本发明涉及生物工程，特别涉及一种重组ⅵ型胶原蛋白及其制备方法、应用。
背景技术：
1、胶原蛋白是一种生物高分子蛋白，是动物结缔组织中的主要成分，也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，占蛋白质总量的25-30％。胶原蛋白与组织的形成、成熟、细胞间信息的传递以及关节润滑、伤口愈合、钙化作用、血液凝固和衰老等有着密切的关系，是生物科技产业最关键的原材料之一，在医学材料、化妆品、视频工业中均有广泛应用。
2、目前工业化使用的胶原蛋白主要是通过酸、碱或者酶法提取动物的皮肤或骨骼中的胶原蛋白，其主要来源为动物结缔组织，但从动物组织中提取的胶原蛋白在动物源疾病等风险，同时大规模的制备会造成动物的需求量过大，对供给侧的动物饲养造成巨大压力。随着基因工程技术的大规模应用，基因工程重组表达胶原利用模式化表达宿主以外源蛋白表达的形式成功地解决了胶原蛋白大规模制备的瓶颈。
3、目前，研究较多的重组人胶原蛋白通常以ⅰ、ⅱ、ⅲ型为主，而对重组ⅵ型胶原蛋白的研究较少。
技术实现思路
1、本发明解决的技术问题在于如何提供一种重组ⅵ型胶原蛋白，能够在创面修复中促进纤维细胞的粘附、增殖，并促进胶原分泌，从而在创面愈合中发挥重要的作用。
2、为解决上述问题，本发明提供了一种重组ⅵ型胶原蛋白，所述重组ⅵ型胶原蛋白的氨基酸序列如i或ii所示：
3、i、氨基酸序列如seq id no.1所示；
4、ii、在i中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有人胶原蛋白活性的由i衍生的蛋白质。
5、优选地，所述重组ⅵ型胶原蛋白还包括纯化标签。
6、优选地，所述纯化标签为his标签、flag标签或c-myc标签。
7、本发明提供的重组ⅵ型胶原蛋白是从人源ⅵ型重组胶原蛋白中进行筛选得到的，相对于全长序列的人源ⅵ型重组胶原蛋白，本发明提供的重组ⅵ型胶原蛋白更加适于分离和纯化，且具有良好的诱导成纤维细胞增殖和促胶原蛋白分泌的功效，适于进行大规模产业化的生产和应用。
8、本发明还提供了一种用于编码如上所述的重组ⅵ型胶原蛋白的核酸分子。
9、本发明还提供了一种重组表达载体，包括如上所述的核酸分子。
10、本发明还提供了一种宿主细胞，包括如上所述的核酸分子或如上所述的重组表达载体。
11、本发明提供的核酸分子、重组表达载体、宿主细胞相对于现有技术的有益效果，与上述重组ⅵ型胶原蛋白基本一致，在此不再赘述。
12、本发明还提供了一种重组ⅵ型胶原蛋白的制备方法，用于制备如上所述的重组ⅵ型胶原蛋白，包括以下步骤：
13、步骤s1、根据如上所述的重组ⅵ型胶原蛋白的氨基酸序列，获取核酸分子；
14、步骤s2、采用所述核酸分子构建重组表达载体；
15、步骤s3、将所述重组表达载体转入目标细胞中，筛选阳性转化子，得到宿主细胞；
16、步骤s4、培养所述宿主细胞，使所述宿主细胞表达目标蛋白；
17、步骤s5、对所述目标蛋白进行分离纯化，得到所述重组ⅵ型胶原蛋白。
18、本发明提供的重组ⅵ型胶原蛋白的制备方法能够高效地得到上述重组ⅵ型胶原蛋白，适于大规模生产，为重组ⅵ型胶原蛋白的应用提供了有效的制备方法。
19、本发明还提供了如上所述的重组ⅵ型胶原蛋白在制备创面愈合剂中的应用。
20、优选地，所述重组ⅵ型胶原蛋白用作诱导成纤维细胞增殖剂。
21、优选地，所述重组ⅵ型胶原蛋白用作促胶原分泌剂
22、本发明提供的应用相对于现有技术的有益效果，与上述重组ⅵ型胶原蛋白基本一致，在此不再赘述。
1.一种重组ⅵ型胶原蛋白，其特征在于，所述重组ⅵ型胶原蛋白的氨基酸序列如i或ii所示：
2.根据权利要求1所述的重组ⅵ型胶原蛋白，其特征在于，所述重组ⅵ型胶原蛋白还包括纯化标签。
3.根据权利要求2所述的重组ⅵ型胶原蛋白，其特征在于，所述纯化标签为his标签、flag标签或c-myc标签。
4.一种用于编码如权利要求1-3任一项所述的重组ⅵ型胶原蛋白的核酸分子。
5.一种重组表达载体，其特征在于，包括如权利要求4所述的核酸分子。
6.一种宿主细胞，其特征在于，包括如权利要求4所述的核酸分子或如权利要求5所述的重组表达载体。
7.一种重组ⅵ型胶原蛋白的制备方法，用于制备如权利要求1-3任一项所述的重组ⅵ型胶原蛋白，其特征在于，包括以下步骤：
8.如权利要求1-3任一项所述的重组ⅵ型胶原蛋白在制备创面愈合剂中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述重组ⅵ型胶原蛋白用作诱导成纤维细胞增殖剂。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述重组ⅵ型胶原蛋白用作促胶原分泌剂。
