本公开文本涉及含有超长cdr3的嵌合抗体，所述嵌合抗体如基于牛抗体序列或其人源化序列，其中重链的cdr3的一部分被异源序列(例如白细胞介素(il)-15或il-2的异源序列)替代；以及相关抗体。本公开文本的分子包括经il-15修饰的嵌合抗体分子，其进一步与il15rα的胞外部分如il15rαsushi结构域连接或复合。本公开文本还提供了制造和使用所述嵌合抗体的方法。
背景技术：
1、抗体是脊椎动物免疫系统响应于外来物质(抗原)而形成的天然蛋白质，主要用于防御感染。抗体含有介导与靶抗原的结合的互补决定区(cdr)。与其他脊椎动物相比，一些牛抗体具有特别长的可变重(vh)cdr3序列。这些长cdr3可以长达70个氨基酸，可以形成从抗体表面突出的独特结构域，从而允许形成独特的抗体平台。
2、白细胞介素(il)-15和il-2是刺激细胞毒性t淋巴细胞和自然杀伤(nk)细胞的增殖和细胞毒性的细胞因子，并且因此是癌症治疗的免疫治疗候选物。然而，此类细胞因子可能难以表达为稳定的可溶性蛋白质并且通常在体外和体内具有短的半衰期。仍然需要改善的细胞因子治疗剂，如il-2或il-15治疗剂，特别是用在治疗癌症。
技术实现思路
1、在一些实施方案中，本文提供了一种经修饰的嵌合抗体，所述经修饰的嵌合抗体包含重链，所述重链包含：(a)牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的经修饰的可变重(vh)区，其中所述经修饰的vh区包含经修饰的超长cdr3，其中所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3的至少一部分被细胞因子序列或其生物活性部分替代；和(b)与野生型人igg重链恒定区相比具有降低的效应子活性的经修饰的人igg重链恒定区。
2、在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分替代所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3区的杵区。
3、在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分位于所述经修饰的超长cdr3的升茎链与降茎链之间，其中与所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3的升茎链相比，所述经修饰的超长cdr3的升茎链是变体。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分经由柔性接头，任选地ggs或gsg接头，连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链和/或降茎链。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分经由柔性接头连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链和降茎链。在任何实施方案的一些中，柔性接头是ggs接头。在任何实施方案的一些中，接头是gsg接头。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分经由ggs接头连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链，并且经由gsg接头连接至所述经修饰的超长cdr3的降茎链。
4、在任何实施方案的一些中，所述升茎链包含序列cx2tvx5qetkkyqt，其中x2和x5是任何氨基酸。
5、在一些实施方案中，本文提供了一种经修饰的嵌合抗体，所述经修饰的嵌合抗体包含重链，所述重链包含牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的经修饰的可变重(vh)区，其中所述经修饰的vh区包含经修饰的超长cdr3，其中所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3区的至少一部分被异源序列替代，其中所述异源序列位于所述经修饰的超长cdr3的升茎链与降茎链之间，其中所述经修饰的超长cdr3的升茎链包含序列cx2tvx5qetkkyqt，其中x2和x5是任何氨基酸。
6、在任何实施方案的一些中，x2是ser、thr、gly、asn、ala或pro，并且x5是his、gln、arg、lys、gly、thr、tyr、phe、trp、met、ile、val或leu。在任何实施方案的一些中，x2是ser、ala或thr，并且x5是his或tyr。
7、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的超长cdr3的升茎链包含seq id no:183-185中的任一个中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的超长cdr3的升茎链的序列示于seq id no:183-185中的任一个中。
8、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的超长cdr3的升茎链包含seq id no:185中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的超长cdr3的升茎链的序列示于seqid no:185中。
9、在任何实施方案的一些中，所述异源序列替代所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3区的杵区。在任何实施方案的一些中，所述异源序列经由柔性接头，任选地ggs或gsg接头，连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链和/或降茎链。在任何实施方案的一些中，柔性接头是ggs接头。在任何实施方案的一些中，接头是gsg接头。在任何实施方案的一些中，所述异源序列经由柔性接头连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链和降茎链。在任何实施方案的一些中，柔性接头是ggs接头。在任何实施方案的一些中，接头是gsg接头。在任何实施方案的一些中，所述异源序列经由ggs接头连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链，并且经由gsg接头连接至所述经修饰的超长cdr3的降茎链。
10、在任何实施方案的一些中，所述异源序列包含细胞因子序列或其生物活性部分。
11、在任何实施方案的一些中，所述重链进一步包含人igg重链恒定区。在任何实施方案的一些中，与野生型人igg重链恒定区相比，所述人igg重链恒定区是具有降低的效应子活性的经修饰的人igg重链恒定区。
12、在任何实施方案的一些中，所述人igg是人igg1。
