本发明涉及显色液的,具体为一种超敏tmb显色液。
背景技术:
1、tmb为白色结晶粉末,难溶于水,易溶于二甲亚砜、二甲基甲酰胺、甲醇等有机溶剂。tmb显色液常用于elisa实验,作为一种新型安全的色原试剂,tmb已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验、法医检验及环境监测等领域,尤其是在临床生化检验方面,tmb作为过氧化酶的新底物,在elisa中获得了广泛的应用。通常大部分tmb显色液是有a液、b液两种组分构成,其中a液是含有机溶剂的tmb浓缩液,b液是含有过氧化化氢等氧化剂溶液。在使用时,需要a液、b液按照一定比例混合。
2、目前,市场上也有一些单组分的tmb显色液,但普遍显色活性较双组份低,且含有有机溶剂等有害成分,具体包括以下缺点:
3、1)以双组分(a/b液)的形式提供的tmb显色液,混合后的水溶液不稳定,需要现配现用。使用起来相对不便,容易导致检测结果误差;
4、2)单组分tmb显色液,显色强度有限,灵敏性不强,显色效率相对较低。
5、3)无论是常规双组分tmb显色液还是单组分tmb显色液,已知的均含有机溶剂,容易对人体造成危害,对环境造成污染。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种超敏tmb显色液,以解决上述背景技术中提出的问题。
2、为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种超敏tmb显色液,该超敏tmb显色液的组分以及组分浓度百分比:3,3’,5,5’-四甲基联苯胺0.02%-0.05%、柠檬酸0.2%-1.2%、肌醇六磷酸钠0.0003-0.003%、聚乙烯醇0.02%-0.2%、具有分子量为200的聚乙二醇0.5%-10%、过氧化氢0.003%-0.03%、procidetm 300防腐剂0.001%-0.1%、吐温20表面活性剂0.002%-0.02%。
3、还包括4-(4-吡啶基)吗啉0.01-0.2%、4-二甲氨基吡啶0.01-0.2%,作为增强剂可增强tmb显色液的od值。
4、优选的,所述聚乙烯醇的醇解度为70-90%,聚乙烯醇的黏度小于10mpa.s。
5、优选的,所述吐温20表面活性剂的ph值为3.7±0.5。
6、优选的,该超敏tmb显色液的制备的具体方法包括以下步骤:
7、s1:溶解试剂:将0.1-0.18g肌醇六磷酸钠、8-10g柠檬酸、0.24-0.56gtmb和100mlpeg200加入纯化水中,搅拌均匀直至完全溶解;
8、s2:添加增稳剂:向混合溶液中加入0.1-0.5%的聚乙烯醇,使其完全溶解;
9、s3:添加其他成分:在混合溶液中加入0.002-0.006ml吐温20、2-4ml3%过氧化氢和0.02-0.06ml procidetm 300防腐剂。
10、s4:调节ph值:使用酸性或碱性溶液调节混合物的ph值至3.7。
11、s5:定容:最后用纯化水将溶液定容至1000ml。
12、与现有技术相比,本发明的有益效果是:
13、本发明提供一种超敏tmb显色液的制备方法,该显色液较市售进口同类产品信号值更高,储存稳定性好,在本发明的高敏tmb显色液中添加增强剂4-(4-吡啶基)吗啉0.01-0.2%、4-二甲氨基吡啶0.01-0.2%,可进一步提高显色结果的od值,可达到超敏型tmb显色液的活性。
1.一种超敏tmb显色液,其特征在于:该超敏tmb显色液的组分以及组分浓度百分比:3,3’,5,5’-四甲基联苯胺0.02%-0.05%、柠檬酸0.2%-1.2%、肌醇六磷酸钠0.0003-0.003%、聚乙烯醇0.02%-0.2%、具有分子量为200的聚乙二醇0.5%-10%、过氧化氢0.003%-0.03%、procidetm 300防腐剂0.001%-0.1%、吐温20表面活性剂0.002%-0.02%;
2.根据权利要求1所述的一种超敏tmb显色液,其特征在于:所述聚乙烯醇的醇解度为70-90%,聚乙烯醇的黏度小于10mpa.s。
3.根据权利要求1所述的一种超敏tmb显色液,其特征在于:所述吐温20表面活性剂的ph值为3.7±0.5。
4.根据权利要求1所述的一种超敏tmb显色液,其特征在于:该超敏tmb显色液的制备的具体方法包括以下步骤:
