本发明涉及医药卫生，尤其涉及一种抗hpv感染的无患子肽溶液及其制备方法。
背景技术：
1、hpv病毒即人乳头瘤病毒是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒a属，是球形dna病毒，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。表现为寻常疣、生殖器疣即尖锐湿疣等症状。随着性病中尖锐湿疣的发病率急速上升和宫颈癌、肛门癌等的增多，人乳头瘤病毒感染越来越引起人们的关注。
2、目前，治疗hpv临床症状的治疗方法主要包括疫苗治疗、物理治疗、药物疗法和免疫疗法。疫苗治疗具有一定局限性，不能达到广谱预防效果，且疫苗供应有限，接种成本较高，无法满足民众接种需求；物理疗法主要针对病毒所导致肿瘤，并非从源头消灭病毒的存在；免疫疗法价格昂贵、稳定性差、治疗程序复杂。药物疗法仍然是目前治疗hpv最为方便有效的方法，但现有的针对该病毒的特效药有限，且副作用大。
3、我国拥有丰富的中药资源，而且传承几千年，有庞大的应用数据库，社会认知度及信赖度均较高。中药含有多种活性成分，药理作用广泛，可从多层面、多靶点发挥作用，副作用小，在开发治疗hpv新药物上具有广阔的前景。
4、无患子，别称木患子，具有很强的药用价值，其果皮、种子、果仁、根、皮、叶都可以用作医药原料，现代药理学研究证明，无患子还具有抗菌、抗肿瘤、抗压、抗病毒、心肝保护、免疫调节等药理作用。同时，无患子含天然表面活性物质，该表面活性物质中含有萜类甾体皂甙、氨基酸、蛋白质、维生素、油酸、油脂等多种对人体有益的物质。然而，目前主要利用其果皮部分，用于提取无患子皂苷，其果核被大量丢弃，造成资源浪费，且对自然和社会环境造成一定破坏。
5、目前市场上的肽产品主要有动物源肽产品和植物源肽产品，在众多的植物性原料中，还没有对无患子肽进行开发和提取，对无患子的研究主要集中在精油和皂苷的提取，而且其它大多数肽都带有苦味和腥味，十分不利于产品化。同时，在肽的提取与制备方面，现有的技术存在酶解过程中酶解效果不好，或是酶解工艺复杂，成本较高，不利于工业化生产等问题存在。
6、鉴于此，本发明利用研究尚少的无患子果核种仁，提供一种无患子肽溶液，该溶液可用于抗hpv感染，加入辅料后制成临床上或药学上可接受的剂型，如洗剂、凝胶或栓剂。
技术实现思路
1、本发明目的是为了克服现有技术的不足而提供一种抗hpv感染效果佳，抑菌效果好，毒副作用低，制备工艺简单的抗hpv感染的无患子肽溶液及其制备方法。
2、为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，包括如下步骤：
3、步骤s1、无患子粕匀浆的制备：取无患子粕，加入纯化水中，经高速组织捣碎匀浆机处理10～15min，得无患子粕匀浆；
4、步骤s2、酶解：将经过步骤s1制成的无患子粕匀浆装入酶解罐中，在88-92℃下搅拌10～15min后，冷却至45～55℃，在该温度下，利用0.8～1.2mol/l的naoh溶液调节ph至9～10，再向其中加入碱性蛋白酶进行酶解；酶解过程加入naoh溶液保持ph相对稳定；酶解结束后，加热进行灭酶，冷却导出离心，取上清液，得到酶解液；
5、步骤s3、超滤、纳滤：将经过步骤s2制成的酶解液依次进行活性炭纤维膜超滤、卷式膜纳滤，所得滤液用1mol/l的盐酸调节ph至4.0～4.5，最后经离子交换树脂脱去盐分nacl得到无患子肽液。
6、步骤s4、将无患子肽液与其它组分混合均匀后，得到抗hpv感染的无患子肽溶液。
7、优选的，步骤s1中所述无患子粕、纯化水的质量比为30～40倍。
8、优选的，步骤s1中所述无患子粕的来源无特殊要求，可以为无患子种仁压榨出油后的工业副产物无患子粕，也可以为无患子种仁脱脂得到。
9、优选的，步骤s1中所述无患子粕的制备方法，包括如下步骤：
10、步骤d1：采摘成熟无患子果实，将无患子果实干燥，剥去无患子的果皮，得到硬核种核，敲开外层种壳，取出种仁，粉碎过40～60目筛，备用；
11、步骤d2：加入料液比1:(4-6)的石油醚脱脂，在20-25℃的水浴振荡器中提取3-5h，经抽滤固液分离，重复2-4次，干燥固相，得无患子粕。
12、优选的，步骤s2中所述无患子粕匀浆、碱性蛋白酶的质量比为100:(4-6)。
13、优选的，步骤s2中所述酶解的时间为2～3h。
14、优选的，步骤s2中所述灭酶的加热温度为90-95℃，时间为10-16min。
15、优选的，步骤s2中所述离心的工艺参数为：9000-11000r/min，常温，15-20min。
16、优选的，步骤s3中所述超滤的截留分子量为3kd。
17、优选的，步骤s4中所述无患子肽液、其它组分的质量比为5:(0.1-0.3)。
