本发明涉及多肽合成，具体涉及一种多肽的合成方法。
背景技术：
1、替尔泊肽(tirzepatide)是一种葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(gip)受体和胰高血糖素样肽1(glp-1)受体的双重激动剂，其作用机制与glp-1受体激动剂类似，具有降低血糖，降低体重和改善心血管系统的作用，于2022年5月13日获fda批准，商品名mounjaro。替尔泊肽作为一种每周一次的gip和glp-1的双受体激动剂，一个分子实现两种肠促胰素的作用整合。gip是一种肠促胰素，能够补充glp-1受体激动剂的作用。在临床前模型中，已证明gip可减少摄食量并增加能量消耗，从而减轻体重，当联合glp-1受体激动剂时，可能对代谢紊乱如体重、血糖和血脂产生更大的影响。与司美格鲁肽“头对头”的iii期试验证明替尔泊肽的降糖减重效果优于司美格鲁肽。除了糖尿病、减肥之外，替尔泊肽也正在作为非酒精性脂肪性肝炎(nash)的潜在治疗方法进行开发。
2、替尔泊肽的序列为tyr-aib-glu-gly-thr-phe-thr-ser-asp-tyr-ser-ile-aib-leu-asp-lys-ile-ala-gln-(eic-γ-glu-aeea-aeea-lys)-ala-phe-val-gln-trp-leu-ile-ala-gly-gly-pro-ser-ser-gl y-ala-pro-pro-pro-ser-nh2，分子式为c225h348n48o68，分子量为4810.53da，结构式见图1。
3、现有的专利文献中，替尔泊肽的制备方法多为固液合成法，合成路线也大同小异，但是通过固相合成带有保护基的多肽片段，然后再与其他片段进行偶联方法并没有降低替尔泊肽的生产成本。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本发明提供一种多肽的合成方法。
2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
3、本发明提供一种多肽的合成方法，所述多肽为替尔泊肽，该方法包括：先通过液相方法合成替尔泊肽侧链活化酯片段i，然后通过逐步偶联或者固液合成法合成替尔泊肽主链片段ii，再使用化学合成法将所述替尔泊肽主链片段ii和所述替尔泊肽侧链活化酯片段i进行反应，得到替尔泊肽。
4、进一步的，所述替尔泊肽侧链活化酯片段i为四肽活化酯片段eic-glu(aeea-aeea-osu)-oh。
5、进一步的，在所述先通过液相方法合成替尔泊肽侧链活化酯片段i的步骤中，包括：(1)将eic(otbu)-oh和hosu在偶联剂存在下进行偶联反应，得到eic(otbu)-osu；然后将所述eic(otbu)-osu和h-glu-otbu进行反应，得到二肽片段eic(otbu)-glu-otbu；(2)将所述二肽片段eic(otbu)-glu-otbu和hosu在偶联剂存在下进行偶联反应，得到eic(otbu)-glu(osu)-otbu；然后将所述eic(otbu)-glu(osu)-otbu和aeea-aeea进行反应，得到四肽片段eic(otbu)-glu(aeea-aeea)-otbu；(3)将所述四肽片段eic(otbu)-glu(aeea-aeea)-otbu和hosu在偶联剂存在下进行偶联反应，得到全保护四肽活化酯片段eic(otbu)-glu(aeea-aeea-osu)-otbu；(4)将全保护四肽活化酯片段eic(otbu)-glu(aeea-aeea-osu)-otbu在tfa存在下进行裂解反应，得到所述四肽活化酯片段eic-glu(aeea-aeea-osu)-oh。
6、进一步的，还包括：对所述四肽活化酯片段eic-glu(aeea-aeea-osu)-oh进行纯化，得到高纯度的替尔泊肽主链片段ii。需要说明的是，通过逐步偶联或者固液合成法合成替尔泊肽主链片段ii为粗肽，经过纯化后即得到高纯度的替尔泊肽主链片段ii。
