背景技术：
1、ezh2(zeste同系物2的增强子)是一种组蛋白赖氨酸甲基转移酶，其与血液学和非血液学恶性肿瘤的发病机制有关。ezh2催化组蛋白3的一个、两个和三个甲基基团转移到赖氨酸27(h3k27)。ezh2是被称为polycomb抑制复合物2(prc2)的较大多蛋白复合物的催化组分，其通常在转录抑制中起作用(margueron,r和reinberg,d.(2011).“polycomb复合物prc2及其生命标志(the polycomb complex prc2 and its mark in life).《自然(nature)》469,343–349)。尽管在许多情况下，通过prc2的转录沉默取决于ezh2的催化活性，但很明显，prc2复合物与某些基因的物理关联在转录抑制中也很重要。prc2复合物可以可替代地含有ezh2的密切相关的同系物，其被称为ezh1。prc2复合物的这两个催化亚基是已知唯一催化h3k27甲基化的酶。除了其催化活性外，ezh1和ezh2是多结构域蛋白质，其通过蛋白质-蛋白质和蛋白质-核酸相互作用介导其他生物学效应。h3k27二甲基化和三甲基化(h3k27me2和h3k27me3)与转录抑制基因很好地相关，但在转录活性基因上发现了h3k27单甲基化(h3k27me1)(barski,a等人(2007).“人类基因组中组蛋白甲基化的高分辨率图谱(high-resolution profiling of histone methylations in the human genome)”.《细胞(cell)》129,823–837；ferrari,k.j等人.(2014).“polycomb依赖性h3k27me1和h3k27me2调节活性转录和增强子保真度(polycomb-dependent h3k27me1 and h3k27me2 regulateactive transcription and enhancer fidelity).《分子细胞(mol.cell)》53,49–62.)。最近的基因研究表明，含ezh1的prc2控制h3k27me1水平(hidalgo,i等人(2012).“ezh1是造血干细胞维持所必需的并且防止衰老样细胞周期停滞(ezh1 is required forhematopoietic stem cell maintenance and prevents senescence-like cell cyclearrest)”.《细胞-干细胞(cell stem cell)》11,649–662；xie,h等人.(2014).“polycomb抑制复合物2以发育阶段特异性方式调节正常造血干细胞功能(polycomb repressivecomplex 2regulates normal hematopoietic stem cell function in adevelopmental-stage-specific manner)”.《细胞-干细胞》14,68–80.)。这与推测的ezh1在转录延伸中的作用一致(mousavi,k等人.(2012).“polycomb蛋白ezh1促进rna聚合酶ii延伸(polycomb protein ezh1 promotes rna polymerase ii elongation)”.《分子细胞(mol.cell)》45,255–262.)。因此，依赖于prc2的h3k27甲基转移酶活性与转录抑制和激活有关，这取决于复合物的组成。
2、ezh2(而不是ezh1)在人类癌症中被频繁过表达。癌症中ezh2过表达的分子基础包括(1)编码ezh2的基因座的基因组扩增(tiffen,j等人.(2016).“ezh2的体细胞拷贝数扩增和超激活体细胞突变与dna甲基化相关，并且驱动黑色素瘤中参与肿瘤抑制和免疫应答的基因的表观遗传学沉默(somatic copy number amplification and hyperactivatingsomatic mutations of ezh2 correlate with dna methylation and drive epigeneticsilencing of genes involved in tumor suppression and immune responses inmelanoma)”.neoplasia 18(2),121-132.,ding,l等人(2006).“鉴定ezh2作为形态学正常乳腺组织中癌前状态的分子标记物(identification of ezh2 as a molecular markerfor a precancerous state in morphologically normal breast tissues)”.《癌症研究(cancer research)》66(8),4095-4099.,saramaki,o.r等人.(2006).“zeste同系物2(ezh2)的polycomb群蛋白增强子的基因在晚期前列腺癌中扩增(the gene for polycombgroup protein enhancer of zeste homolog 2(ezh2)is amplified in late-stageprostate cancer)”.《基因染色体癌症(genes chromosomes cancer)》45(7)，639-645)，(2)减弱ezh2表达的microrna的缺失和表观遗传学沉默(varambally,s等人(2008).“microrna-101的基因组缺失会导致组蛋白甲基转移酶ezh2在癌症中过度表达(genomicloss of microrna-101leads to overexpression of histone methyltransferase ezh2in cancer)”.