13、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区被修饰以减少fcr结合。在任何实施方案的一些中，所述降低的效应子活性包括降低的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)。
14、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区在以下位置中的一个或多个处改变：glu233(e233)、leu234(l234)、leu235(l235)、asp265(d265)、asp270(d270)、asn297(n297)、ser298(s298)、asn325(n325)、ala327(a327)和pro329(p329)。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区包含选自以下的一个或多个突变：leu234ala(l234a)、leu235ala(l235a)、leu235glu(l235e)、asp265asn(d265n)、asp265ala(d265a)、asp270asn(d270n)、ser298asn(s298n)、asn325glu(n325e)、ala327ser(a327s)、pro329ala(p329a)和pro239gly(p329g)。
15、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区在以下位置中的两个或更多个处改变：glu233(e233)、leu234(l234)、leu235(l235)、asp265(d265)、asp270(d270)、asn297(n297)、ser298(s298)、asn325(n325)、ala327(a327)和pro329(p329)。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区包含leu234ala和leu235ala(l234a/l235a)突变；leu234val和leu235ala(l234v/l235a)突变；leu234ala、leu235ala和asn297ala(l234a/l235a/n297a)突变；leu234ala、leu235ala和pro239ala(l234a/l235a/p329a)突变；asp265ala和pro329ala(d265a/p329a)突变；asp265ala和pro329gly(d265a/p329g)突变；leu234ala、le u235ala和asp265ala(l234a/l235a/d265a)突变；leu234ala、leu235ala和pro329gl y(l234a/l235a/p329g)突变；或leu234ala、leu235ala、asp265ala和pro329gly(l234a/l235a/d265a/p329g)突变。
16、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区包含leu234ala和leu235ala(l234a/l235a)突变。
17、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区包含seq id no:187或seq id no:188中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区包含seq id no:187中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的人igg重链恒定区包含seq id no:188中所示的序列。
18、在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含白细胞介素-15(il-15)细胞因子序列或其生物活性部分。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含展现出与seq id no:1至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的序列。
19、在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含白细胞介素-12(il-2)细胞因子序列或其生物活性部分。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含展现出与seq id no:165至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在任何实施方案的一些中，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:165中所示的氨基酸序列。
20、在任何实施方案的一些中，所述牛抗体或抗原结合片段是牛抗体blv1h12或其抗原结合片段。
21、在任何实施方案的一些中，所述降茎链包含seq id no:10中所示的序列。
22、在任何实施方案的一些中，所述升茎链包含seq id no:183中所示的序列，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的氨基酸序列，并且所述降茎链包含seq id no:10中所示的序列；所述升茎链包含seq id no:184中所示的序列，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的氨基酸序列，并且所述降茎链包含seqid no:10中所示的序列；或所述升茎链包含seq id no:185中所示的序列，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的氨基酸序列，并且所述降茎链包含seq idno:10中所示的序列。
23、在任何实施方案的一些中，所述升茎链包含seq id no:183中所示的序列，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的氨基酸序列，并且所述降茎链包含seq id no:10中所示的序列。
24、在任何实施方案的一些中，所述升茎链包含seq id no:184中所示的序列，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的氨基酸序列，并且所述降茎链包含seq id no:10中所示的序列。
25、在任何实施方案的一些中，所述升茎链包含seq id no:185中所示的序列，所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的氨基酸序列，并且所述降茎链包含seq id no:10中所示的序列。
26、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的超长cdr3包含seq id no:206-208中的任一个中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的超长cdr3包含seq id no:208中所示的序列。
