用于口蹄疫病毒样颗粒的稳定剂。
6、因此，本文提出一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂及其制备方法与使用方法。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本发明提供了一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂及其制备方法与使用方法。本发明所述稳定剂配方简单，组分安全，且稳定效果好，具有维持口蹄疫病毒样颗粒的完整性，抑制其有效成分75s的降解和聚集，保证其免疫原性，适合口蹄疫病毒样颗粒长期保存。
2、为了达到上述技术效果，本发明第一目的是提供一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂，所述口蹄疫病毒样颗粒稳定剂由以下物质组成：tris-hcl缓冲液、有机分散剂、非还原剂糖类、氨基酸类共溶剂和蛋白类保护剂，所述的有机分散剂在稳定剂中的质量体积百分含量为15%~25%，非还原剂糖类在稳定剂中的质量体积百分含量为20%~30%，氨基酸类共溶剂在稳定剂中的质量体积百分含量为0.2%~0.5%，蛋白类保护剂在稳定剂中的质量体积百分含量为0.04%~0.08%。
3、作为优选，所述的有机分散剂设置为丙二醇，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中质量体积百分含量为20%。
4、作为优选，所述的非还原剂糖类设置为蔗糖，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中的质量体积百分含量为25%。
5、作为优选，所述的氨基酸类共溶剂设置为赖氨酸，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中的质量体积百分含量为0.3%。
6、作为优选，所述的蛋白类保护剂设置为牛血清白蛋白(bsa)，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中的质量体积百分含量为0.06%。
7、本发明第二目的是提供上述口蹄疫病毒样颗粒稳定剂的制备方法，具体包括如下步骤：
8、s1、先配制40mm tris-hcl缓冲液并用盐酸调节其ph至8.0作母液；
9、s2、然后在母液中加入有机分散剂、非还原剂糖类、氨基酸类共溶剂和蛋白类保护剂，充分混匀后用母液定容；
10、s3、经无菌滤膜过滤除菌后即得到口蹄疫病毒样颗粒稳定剂。
11、作为优选，所述s3中的滤膜采用孔径为0.22微摩尔的无菌滤膜。
12、本发明第三目的是提供上述口蹄疫病毒样颗粒稳定剂的使用方法，具体包括：
13、将口蹄疫病毒样颗粒稳定剂与含待稳定口蹄疫病毒样颗粒的液体样本按1：9混合。
14、本发明相对于现有技术而言，至少具有以下优点：
15、1、本发明提供的口蹄疫病毒样颗粒稳定剂配方简单，组分安全；
16、2、本发明提供的口蹄疫病毒样颗粒稳定剂能够维持口蹄疫病毒样颗粒的完整性，抑制其有效成分75s降解和聚集，保证其免疫原性，适合口蹄疫病毒样颗粒的长期保存；
17、3、本发明提供的口蹄疫病毒样颗粒稳定剂使用方便，直接与含待稳定口蹄疫病毒样颗粒的液体样本按1：9混匀即可。
1.一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂，其特征在于：所述口蹄疫病毒样颗粒稳定剂的组成成分包括以下物质：tris-hcl缓冲液、有机分散剂、非还原剂糖类、氨基酸类共溶剂和蛋白类保护剂，所述的有机分散剂在稳定剂中的质量体积百分含量为15%~25%，非还原剂糖类在稳定剂中的质量体积百分含量为20%~30%，氨基酸类共溶剂在稳定剂中的质量体积百分含量为0.2%~0.5%，蛋白类保护剂在稳定剂中的质量体积百分含量为0.04%~0.08%。
2.根据权利要求1所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂，其特征在于：所述的有机分散剂设置为丙二醇，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中质量体积百分含量为20%。
3.根据权利要求1所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂，其特征在于：所述的非还原剂糖类设置为蔗糖，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中的质量体积百分含量为25%。
4.根据权利要求1所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂，其特征在于：所述的氨基酸类共溶剂设置为赖氨酸，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中的质量体积百分含量为0.3%。
5.根据权利要求1所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂，其特征在于：所述的蛋白类保护剂设置为牛血清白蛋白，在其口蹄疫病毒样颗粒稳定剂中的质量体积百分含量为0.06%。
6.根据权利要求1至5任意一项所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
7.根据权利要求6所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂的制备方法，其特征在于：所述s3中的滤膜采用孔径为0.22微摩尔的无菌滤膜。
8.根据权利要求1至5任意一项所述的一种口蹄疫病毒样颗粒稳定剂的使用方法，其特征在于，具体包括如下步骤：将口蹄疫病毒样颗粒稳定剂与含待稳定口蹄疫病毒样颗粒的液体样本按1：9混合。
