本发明属于生物领域，具体涉及一种具有抗皱效果的多肽、组合物及其应用。
背景技术：
1、人体皮肤伴随年龄的增长会逐渐衰老，同时由于外在因素，主要是紫外线照射也会对皮肤的dna、蛋白质、脂质造成损害，导致皮肤中抗氧化剂的水平降低，进而造成皮肤衰老速度加快，衰老的外观主要表现在肤色变暗、长斑、皮肤粗糙、松弛、产生皱纹等，病理特征则表现在表皮变薄、基底膜损伤、真皮层胶原降解、弹性组织变性及毛细血管扩张(光老化皮肤基底膜的损伤、修复及其机制的研究进展.中国美容整形外科杂志.2020,31(08))。
2、随着经济水平的发展，人们对护肤产品的要求不断高，期待能够通过护肤产品有效解决皮肤衰老的多种问题，因此，为了获得或发现能够有效对抗皮肤衰老问题的产品，相关的研究越来越多。例如，中国发明cn114805601a公开了一种多肽类似物，所述多肽类似物为mymd与阿基瑞林、棕榈酰五肽或syn-ake的融合肽，其中阿基瑞林残基、棕榈酰五肽残基或syn-ake残基通过酰胺键与mymd连接，该发明将mymd-1和抗皱及皮肤美容肽syn-ake、pentapeptide或argireline相结合，获得的多肽类似物具有双功能抗衰老的作用。
3、另外，为了获得理想效果，很多护肤品也通过同时添加多种活性成分来达到综合效果。例如，中国发明cn115364017a公开了一种胶原活性肽护肤组合物，主要成分包括：活性肽5-10％、植物提取物5-12％、纳米钛白粉1-3％、维生素e1-6％、保湿剂15-20％、甘油8-10％、余量去离子水。其中，活性肽为寡肽-1和三肽-1铜；植物提取物为紫草提取物和北美金缕梅提取物。该发明组合物利用活性肽促进胶原蛋白和弹力蛋白的合成，利用植物提取物提高护肤品对皮肤的修护作用，同时通过纳米钛白粉和维生素e获得防晒效果，延缓光老化。中国发明cn202211205397.9也公开了一种舒缓抗衰老护肤产品，利用乙酰基六肽还可以阻断神经对肌肉的连接，阻止皮肤形成皱纹，利用牛奶蛋白提取物中的牛奶中乳清蛋白促进肌肉生长，利用咖啡因的抗氧化活性清除对皮肤有害的自由基，利用冬虫夏草提取物和迷迭香酸的抗菌性，利用氨基酸和熊果酸增加该护肤品的舒缓性，从而使该护肤品同时具有抗衰和抑菌以及舒缓的效果。但是，由于每种物质的性质存在多样性，不同成分之间也可能发生相互反应而使原有活性减弱或丧失，从而导致产品的实际效果达不到预期的要求。
4、本领域技术人员面临的挑战在于如何开发出一种既能有效穿透皮肤屏障，又安全、高效的抗皱产品。为此，本发明提供了一种基于多肽的新型抗皱解决方案，旨在克服现有技术的局限性。通过精确的生物功能评估，本发明的多肽在实验中表现出显著的生物功能。
技术实现思路
1、本发明旨在解决现有抗皱技术中存在的局限性，并提供一种基于多肽的、具有显著抗皱效果的组合物及其应用，用于制备预防和/或治疗皮肤老化的护肤品、医美产品、或抗皱功效产品，可以单独使用或与其他护肤成分联合使用，以增强其抗皱和抗衰老效果。这一发明充分利用了多肽在皮肤护理和抗衰老领域的先进应用，通过精确的合成方法和生物功能评估，为抗皱护肤产品提供了科学基础。
2、肌肤衰老产生皱纹的主要原理包括胶原蛋白和弹力蛋白的减少、皮肤水分丧失、以及皮肤细胞活力下降。随着年龄的增长，皮肤自然生成的胶原蛋白和弹力蛋白逐渐降解，这导致皮肤失去弹性和紧致性，形成细纹和皱纹。此外，外部环境因素(尤其是紫外线照射)加速了这一过程，增加了氧化压力，进一步损害皮肤细胞和胶原蛋白的结构。开发高效、深层作用的，延缓皮肤老化和减少皱纹形成的抗衰老产品，是本领域技术人员所亟需解决的问题。多肽被认为是有效对抗皮肤衰老的关键成分，主要因为它们能够模拟皮肤细胞的自然生物信号，促进胶原蛋白和弹力蛋白的合成，这些蛋白质对于维持皮肤结构的完整性和弹性至关重要。此外，多肽还具有强效的抗氧化特性，可以中和自由基，减轻环境压力(如紫外线照射)引起的氧化损伤。