18、优选的，步骤s4中所述其它组分包括如下按重量份计的各原料制成：植物多糖8-12份、两性离子表面活性剂1-2份。
19、优选的，所述植物多糖为蘑菇多糖、海带多糖、紫萁多糖按质量比(2-4):1:(1-3)混合形成的混合物。
20、优选的，所述两性离子表面活性剂为十八烷基二甲基甜菜碱、十二烷基二甲基甜菜碱中的至少一种。
21、本发明的另一个目的，在于提供一种采用上述抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法制备得到的抗hpv感染的无患子肽溶液。
22、本发明的再一个目的，在于提供一种所述抗hpv感染的无患子肽溶液在制备抗hpv感染的洗剂、凝胶或栓剂上的应用。
23、由于上述技术方案的运用，本发明具有以下有益效果：
24、(1)本发明公开的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，工艺简单，操作方便，制备效率和成品合格率高，对设备依赖性小，适于连续规模化生产，能增强无患子的功能附加值，具有较高的临床应用价值，社会效益和经济效益明显。
25、(2)本发明公开的抗hpv感染的无患子肽溶液，利用中药成分无患子种仁，制成无患子肽溶液，该无患子肽能够治疗和预防hpv感染，同时达到杀菌消炎的作用，且使用该方法制备的无患子肽溶液，钠含量低，肽分子量小，可直接透皮吸收，快速见效，疗效确切，成本低；从中医角度分析hpv感染是由于湿、热、毒邪，气滞血瘀所致，无患子具有清热散瘀能有效改善宫颈部血液循环状态，进一步有效预防hpv感染。
26、(3)本发明公开的抗hpv感染的无患子肽溶液，可以直接使用工业副产物无患子粕，属于固体废弃物的回收再利用，实现了变废为宝，不仅能降低生产成本，提高产业经济效益，还能有利于保护环境；该溶液中包括无患子肽液与其它组分；所述其它组分包括如下按重量份计的各原料制成：植物多糖8-12份、两性离子表面活性剂1-2份。通过各组分直接的相互配合作用，共同作用，能有效改善溶液的稳定性，促进皮肤吸收，提高抗hpv感染和抗菌效果；所述植物多糖为蘑菇多糖、海带多糖、紫萁多糖按质量比(2-4):1:(1-3)混合形成的混合物，通过这样的配比和种类选择，能更好地与无患子肽液发挥协同作用，进一步改善抗hpv感染和抗菌效果。
27、(4)本发明公开的抗hpv感染的无患子肽溶液，首次应用于制备抗hpv感染的洗剂、凝胶或栓剂上，抗hpv感染效果显著，抑菌性能好。通过制备工艺参数的合理选取，使得制成的抗hpv感染的无患子肽溶液透皮性好，作用效果明显，见效快，无毒副作用。
1.一种抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述无患子粕、纯化水的质量比为30～40倍。
3.根据权利要求1所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述无患子粕的制备方法，包括如下步骤：
4.根据权利要求1所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述无患子粕匀浆、碱性蛋白酶的质量比为100:(4-6)。
5.根据权利要求1所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述酶解的时间为2～3h；步骤s2中所述灭酶的加热温度为90-95℃，时间为10-16min。
6.根据权利要求1所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述离心的工艺参数为：9000-11000r/min，常温，15-20min；步骤s3中所述超滤的截留分子量为3kd。
7.根据权利要求1所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，步骤s4中所述无患子肽液、其它组分的质量比为5:(0.1-0.3)；步骤s4中所述其它组分包括如下按重量份计的各原料制成：植物多糖8-12份、两性离子表面活性剂1-2份。
8.根据权利要求7所述的抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法，其特征在于，所述植物多糖为蘑菇多糖、海带多糖、紫萁多糖按质量比(2-4):1:(1-3)混合形成的混合物；所述两性离子表面活性剂为十八烷基二甲基甜菜碱、十二烷基二甲基甜菜碱中的至少一种。
9.一种抗hpv感染的无患子肽溶液，其特征在于，采用权利要求1-8任一项所述抗hpv感染的无患子肽溶液的制备方法制备得到。
10.一种根据权利要求1-8任一项所述抗hpv感染的无患子肽溶液在制备抗hpv感染的洗剂、凝胶或栓剂上的应用。