27、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的vh区是blv1h12的vh区的变体。
28、在任何实施方案的一些中，所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:182中所示的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq idno:11中所示的序列；并且所述c区包含人igg重链恒定区。在一些实施方案中，所述人igg重链恒定区是如本文所述的任一种。在任何实施方案的一些中，与野生型人igg重链恒定区相比，所述人igg重链恒定区是具有降低的效应子活性的经修饰的人igg重链恒定区。在一些实施方案中，所述经修饰的人igg重链恒定区是如本文所述的任一种。
29、在任何实施方案的一些中，所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:182中所示的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq idno:11中所示的序列；并且所述c区包含所述经修饰的人igg重链恒定区。
30、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的vh区包含seq id no:200-202中的任一个中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的vh区包含seq id no:202中所示的序列。
31、在任何实施方案的一些中，所述重链包含seq id no:189-191中的任一个中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述重链包含seq id no:191中所示的序列。
32、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的vh区是blv1h12的vh区的人源化序列的变体。
33、在任何实施方案的一些中，所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:197中所示的序列或展现出与seq id no:197至少65％序列同一性的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq id no:11中所示的序列；并且所述c区包含人igg重链恒定区。在一些实施方案中，所述人igg重链恒定区是如本文所述的任一种。在任何实施方案的一些中，与野生型人igg重链恒定区相比，所述人igg重链恒定区是具有降低的效应子活性的经修饰的人igg重链恒定区。在一些实施方案中，所述经修饰的人igg重链恒定区是如本文所述的任一种。在一些实施方案中，v1区具有与seq id no:197中所示的序列至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的序列同一性。
34、在任何实施方案的一些中，所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:197中所示的序列或展现出与seq id no:197至少65％序列同一性的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq id no:11中所示的序列；并且所述c区包含所述经修饰的人igg重链恒定区。在一些实施方案中，v1区具有与seq id no:197中所示的序列至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的序列同一性。
35、在任何实施方案的一些中，所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:197中所示的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq idno:11中所示的序列；并且所述c区包含人igg重链恒定区。在一些实施方案中，所述人igg重链恒定区是如本文所述的任一种。在任何实施方案的一些中，与野生型人igg重链恒定区相比，所述人igg重链恒定区是具有降低的效应子活性的经修饰的人igg重链恒定区。在一些实施方案中，所述经修饰的人igg重链恒定区是如本文所述的任一种。
36、在任何实施方案的一些中，所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:197中所示的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq idno:11中所示的序列；并且所述c区包含所述经修饰的人igg重链恒定区。
37、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的vh区包含seq id no:203-205中的任一个中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的vh区包含seq id no:205中所示的序列。
38、在任何实施方案的一些中，所述重链包含seq id no:192-194中的任一个中所示的序列。在任何实施方案的一些中，所述重链包含seq id no:205中所示的序列。
39、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的嵌合抗体进一步包含轻链。在任何实施方案的一些中，所述经修饰的嵌合抗体包含人源化轻链。在任何实施方案的一些中，所述人源化轻链包含seq id no:181中所示的序列或展现出与seq id no:181至少85％序列同一性的序列。在任何实施方案的一些中，所述人源化轻链包含seq id no:181中所示的序列。在一些实施方案中，所述人源化轻链具有与seq id no:181中所示的序列至少90％、至少95％或至少95％的序列同一性。
40、在任何实施方案的一些中，所述抗体是全长或完整抗体。
41、在本文任何实施方案的一些中，所述抗体是抗原结合片段。在另外的实施方案中，所述抗原结合片段是fab、fab′-sh、fv、scfv或(fab′)2片段。在一些实施方案中，所述抗体是fab。