3、本发明针对这一问题，采用了fmoc固相多肽合成法(实施例1)，精确地合成了具有优化序列的多肽，确保了它们的纯度和生物活性。本发明所提供多肽在实验研究中表现出显著的生物功能，如具有较高的dpph自由基(dpph·)清除率，表明它们能有效抵御氧化应激(实施例2)；本发明所提供多肽被证实能促进人皮肤成纤维细胞hsf的生长，有助于皮肤细胞的修复和更新(实施例3)；斑马鱼模型实验进一步验证了本发明多肽在促进胶原蛋白表达上的效果，从而对抗皮肤松弛和皱纹的形成(实施例4)。
4、在一实施方案中，所述多肽展现出高效的抗氧化活性。自由基是皮肤老化的主要因素之一，能够破坏皮肤细胞的dna，蛋白质和脂质，导致细胞功能障碍和细胞死亡。多肽的抗氧化特性源于它们的化学结构，允许它们直接捕获和中和自由基，或增强细胞自身的抗氧化防御系统，如提高抗氧化酶的活性。因此，这些多肽能够保护皮肤免受环境压力，如紫外线照射和污染造成的氧化损伤。长期来看，这有助于减缓皮肤老化的过程，改善皮肤的色泽和质感，减少色斑和皱纹的形成。所述多肽通过中和造成皮肤衰老的氧化应激因子，有效保护皮肤免受环境因素(如紫外线辐射)的损伤。这种强效的抗氧化能力对于抵抗与氧化应激相关的皮肤老化过程至关重要，有助于减缓皮肤老化速度，改善皮肤的整体健康和外观。
5、在一实施方案中，所述多肽能显著促进人皮肤成纤维细胞hsf的生长。多肽作为信号分子，能够通过与皮肤细胞表面的特定受体结合，激活细胞内的信号传导路径，从而刺激细胞的生长和分裂。这种机制可能涉及增加细胞内生长因子的表达或激活细胞周期相关蛋白。通过促进皮肤细胞的天然再生和修复过程，这些多肽有助于维持皮肤的健康状态，并对抗由于年龄增长或外部压力如环境污染和紫外线辐射引起的皮肤损伤。此外，支持皮肤细胞更新的能力，意味着多肽可能对于减少细纹和皱纹有积极的效果，从而保持皮肤的年轻和光泽。
6、在一实施方案中，所述多肽能有效提高col1a1a基因的相对表达量。胶原蛋白是皮肤弹性和坚韧度的关键组分，负责维持皮肤的紧致和平滑。在斑马鱼模型中，多肽能够提高col1a1a基因的表达量，这一基因编码胶原蛋白中的α1(i)链。这表明所述多肽可以刺激胶原蛋白的合成和积累，从而可能帮助减少皮肤松弛和皱纹的形成，恢复皮肤的紧致度。在护肤和医美领域，这种特性尤为宝贵，它提供了一种非侵入性的方法来改善皮肤质量和外观，特别是在抗衰老的应用中。因此，这些多肽在抗皱和改善皮肤外观方面具有显著的潜力。
7、综上所述，本发明的多肽不仅在细胞和分子层面上对抗皮肤衰老，而且通过提高胶原蛋白的表达和增强抗氧化防御机制，全面改善皮肤的外观和健康状况。这些多肽的综合效果使其成为改善和预防皱纹的理想选择，为开发高效、深层作用的抗衰老护肤产品开辟了新途径。
8、本发明提供的具有抗皱效果的多肽，其特征在于，所述多肽包括seq id no:7所示的氨基酸序列eemqrrad，且所述多肽的氨基酸序列包括15-20个氨基酸。
9、在一优选例中，所述的多肽的氨基酸序列包括16-19个氨基酸。
10、在一优选例中，所述多肽的氨基酸序列在eemqrrad序列的n端增加1-20个氨基酸。
11、在一优选例中，所述多肽的氨基酸序列在eemqrrad序列的n端增加8-11个氨基酸。
12、在一优选例中，所述的多肽的氨基酸序列包括选自以下的氨基酸序列或其变体：
13、radsradceemqrrad，seq id no:8、
14、ygrkkrrqrrreemqrrad，seq id no:9、
15、acssspskhcgeemqrrad，seq id no:10、
16、actgstqhqcgeemqrrad，seq id no:11、或
17、trcfrrcceemqrrad，seq id no:12。
18、在一优选例中，所述多肽的氨基酸序列包括选自以下的氨基酸序列或其变体：
19、radsradceemqrrad，seq id no:8、
20、acssspskhcgeemqrrad，seq id no:10、或
21、actgstqhqcgeemqrrad，seq id no:11。
22、在一优选例中，所述多肽的n端或c端修饰有辅助基团，这些辅助基团被精心挑选，以增强多肽的整体性能和功能。优选地，这些辅助基团可以包括乙酰基、氨基、烷基、芳香基、脂肪酸基、糖基、磷酸基、硫酸基、聚乙二醇(peg)基团或肽类链接基团。这些修饰基团有助于提高多肽的生物利用度、稳定性、溶解性或靶向特性，从而增强其在抗皱应用中的有效性。