7、进一步的，所述步骤(1)、(2)和(3)中的所述偶联剂为tstu、hstu、dcc、dic或edc·hcl。其中，所述偶联剂优选为edc·hcl。
8、进一步的，所述替尔泊肽主链片段ii为tyr-aib-glu-gly-thr-phe-thr-ser-asp-tyr-ser-ile-aib-leu-asp-lys(z)-ile-ala-gln-lys-ala-phe-val-gln-trp-leu-ile-ala-gly-gly-pro-ser-ser-gly-ala-pro-pro-pro-ser-nh2；其中，所述z为alloc、cbz、teoc、troc或bn保护基。
9、进一步的，所述合成过程中使用到的反应溶剂为dmf、dmac、dmso、nmp、dcm和thf中的一种或多种。
10、进一步的，还包括：对所述替尔泊肽进行纯化处理和冻干处理后，得到替尔泊肽精品。
11、相较于现有技术，本发明提供的技术方案至少具有以下优点：
12、本发明提供一种多肽的合成方法，该多肽具体为替尔泊肽，该方法首先将替尔泊肽的主链片段粗品合成出来，经过一步纯化后，替尔泊肽主链片段的纯度极大的提高，在接下来与侧链片段的连接过程中，替尔泊肽侧链所需要的量就减少很多，因此，总合成成本也就下降许多。此外，由于替尔泊肽的主链片段已通过高效液相色谱进行预先纯化了一遍，在最终的替尔泊肽粗肽中，纯度比较高，大大减少了纯化的难度。并且，所使用的替尔泊肽主链片段及侧链活化酯可以同时合成，提高了合成效率。
13、综上所述，1)本发明提供了一种替尔泊肽侧链片段活化酯eic-glu(aeea-aeea-osu)-oh的合成方法。此方法操作简单，合成路径短，只需五步反应便能得到高纯度的产品。
14、2)本发明提供了一种低成本合成替尔泊肽的方法。通过预纯化后得到的高纯度的替尔泊肽主链片段与侧链活化酯反应，减少了高成本侧链的使用量，提升了侧链的使用效率，降低了替尔泊肽的合成成本。同时，由于替尔泊肽主链片段经预先纯化了一遍，大大减少了替尔泊肽粗品溶液中的杂质，减轻了终产品纯化上的难度。
1.一种多肽的合成方法，其特征在于，所述多肽为替尔泊肽，该方法包括：先通过液相方法合成替尔泊肽侧链活化酯片段i，然后通过逐步偶联或者固液合成法合成替尔泊肽主链片段ii，再使用化学合成法将所述替尔泊肽主链片段ii和所述替尔泊肽侧链活化酯片段i进行反应，得到替尔泊肽。
2.根据权利要求1所述的多肽的合成方法，其特征在于，所述替尔泊肽侧链活化酯片段i为四肽活化酯片段eic-glu(aeea-aeea-osu)-oh。
3.根据权利要求2所述的多肽的合成方法，其特征在于，在所述先通过液相方法合成替尔泊肽侧链活化酯片段i的步骤中，包括：
4.根据权利要求3所述的多肽的合成方法，其特征在于，还包括：对所述四肽活化酯片段eic-glu(aeea-aeea-osu)-oh进行纯化，得到高纯度的替尔泊肽主链片段ii。
5.根据权利要求3所述的多肽的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)、(2)和(3)中的所述偶联剂为tstu、hstu、dcc、dic或edc·hcl。
6.根据权利要求1所述的多肽的合成方法，其特征在于，所述替尔泊肽主链片段ii为tyr-aib-glu-gly-thr-phe-thr-ser-asp-tyr-ser-ile-aib-leu-asp-lys(z)-ile-ala-gln-lys-ala-phe-val-gln-trp-leu-ile-ala-gly-gly-pro-ser-ser-gly-ala-pro-pro-pro-ser-nh2；
7.根据权利要求1所述的多肽的合成方法，其特征在于，所述合成过程中使用到的反应溶剂为dmf、dmac、dmso、nmp、dcm和thf中的一种或多种。
8.根据权利要求1所述的多肽的合成方法，其特征在于，还包括：对所述替尔泊肽进行纯化处理和冻干处理后，得到替尔泊肽精品。