42、在任何实施方案的一些中，所述经修饰的嵌合抗体与包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域复合。在任何实施方案的一些中，包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域与所述il-15序列非共价缔合。在任何实施方案的一些中，包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域连接至所述经修饰的嵌合抗体的轻链，任选地经由肽接头连接。在任何实施方案的一些中，包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域经由肽接头连接至所述经修饰的嵌合抗体的轻链。在任何实施方案的一些中，包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域包含seq id no:2中所示的序列。
43、在一些实施方案中，本文提供了编码任何实施方案的经修饰的嵌合抗体的多核苷酸。
44、在一些实施方案中，本文提供了编码任何实施方案的经修饰的嵌合抗体的重链或其可变区的多核苷酸。
45、在一些实施方案中，本文提供了编码任何实施方案的经修饰的嵌合抗体的轻链或其可变区的多核苷酸。
46、在一些实施方案中，本文提供了包含任何实施方案的多核苷酸的表达载体。
47、在一些实施方案中，本文提供了包含任何实施方案的多核苷酸或表达载体的宿主细胞。
48、在任何实施方案的一些中，所述宿主细胞进一步包含编码包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域的多核苷酸或载体。在任何实施方案的一些中，包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域包含seq id no:2中所示的序列。
49、在一些实施方案中，本文提供了一种产生经修饰的嵌合抗体的方法，所述方法包括在由所述宿主细胞表达所述经修饰的嵌合抗体的条件下培养任何实施方案的宿主细胞，任选地进一步包括回收或纯化所述经修饰的嵌合抗体。在一些实施方案中，所述条件用于由宿主细胞表达经修饰的嵌合抗体、经修饰的嵌合抗体的重链或其可变区、或经修饰的嵌合抗体的轻链或其可变区。
50、在任何实施方案的一些中，所述方法进一步包括回收或纯化经修饰的嵌合抗体、重链或其可变区、或轻链或其可变区。
51、在任何实施方案的一些中，所述方法进一步包括回收或纯化经修饰的嵌合抗体。
52、在一些实施方案中，本文提供了通过任何实施方案的方法产生的经修饰的嵌合抗体。
53、在一些实施方案中，本文提供了通过任何实施方案的方法产生的包含重链或其可变区或轻链或其可变区的经修饰的嵌合抗体。
54、在一些实施方案中，本文提供了包含任何实施方案的经修饰的嵌合抗体的药物组合物。
55、在一些实施方案中，本文提供了一种刺激免疫细胞的方法，所述方法包括使免疫细胞群与任何实施方案的经修饰的嵌合抗体接触，由此刺激所述免疫细胞群的细胞。
56、在一些实施方案中，本文提供了一种扩增免疫细胞的方法，所述方法包括使免疫细胞群与任何实施方案的经修饰的嵌合抗体接触，由此促进所述免疫细胞群的细胞的增殖。
57、在任何实施方案的一些中，所述免疫细胞群包含表达il2/15rβ和/或il2/15rβγc受体亚基的细胞。在任何实施方案的一些中，所述免疫细胞群包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。
58、在任何实施方案的一些中，所述免疫细胞群包含t细胞或自然杀伤(nk)细胞。在任何实施方案的一些中，所述免疫细胞群包含t细胞。在任何实施方案的一些中，所述免疫细胞群包含nk细胞。
59、在任何实施方案的一些中，所述方法是离体或体外进行的。在任何实施方案的一些中，所述方法是在向受试者施用所述经修饰的嵌合抗体后在体内进行的。
60、在一些实施方案中，本文提供了一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的任何实施方案的经修饰的嵌合抗体。
61、在一些实施方案中，本文提供了一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向受试者施用任何实施方案的药物组合物。
62、在任何实施方案的一些中，所述方法进一步包括向受试者施用抗肿瘤剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括单克隆抗体。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括检查点抑制剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括细胞疗法，任选地t细胞疗法或nk细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法是t细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法是nk细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法包含表达嵌合抗原受体(car)的细胞。
63、在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂是用于治疗所述癌症的药剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂针对与所述癌症相关的抗原。
64、在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。
65、在一些实施方案中，本文提供了任何所提供的经修饰的嵌合抗体在制造用于治疗受试者的癌症的药剂中的用途。
66、在一些实施方案中，本文提供了包含任何所提供的经修饰的嵌合抗体的药物组合物在治疗受试者的癌症的方法中的用途。
67、在任何实施方案的一些中，将抗肿瘤剂与所述药物组合物组合施用于所述受试者。
68、在一些实施方案中，本文提供了抗肿瘤剂和包含任何所提供的经修饰的嵌合抗体的药物组合物在治疗受试者的癌症的方法中的用途。
69、在一些实施方案中，本文提供了抗肿瘤剂在治疗受试者的癌症的方法中的用途，其中将抗肿瘤剂与包含任何所提供的经修饰的嵌合抗体的药物组合物组合施用。
70、在任何实施方案的一些中，所述方法包括向所述受试者施用所述药物组合物。
71、在任何实施方案的一些中，所述方法包括向所述受试者施用所述抗肿瘤剂。
72、在任何实施方案的一些中，将所述药物组合物和所述抗肿瘤剂单独地施用于受试者。
73、在任何实施方案的一些中，所述方法是如本文所述的任一种。
74、在一些实施方案中，本文提供了任何所提供的经修饰的嵌合抗体和抗肿瘤剂的组合在制造用于治疗受试者的癌症的药剂中的用途。
75、在一些实施方案中，本文提供了抗肿瘤剂在制造用于治疗受试者的癌症的药剂中的用途，其中将抗肿瘤剂与包含任何所提供的经修饰的嵌合抗体的药物组合物组合施用。
76、在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂是用于治疗所述癌症的药剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂针对与所述癌症相关的抗原。