23、在一优选例中，所述修饰基团为烷基，以提高多肽的脂溶性，促进皮肤吸收。而peg基团的引入则能够提升多肽的水溶性和生物兼容性，使得多肽更易于应用于各种水基化妆品和护肤产品中。
24、在一优选例中，所述修饰基团为磷酸基或硫酸基，以增强多肽的亲水性和稳定性。这种修饰有助于在水环境中保持多肽的结构完整，从而保持其生物活性。
25、在一更优选例中，所述修饰基团为n端的乙酰基(ac-)。乙酰基的引入不仅能有效保护多肽的c端免受水解和酶解作用，还能提高多肽的稳定性和生物活性。乙酰基修饰的多肽更适合长期储存和使用，对于商业化生产和应用来说至关重要。
26、在一更优选例中，所述多肽c端使用酰胺化封闭，进一步提高了分子的稳定性，使其更耐受生物体内的酶解作用，从而延长了多肽在体内的半衰期，这对于确保多肽抵达皮肤较深层次的目标细胞至关重要。
27、n端乙酰基修饰以及c端酰胺化封闭的多肽更适合长期储存和使用，对于商业化生产和应用来说至关重要，尤其是在抗皱和皮肤护理产品中的应用。
28、在一优选例中，所述的多肽氨基酸序列选自seq id no:1-seq id no:5中的任一氨基酸序列或其变体。其中，seq id no:1-seq id no:6的序列信息如下表1中。
29、表1多肽1-6的氨基酸序列表及液质联用鉴定结果
30、
31、注：表中的-nh2指多肽的c端被酰胺化封闭。
32、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品包括但不限于药物组合物、食品组合物、保健组合物、膳食补充剂等。具体而言，多肽可被制备成各种药物组合物，如片剂、胶囊、粉剂、微粒剂、溶液剂、锭剂、胶冻、乳膏制剂、醑剂、悬液、酊、泥敷剂、搽剂、洗剂和气雾剂等。这些药物组合物可以采用通常已知的制备技术制备，并且可以添加适当的药物辅料，如稳定剂、抗氧化剂和防腐剂，以保持产品的稳定性和有效性。
33、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品为膏霜和乳液类型的剂型适用于直接涂抹于皮肤表面，为用户提供即时的滋润和抗皱效果。
34、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品为水剂和凝胶类型的剂型，更加轻盈，适合油性或混合性肌肤。
35、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品为油剂和粉剂类型的剂型，适合干性肌肤，提供深层滋养和长效保湿。
36、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品为泥和气雾剂类型的剂型，为用户提供了更多的选择，适用于特定的护肤需求和场合。
37、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品为贴类和冻干类的剂型，为本发明的多肽抗皱产品提供了创新的使用方式，使得活性成分能够更加直接和有效地作用于目标区域。
38、在一实施方案中，本发明所述的多肽抗皱产品为胶囊剂或片剂类型的剂型，提供了口服途径，通过内服来发挥抗衰老和抗皱的效果，从体内改善皮肤状态。
39、在一实施方案中，本发明所述的多肽组合物还可以包括药学上、食品上、保健品或膳食上可接受的载体。例如，可采用各种相容性固体或液体填料、凝胶物质或溶剂，这些载体应适合于人体使用，具有足够的纯度和低毒性。常用载体包括纤维素及其衍生物、多元醇如甘油、以及其他药学辅料如滑石、硬脂酸镁等。
40、在一实施方案中，本发明所述的多肽组合物施用方式没有特别限制，可包括但不限于口服、肠胃外(如静脉内、肌肉内)、局部施用等。在口服制剂中，可将多肽与常规的惰性赋形剂或载体混合，例如淀粉、乳糖、蔗糖或其它填料；并可添加粘合剂、保湿剂、崩解剂、缓溶剂、润湿剂、吸附剂和润滑剂等。固体剂型如片剂、胶囊剂等，还可采用包衣和壳材制备，以改善其稳定性和生物利用度。