《科学(science)》322(5908),1695-1699)和(3)由转录因子的e2f家族施加的基因控制的失调(santos,m等人(2014).“rb-e2f-ezh2信号传导环路的体内破坏会导致膀胱癌(in vivo disruption of an rb-e2f-ezh2 signaling loop causes bladdercancer)”.《癌症研究(cancer research)》74(22),6565-6577.,coe,b.p等人.(2013).“e2f/rb通路的基因组失调导致小细胞肺癌中癌基因ezh2的激活(genomic deregulationof the e2f/rb pathway leads to activation of the oncogene ezh2 in small celllung cancer)”.《公共科学图书馆·综合(plos one)》8(8),e71670.,bracken,a.p等人.(2003).“ezh2位于prb-e2f通路的下游，对增殖至关重要并在癌症中扩增(ezh2isdownstream of the prb-e2f pathway,essential for proliferation and amplifiedin cancer)”.《欧洲分子生物学学报(embo j)》22(20),5323-5335)，诸如如在rb1基因缺失的情况下。因此，在癌症中存在几种导致ezh2过表达的复发性基因组畸变，这证明增加的ezh2水平促进了肿瘤进展。为此，ezh2已经与多种癌症靶点诸如血液恶性肿瘤和实体瘤相关联。参见例如wo 2014/124418。
3、由于其抗肿瘤活性和在prc2复合物中的长停留时间(约101天)而受到关注的ezh2抑制剂是7-氯-2-(4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺。参见例如pct/us2019/027932，其内容通过引用并入本文。鉴于其治疗潜力和疾病诸如癌症的流行，需要存在这一化合物的替代治疗用途，例如用于基于联合的治疗。
技术实现思路
1、本文提供了用7-氯-2-(4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐，和选自拓扑异构酶抑制剂、dna烷基化剂和雄激素受体信号传导抑制剂的第二药剂治疗癌症的方法。
2、本文还提供了使用7-氯-2-(4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐作为单一疗法治疗晚期复发性实体瘤的方法。
3、本文还提供了药物组合物，所述药物组合物包含7-氯-2-(4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺，或其药学上可接受的盐，和选自拓扑异构酶抑制剂、dna烷基化剂和雄激素受体信号传导抑制剂的第二药剂；以及任选地药学上可接受的载体。
4、本文还涉及以下项目。
5、1.一种治疗受试者的实体瘤的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的具有下式的化合物：
6、
7、或其药学上可接受的盐；和有效量的选自拓扑异构酶抑制剂、dna烷基化剂和雄激素受体信号传导抑制剂的第二药剂。
8、2.根据项目1所述的方法，其中所述第二药剂是雄激素受体信号传导抑制剂。
9、3.根据项目1或2所述的方法，其中所述第二药剂是选自比卡鲁胺(bicalutamide)、恩杂鲁胺(enzalutamide)、阿帕鲁胺(apalutamide)、氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、达洛鲁胺(darolutamide)和醋酸阿比特龙(abiraterone acetate)的雄激素受体信号传导抑制剂。
10、4.根据项目1至3中任一项所述的方法，其中所述第二药剂是恩杂鲁胺。
11、5.根据项目1所述的方法，其中所述第二药剂是dna烷基化剂。
12、6.根据项目1或5所述的方法，其中所述dna烷基化剂选自白消安(busulfan)、环磷酰胺、苯达莫司汀(bendmustine)、卡铂、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、顺铂、替莫唑胺(temozolomide)、美法仑(melphalan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、奥沙利铂(oxaliplatin)、异环磷酰胺、噻替哌(thiotepa)、曲贝替定(trabectedin)、六甲蜜胺、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、甲苄肼(procarbazine)和链脲佐菌素。
13、7.根据项目1或5所述的方法，其中所述dna烷基化剂为顺铂。
14、8.根据项目1所述的方法，其中所述第二药剂是拓扑异构酶抑制剂。
15、9.根据项目1或8所述的方法，其中所述拓扑异构酶抑制剂是拓扑异构酶i抑制剂。
16、10.根据项目1或8所述的方法，其中所述拓扑异构酶抑制剂选自伊立替康(irinotecan)、拓扑替康(topotecan)、喜树碱(camptothecin)、片螺素(lamellarin)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、阿霉素(doxorubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、安吖啶(amsacrine)、玫瑰树碱类(ellipticines)、金精三羧酸(aurintricarboxylic acid)、hu-331、表柔比星(epirubicin)、戊柔比星(valrubicin)、伊达比星(idarubicin)、匹杉琼(pixantrone)、替尼泊苷(teniposide)、贝洛替康(belotecan)、吉马替康(gimatecan)、茚并替康(indotecan)、因蒂米替康(indimitecan)。