77、在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括单克隆抗体。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括检查点抑制剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法是t细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法是nk细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法包含表达嵌合抗原受体(car)的细胞。
78、在一些实施方案中，本文提供了用于在治疗受试者的癌症的方法中使用的药物组合物，所述药物组合物包含任何所提供的经修饰的嵌合抗体。
79、在任何实施方案的一些中，将抗肿瘤剂与所述药物组合物组合施用于所述受试者。
80、在一些实施方案中，本文提供了用于在治疗受试者的癌症的方法中使用的组合疗法，所述组合疗法包含含有任何所提供的经修饰的嵌合抗体的药物组合物和抗肿瘤剂。
81、在一些实施方案中，本文提供了用于在治疗受试者的癌症的方法中使用的抗肿瘤剂，其中将抗肿瘤剂与任何所提供的经修饰的嵌合抗体组合施用。
82、在任何实施方案的一些中，所述方法包括向所述受试者施用所述药物组合物。
83、在任何实施方案的一些中，所述方法包括向所述受试者施用所述抗肿瘤剂。
84、在任何实施方案的一些中，将所述药物组合物和所述抗肿瘤剂单独地施用于受试者。
85、在任何实施方案的一些中，所述方法是如本文所述的任一种。
86、在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂是用于治疗所述癌症的药剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂针对与所述癌症相关的抗原。
87、在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括单克隆抗体。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括检查点抑制剂。在任何实施方案的一些中，所述抗肿瘤剂包括细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法是t细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法是nk细胞疗法。在任何实施方案的一些中，所述细胞疗法包含表达嵌合抗原受体(car)的细胞。
1.一种经修饰的嵌合抗体，所述经修饰的嵌合抗体包含含有以下的重链：
2.根据权利要求1所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分替代所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3区的杵区。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分位于所述经修饰的超长cdr3的升茎链与降茎链之间，其中与所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3的升茎链相比，所述经修饰的超长cdr3的升茎链是变体。
4.根据权利要求3所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分经由柔性接头，任选地ggs或gsg接头，连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链和/或降茎链。
5.根据权利要求3或权利要求4所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述升茎链包含序列cx2tvx5qetkkyqt，其中x2和x5是任何氨基酸。
6.一种经修饰的嵌合抗体，所述经修饰的嵌合抗体包含重链，所述重链包含牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的经修饰的可变重(vh)区，其中所述经修饰的vh区包含经修饰的超长cdr3，其中所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3区的至少一部分被异源序列替代，其中所述异源序列位于所述经修饰的超长cdr3的升茎链与降茎链之间，其中所述经修饰的超长cdr3的升茎链包含序列cx2tvx5qetkkyqt，其中x2和x5是任何氨基酸。
7.根据权利要求5或权利要求6所述的经修饰的嵌合抗体，其中x2是ser、thr、gly、asn、ala或pro，并且x5是his、gln、arg、lys、gly、thr、tyr、phe、trp、met、ile、val或leu。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中x2是ser、ala或thr，并且x5是his或tyr。
9.根据权利要求3-8中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的超长cdr3的升茎链包含seq id no:183-185中的任一个中所示的序列。
10.根据权利要求3-9中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的超长cdr3的升茎链的序列示于seq id no:183-185中的任一个中。
11.根据权利要求6-10中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述异源序列替代所述牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的超长cdr3区的杵区。
12.根据权利要求6-11中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述异源序列经由柔性接头，任选地ggs或gsg接头，连接至所述经修饰的超长cdr3的升茎链和/或降茎链。
13.根据权利要求6-12中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述异源序列包含细胞因子序列或其生物活性部分。
14.根据权利要求6-13中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述重链进一步包含人igg重链恒定区。
15.根据权利要求14所述的经修饰的嵌合抗体，其中与野生型人igg重链恒定区相比，所述人igg重链恒定区是具有降低的效应子活性的经修饰的人igg重链恒定区。
16.根据权利要求1-5、7-10、14和15中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述人igg是人igg1。