41、在一实施方案中，本发明所述的多肽组合物用于口服施用或给药的液体剂型，包括但不限于乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂等，其中除了活性化合物外，还可包含各种惰性稀释剂、增溶剂、乳化剂、甜味剂、调味剂和香料。特别是在悬浮液中，可以添加悬浮剂以提高产品的稳定性和使用便捷性。
42、在一实施方案中，本发明所述的多肽可以与保湿剂组合使用，例如透明质酸、甘油、尿囊素、天然保湿因子(nmf)或聚谷氨酸。这些成分有助于增加皮肤的水分含量，提高皮肤的柔软度和弹性，从而增强多肽的抗皱效果。
43、在一实施方案中，本发明所述的多肽可与抗氧化剂结合，如维生素e、维生素c、绿茶提取物或辅酶q10。这些抗氧化剂有助于中和皮肤中的自由基，减少环境因素导致的氧化损伤，进一步强化多肽的抗衰老功效。
44、在一实施方案中，本发明所述的多肽可包含稳定剂，例如维生素b3(烟酰胺)、维生素a衍生物或硫辛酸等，以保持多肽的稳定性和活性，延长其在产品中的有效期。
45、在一实施方案中，本发明所述的多肽可与乳化剂结合，例如卵磷脂、聚山梨醇酯或十八醇硬脂酸酯，以稳定产品的乳化体系，确保成分的均匀分布。
46、在一实施方案中，本发明所述的多肽可结合使用调理剂和植物提取物，如芦荟提取物、绿茶提取物或洋甘菊提取物，为用户提供皮肤舒缓和其他附加的护肤效益。
47、在一实施方案中，本发明所述的多肽可包含紫外线吸收剂或防晒剂，如二苯甲酮、氧化锌或二氧化钛等，提供防晒保护，减少紫外线对皮肤的伤害。
48、在一实施方案中，本发明所述的多肽可结合渗透促进剂，例如脂质体、纳米粒子或二甲基亚砜等，以增强多肽的皮肤渗透性，确保其有效成分能更深入地作用于皮肤。
49、在一实施方案中，本发明所述的多肽可与赋形剂和填料结合，例如硅酸、微晶纤维素或淀粉等，以改善产品的质地和外观。
50、在一实施方案中，本发明所述的多肽可包含香料和调味剂，以改善产品的气味，增强用户的使用体验。
51、本发明的多肽抗皱产品通过精心设计的多肽活性成分以及适当的辅料和载体的组合，提供了一种多功能、高效、安全的抗皱解决方案，适用于多种剂型和应用方式，满足不同人群的需求。
1.一种具有抗皱效果的多肽，其特征在于，所述多肽包括seq id no:7所示的氨基酸序列eemqrrad，所述多肽的氨基酸序列包括12-25个氨基酸，优选包括16-19个氨基酸。
2.根据权利要求1的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列在eemqrrad序列的n端增加1-20个氨基酸，优选增加8-11个氨基酸；
3.根据权利要求1或2所述的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列n端或c端包括修饰；
4.根据权利要求1-3任一项所述的多肽，其特征在于，所述多肽包括选自seq id no:1-seq id no:5中的任一氨基酸序列或其变体。
5.根据权利要求1-4任一项所述的多肽，其特征在于，所述多肽能够有效对抗和/或修复皮肤损失和/或老化；
6.编码根据权利要求1-5任一项所述的多肽的核酸分子。
7.含有权利要求6所述的核酸的载体。
8.含有权利要求7所述的载体的细胞。
9.一种组合物，包括辅料和活性成分，其特征在于，所述活性成分包括权利要求1-5任一所述的多肽、或权利要求6所述的核酸分子、或权利要求7所述的载体、或权利要求8所述的细胞；
10.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述组合物的制剂形式为适用于口服、涂抹或皮下注射的方式施用的剂型。
11.根据权利要求9或10所述的组合物，其特征在于，所述组合物的剂型包括膏霜、乳液、水剂、凝胶、油剂、粉剂、泥、气雾剂、贴类、冻干类、胶囊剂或片剂中的一种或多种。
12.权利要求1-5任一所述的多肽、或权利要求6所述的核酸分子、或权利要求7所述的载体、或权利要求8所述的细胞、或权利要求9或10所述的组合物在制备具有抗皱功效的产品中的应用；优选地，所述具有抗皱功效的产品为药物组合物、个人护理用品、化妆品、医美产品中的一种或多种。