17、11.根据项目1、8和9中任一项所述的方法，其中所述拓扑异构酶抑制剂是伊立替康。
18、12.根据项目1至11中任一项所述的方法，其中所述实体瘤选自前列腺癌、小细胞肺癌(sclc)、胃或胃食管结合部(gej)腺癌和浆液性卵巢癌。
19、13.根据项目1至12中任一项所述的方法，其中所述实体瘤选自小细胞肺癌(sclc)、胃或胃食管结合部(gej)腺癌和浆液性卵巢癌。
20、14.根据项目1至12中任一项的方法，其中所述实体瘤是前列腺癌。
21、15.根据项目1至14中任一项所述的方法，其中所述实体瘤的特征在于为晚期肿瘤。
22、16.根据项目1至15中任一项所述的方法，其中所述实体瘤的特征在于为复发性实体瘤。
23、17.根据项目1至16中任一项所述的方法，其中所述化合物与所述第二药剂同时施用。
24、18.根据项目1至17中任一项所述的方法，其中所述化合物具有下式
25、
26、或其药学上可接受的盐。
27、19.一种使用7-氯-2-(4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐治疗晚期复发性实体瘤的方法。
28、20.根据项目19所述的方法，其中所述晚期复发性实体瘤是晚期复发性尿路上皮癌、晚期复发性卵巢透明细胞癌或晚期复发性子宫内膜癌。
29、21.根据项目19或20所述的方法，其中所述7-氯-2-(4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺是(2r)-7-氯-2-(反式-4-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)环己基)-2,4-二甲基-n-((6-甲基-4-(甲硫基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺。
1.具有下式的化合物：
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述第二药剂是雄激素受体信号传导抑制剂。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述第二药剂是选自比卡鲁胺(bicalutamide)、恩杂鲁胺(enzalutamide)、阿帕鲁胺(apalutamide)、氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、达洛鲁胺(darolutamide)和醋酸阿比特龙(abiraterone acetate)的雄激素受体信号传导抑制剂。
4.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述第二药剂是恩杂鲁胺。
5.根据权利要求1所述的用途，其中所述第二药剂是dna烷基化剂。
6.根据权利要求1或5所述的用途，其中所述dna烷基化剂选自白消安(busulfan)、环磷酰胺、苯达莫司汀(bendmustine)、卡铂、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、顺铂、替莫唑胺(temozolomide)、美法仑(melphalan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、奥沙利铂(oxaliplatin)、异环磷酰胺、噻替哌(thiotepa)、曲贝替定(trabectedin)、六甲蜜胺、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、甲苄肼(procarbazine)和链脲佐菌素。
7.根据权利要求1或5所述的用途，其中所述dna烷基化剂为顺铂。
8.根据权利要求1所述的用途，其中所述第二药剂是拓扑异构酶抑制剂。
9.根据权利要求1或8所述的用途，其中所述拓扑异构酶抑制剂是拓扑异构酶i抑制剂。
10.根据权利要求1或8所述的用途，其中所述拓扑异构酶抑制剂选自伊立替康(irinotecan)、拓扑替康(topotecan)、喜树碱(camptothecin)、片螺素(lamellarin)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、阿霉素(doxorubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、安吖啶(amsacrine)、玫瑰树碱类(ellipticines)、金精三羧酸(aurintricarboxylic acid)、hu-331、表柔比星(epirubicin)、戊柔比星(valrubicin)、伊达比星(idarubicin)、匹杉琼(pixantrone)、替尼泊苷(teniposide)、贝洛替康(belotecan)、吉马替康(gimatecan)、茚并替康(indotecan)、因蒂米替康(indimitecan)。
11.根据权利要求1所述的用途，其中所述拓扑异构酶抑制剂是伊立替康。
12.根据权利要求1所述的用途，其中所述实体瘤选自前列腺癌和浆液性卵巢癌。
13.根据权利要求1所述的用途，其中所述实体瘤是浆液性卵巢癌。
14.根据权利要求1的用途，其中所述实体瘤是前列腺癌。
15.根据权利要求1所述的用途，其中所述实体瘤的特征在于为晚期肿瘤。
16.根据权利要求1所述的用途，其中所述实体瘤的特征在于为复发性实体瘤。
17.根据权利要求1所述的用途，其中所述化合物与所述第二药剂同时施用。
18.根据权利要求1所述的用途，其中所述化合物具有下式