17.根据权利要求1-5、7-10、15和16中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区被修饰以减少fcr结合。
18.根据权利要求1-5、7-10和15-17中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述降低的效应子活性包括降低的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)。
19.根据权利要求1-5、7-10和15-18中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区在以下位置中的一个或多个处改变：glu233(e233)、leu234(l234)、leu235(l235)、asp265(d265)、asp270(d270)、asn297(n297)、ser298(s298)、asn325(n325)、ala327(a327)和pro329(p329)。
20.根据权利要求1-5、7-10和15-19中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区包含选自以下的一个或多个突变：leu234ala(l234a)、leu235ala(l235a)、leu235glu(l235e)、asp265asn(d265n)、asp265ala(d265a)、asp270asn(d270n)、ser298asn(s298n)、asn325glu(n325e)、ala327ser(a327s)、pro329ala(p329a)和pro239gly(p329g)。
21.根据权利要求1-5、7-10和15-20中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区在以下位置中的两个或更多个处改变：glu233(e233)、leu234(l234)、leu235(l235)、asp265(d265)、asp270(d270)、asn297(n297)、ser298(s298)、asn325(n325)、ala327(a327)和pro329(p329)。
22.根据权利要求1-5、7-10和15-21中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区包含leu234ala和leu235ala(l234a/l235a)突变；leu234val和leu235ala(l234v/l235a)突变；leu234ala、leu235ala和asn297ala(l234a/l235a/n297a)突变；leu234ala、leu235ala和pro239ala(l234a/l235a/p329a)突变；as p265ala和pro329ala(d265a/p329a)突变；asp265ala和pro329gly(d265a/p329g)突变；leu234ala、leu235ala和asp265ala(l234a/l235a/d265a)突变；leu234ala、le u235ala和pro329gly(l234a/l235a/p329g)突变；或leu234ala、leu235ala、asp265ala和pro329gly(l234a/l235a/d265a/p329g)突变。
23.根据权利要求1-5、7-10和15-22中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区包含leu234ala和leu235ala(l234a/l235a)突变。
24.根据权利要求1-5、7-10和15-23所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的人igg重链恒定区包含seq id no:187或seq id no:188中所示的序列。
25.根据权利要求1-5、7-10和13-24中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分包含白细胞介素-15(il-15)细胞因子序列或其生物活性部分。
26.根据权利要求1-5、7-10和13-25中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分包含展现出与seq id no:1至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
27.根据权利要求1-5、7-10和13-26中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:1中所示的序列。
28.根据权利要求1-5、7-10和13-24中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分包含白细胞介素-12(il-2)细胞因子序列或其生物活性部分。
29.根据权利要求1-5、7-10、13-24和28中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分包含展现出与seq id no:165至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
30.根据权利要求1-5、7-10、13-24、28和29中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述细胞因子序列或其生物活性部分包含seq id no:165中所示的氨基酸序列。
31.根据权利要求1-30中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述牛抗体或抗原结合片段是牛抗体blv1h12或其抗原结合片段。
32.根据权利要求3-31中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述降茎链包含seqid no:10中所示的序列。
33.根据权利要求3-5、7-10、13-27、31和32中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中：
34.根据权利要求1-27和31-33中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的超长cdr3包含seq id no:206-208中的任一个中所示的序列。
35.根据权利要求1-34中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的vh区是blv1h12的vh区的变体。
36.根据权利要求1-5、7-10和15-35中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:182中所示的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq id no:11中所示的序列；并且所述c区包含所述经修饰的人igg重链恒定区。
37.根据权利要求1-27和31-36中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的vh区包含seq id no:200-202中的任一个中所示的序列。
38.根据权利要求1-27和31-37中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述重链包含seq id no:189-191中的任一个中所示的序列。
39.根据权利要求1-34中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的vh区是blv1h12的vh区的人源化序列的变体。
40.根据权利要求1-5、7-10、15-34和39中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:197中所示的序列或展现出与seq id no:197至少65％序列同一性的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq id no:11中所示的序列；并且所述c区包含所述经修饰的人igg重链恒定区。
41.根据权利要求1-5、7-10、15-34、39和40中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述重链包含式v1-x-v2-c，其中所述重链的v1区包含seq id no:197中所示的序列；所述x区包含所述经修饰的超长cdr3；所述v2区包含seq id no:11中所示的序列；并且所述c区包含所述经修饰的人igg重链恒定区。
42.根据权利要求1-27、31-34和39-41中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的vh区包含seq id no:203-205中的任一个中所示的序列。
43.根据权利要求1-27、31-34和39-42中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述重链包含seq id no:192-194中的任一个中所示的序列。
44.根据权利要求1-43中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其进一步包含轻链。
45.根据权利要求1-44中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的嵌合抗体包含人源化轻链。
46.根据权利要求45所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述人源化轻链包含seq id no:181中所示的序列或展现出与seq id no:181至少85％序列同一性的序列。
47.根据权利要求45或权利要求46所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述人源化轻链包含seq id no:181中所示的序列。
48.根据权利要求1-27和31-47中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中所述经修饰的嵌合抗体与包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域复合。
49.根据权利要求48所述的经修饰的嵌合抗体，其中包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域与所述il-15序列非共价缔合。
50.根据权利要求48所述的经修饰的嵌合抗体，其中包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域连接至所述经修饰的嵌合抗体的轻链，任选地经由肽接头连接。
51.根据权利要求48-50中任一项所述的经修饰的嵌合抗体，其中包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域包含seq id no:2中所示的序列。
52.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码根据权利要求1-51中任一项所述的经修饰的嵌合抗体。
53.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码根据权利要求1-51中任一项所述的经修饰的嵌合抗体的重链或其可变区。
54.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码根据权利要求1-51中任一项所述的经修饰的嵌合抗体的轻链或其可变区。
55.一种表达载体，所述表达载体包含根据权利要求52-54中任一项所述的多核苷酸。
56.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求52-54中任一项所述的多核苷酸或根据权利要求55所述的表达载体。
57.根据权利要求56所述的宿主细胞，所述宿主细胞进一步包含编码包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域的多核苷酸或载体。
58.根据权利要求57所述的宿主细胞，其中包含所述il15rαsushi结构域的所述il15rα的胞外结构域包含seq id no:2中所示的序列。
59.一种产生经修饰的嵌合抗体的方法，所述方法包括在由所述宿主细胞表达所述经修饰的嵌合抗体、所述经修饰的嵌合抗体的重链或其可变区、或所述经修饰的嵌合抗体的轻链或其可变区的条件下，培养根据权利要求56-58中任一项所述的宿主细胞。
60.根据权利要求59所述的方法，所述方法进一步包括回收或纯化所述经修饰的嵌合抗体、所述重链或其可变区、或所述轻链或其可变区。
61.一种通过根据权利要求59或权利要求60所述的方法产生的经修饰的嵌合抗体，或通过根据权利要求59或权利要求60所述的方法产生的包含所述重链或其可变区或所述轻链或其可变区的经修饰的嵌合抗体。
62.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体。
63.一种刺激免疫细胞的方法，所述方法包括使免疫细胞群与根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体接触，由此刺激所述免疫细胞群的细胞。
64.一种扩增免疫细胞的方法，所述方法包括使免疫细胞群与根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体接触，由此促进所述免疫细胞群的细胞的增殖。
65.根据权利要求63或权利要求64所述的方法，其中所述免疫细胞群包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。
66.根据权利要求63-65中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞群包含t细胞。
67.根据权利要求63-66中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞群包含自然杀伤(nk)细胞。
68.根据权利要求63-67中任一项所述的方法，其中所述方法是离体或体外进行的。
69.根据权利要求63-67中任一项所述的方法，其中所述方法是在向受试者施用所述经修饰的嵌合抗体后在体内进行的。
70.一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体。
71.一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向受试者施用根据权利要求62所述的药物组合物。
72.根据权利要求69-71中任一项所述的方法，所述方法进一步包括向所述受试者施用抗肿瘤剂。
73.根据权利要求72所述的方法，其中所述抗肿瘤剂是用于治疗所述癌症的药剂。
74.根据权利要求72或权利要求73所述的方法，其中所述抗肿瘤剂针对与所述癌症相关的抗原。
75.根据权利要求72-74中任一项所述的方法，其中所述抗肿瘤剂包括单克隆抗体。
76.根据权利要求72-75中任一项所述的方法，其中所述抗肿瘤剂包括检查点抑制剂。
77.根据权利要求72-76中任一项所述的方法，其中所述抗肿瘤剂包括细胞疗法。
78.根据权利要求77所述的方法，其中所述细胞疗法是t细胞疗法。
79.根据权利要求77所述的方法，其中所述细胞疗法是nk细胞疗法。
80.根据权利要求77-79中任一项所述的方法，其中所述细胞疗法包含表达(i)嵌合抗原受体(car)和/或(ii)il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。
81.根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体在制造用于治疗受试者的癌症的药剂中的用途。
82.一种包含根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体的药物组合物在治疗受试者的癌症的方法中的用途。
83.根据权利要求81或权利要求82所述的用途，其中将抗肿瘤剂与所述药物组合物组合施用于所述受试者。
84.抗肿瘤剂和包含根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体的药物组合物在治疗受试者的癌症的方法中的用途。
85.根据权利要求82-84中任一项所述的用途，其中所述方法包括向所述受试者施用所述药物组合物。
86.根据权利要求83-85中任一项所述的用途，其中所述方法包括向所述受试者施用所述抗肿瘤剂。
87.根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体和抗肿瘤剂的组合在制造用于治疗受试者的癌症的药剂中的用途。
88.根据权利要求83-87中任一项所述的用途，其中所述抗肿瘤剂是用于治疗所述癌症的药剂。
89.根据权利要求83-88中任一项所述的用途，其中所述抗肿瘤剂针对与所述癌症相关的抗原。
90.根据权利要求83-89中任一项所述的用途，其中所述抗肿瘤剂包括单克隆抗体。
91.根据权利要求83-90中任一项所述的用途，其中所述抗肿瘤剂包括检查点抑制剂。
92.根据权利要求83-91中任一项所述的用途，其中所述抗肿瘤剂包括细胞疗法。
93.根据权利要求92所述的用途，其中所述细胞疗法包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。
94.根据权利要求92或权利要求93所述的用途，其中所述细胞疗法是t细胞疗法。
95.根据权利要求92或权利要求93所述的用途，其中所述细胞疗法是nk细胞疗法。
96.根据权利要求92-95中任一项所述的用途，其中所述细胞疗法包含表达嵌合抗原受体(car)的细胞。
97.一种用于在治疗受试者的癌症的方法中使用的药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体。
98.根据权利要求97所述的药物组合物，其中将抗肿瘤剂与所述药物组合物组合施用于所述受试者。
99.一种用于在治疗受试者的癌症的方法中使用的组合疗法，所述组合疗法包含含有根据权利要求1-51和61中任一项所述的经修饰的嵌合抗体的药物组合物和抗肿瘤剂。
100.根据权利要求97或权利要求98所述的药物组合物，或根据权利要求99所述的组合疗法，其中所述方法包括向所述受试者施用所述药物组合物。
101.根据权利要求98或权利要求100所述的药物组合物，或根据权利要求99或权利要求100所述的组合疗法，其中所述方法包括向所述受试者施用所述抗肿瘤剂。
102.根据权利要求98、100和101中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求99-101中任一项所述的组合疗法，其中所述抗肿瘤剂是用于治疗所述癌症的药剂。
103.根据权利要求98和100-102中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求99-102中任一项所述的组合疗法，其中所述抗肿瘤剂针对与所述癌症相关的抗原。
104.根据权利要求98和100-103中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求99-103中任一项所述的组合疗法，其中所述抗肿瘤剂包括单克隆抗体。
105.根据权利要求98和100-104中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求99-104中任一项所述的组合疗法，其中所述抗肿瘤剂包括检查点抑制剂。
106.根据权利要求98和100-105中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求99-105中任一项所述的组合疗法，其中所述抗肿瘤剂包括细胞疗法。
107.根据权利要求106所述的药物组合物，或根据权利要求106所述的组合疗法，其中所述细胞疗法包含表达il2/15rβ和il2/15rβγc受体亚基的细胞。
108.根据权利要求106或权利要求107所述的药物组合物，或根据权利要求106或权利要求107所述的组合疗法，其中所述细胞疗法是t细胞疗法。
109.根据权利要求106或权利要求107所述的药物组合物，或根据权利要求106或权利要求107所述的组合疗法，其中所述细胞疗法是nk细胞疗法。
110.根据权利要求106-109中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求106-109中任一项所述的组合疗法，其中所述细胞疗法包含表达嵌合抗原受体(car)的细胞。
