本发明属于分析化学领域，具体涉及一种快速检测卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的方法。
背景技术：
乙基香兰素β-d-葡萄糖苷本身并没有香气，受热产生奶香气味。用于卷烟中成为卷烟中比较重要的潜香物质。目前乙基香兰素β-d-葡萄糖苷用于卷烟中主要添加到卷烟纸中。但是乙基香兰素β-d-葡萄糖苷用于卷烟中的添加技术、检测技术、品质控制技术报道较少。
乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的检测方法，如专利cn108414640a一种乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的高效液相色谱检测方法，和专利cn108445105a一种乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的检测方法，为乙基香兰素β-d-葡萄糖苷用于卷烟中的检测提供了易于推广应用的思路。但是，上述专利使用的提取液是甲醇来提取卷烟纸中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷，且需要提取至少三次才能达到充分提取的目的，需要较长的时间和较多的资源；另外专利cn108414640a高效液相色谱使用的检测波长为208nm，容易受到杂质的干扰，检测时间需要10分钟以上。
高效地提取卷纸中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷并快速检测样品中的含量有助于提高卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的添加效率，促进卷烟加香产品的高质量发展。
技术实现要素：
本发明提供一种快速检测卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的方法。该方法创新性地优化了样品提取方法和色谱条件，利用高效液相色谱仪实现卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的快速检测。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。
本发明公开了一种卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的检测方法，包括如下步骤：
①样品提取：称取剪碎的卷烟纸，加入水中，超声提取，过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行检测，即得到卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的含量。
优选地，卷烟纸与水的质量比为1：(200-600)；超声提取5-30分钟；滤膜的孔径为0.10-0.30μm的尼龙滤膜。
优选地，液相色谱条件为，色谱柱：c18柱，规格为：3μm，4.6mm×150mm；流速：1.0ml/min；柱温：25～35℃；进样量：10μl；洗脱方式：梯度洗脱；检测器：二极管阵列检测器(dad)，检测波长为220～300nm。
优选地，梯度洗脱条件为：时间0-5.00min，20wt％流动相a 80wt％流动相b；5min，40wt％流动相a 60wt％流动相b。
优选地，流动相a为乙腈，流动相b为0.1wt％的甲酸水溶液。
本发明的有益效果：
1、本发明采用纯净水超声提取卷烟纸中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的方法，避免了使用甲醇等有机溶剂，且一次就能提取完成。与专利cn108414640a相比，缩短了提取次数、提取时间。
2、本发明的方法采用液相色谱的选择220nm以上的检测波长进行检测，不受杂质的干扰，能精确测定取卷烟纸中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的含量。检测结果准确，且完成检测时间较短；5分钟左右即完成检测。与专利cn108414640a相比，缩短了检测时间。
3、本发明的提取方法和检测方法简单，实现了卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷含量的快速提取测定。本方法具有快速、准确，绿色，重现性好的特点。
附图说明
图1为乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的化学结构式。
图2为乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准溶液的液相色谱图。
图3为实施例1卷烟纸水提取溶液的液相色谱图。
具体实施方式
本发明结合以下实施例作进一步描述，但并不限制本发明：
实施例1
使用本发明对卷烟纸a中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷含量进行检测，步骤如下：
①样品提取：精密称取0.1000g剪碎的卷烟纸a，加入40ml纯净水，超声提取15分钟，以0.22μm的尼龙滤膜过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行分析，仪器条件如下：
液相色谱条件为，色谱柱：c18柱，规格为：3μm，4.6mm×150mm；流速：1.0ml/min；柱温：25～35℃；进样量：10μl；流动相a为乙腈，流动相b为0.1wt％甲酸水溶液；洗脱方式：梯度洗脱；检测器：二极管阵列检测器(dad)，检测波长为280nm；梯度洗脱条件为：时间0-5.00min，20wt％流动相a 80wt％流动相b；5min，40wt％流动相a 60wt％流动相b。
标准溶液配制：精确称取5.0mg的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准品于10ml的容量瓶，以水溶解定溶，即得0.50mg/ml的储备液。取2.0ml的储备液于10ml的容量瓶，以水定溶，即得一级标准溶液。根据一级标准溶液，依次制备0.5μg/ml～100μg/ml的标准液6个梯度。根据乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准溶液的浓度和峰面积获得本次实验的标准曲线方程y＝17.13767x 2.60134，相关系数r2＝0.99997测得卷烟纸a中的含量是5.80mg/g。图2为乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准溶液的液相色谱图，图3为本实施例的卷烟纸水提取溶液的液相色谱图。
实施例2
使用本发明对卷烟纸b中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷含量进行测定，步骤如下：
①样品提取：精密称取0.1000g剪碎的卷烟纸b，加入40ml纯净水，超声提取15分钟，以0.22μm的尼龙滤膜过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行分析，仪器条件同实施例1。
标准溶液配制同实施例1。根据乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准溶液的浓度和峰面积获得本次实验的标准曲线方程y＝2.0156x 0.7601，相关系数r2＝0.99989，测得卷烟纸b中的含量是3.57mg/g。
实施例3
使用本发明对卷烟纸c中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷含量进行测定，步骤如下：
①样品提取：精密称取0.1000g剪碎的卷烟纸c，加入40ml纯净水，超声提取15分钟，以0.22μm的尼龙滤膜过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行分析，仪器条件同实施例1。
标准溶液配制同实施例1。根据乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准溶液的浓度和峰面积获得本次实验的标准曲线方程y＝16.969473x 10.485246，相关系数r2＝0.999989，测得卷烟纸c中的含量是10.61mg/g。
实施例4
使用本发明对卷烟纸d中的乙基香兰素β-d-葡萄糖苷含量进行测定，步骤如下：
①样品提取：精密称取0.1000g剪碎的卷烟纸d，加入40ml纯净水，超声提取15分钟，以0.22μm的尼龙滤膜过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行分析，仪器条件同实施例1。
标准溶液配制同实施例1。根据乙基香兰素β-d-葡萄糖苷标准溶液的浓度和峰面积获得本次实验的标准曲线方程y＝21.01x-0.4885，其相关系数r2＝1.0000测得卷烟纸c中的含量是2.61mg/g。
实施例5
使用本发明对乙基香兰素β-d-葡萄糖苷样品的纯度进行测定，步骤如下：
①样品溶液制备：精密称取样品5.0mg样品溶解于10ml容量瓶，以纯净水溶解定容，超声提取15分钟，以0.22μm的尼龙滤膜过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行分析，仪器条件同实施例1。
根据面积归一化法，乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的纯度为98.6％。
以上显示和描述了本发明的主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的较优实例，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。
1.一种卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
①样品提取：称取剪碎的卷烟纸，加入水中，超声提取，过滤后得到测试样品；
②测定：采用高效液相色谱法进行检测，即得到卷烟纸中乙基香兰素β-d-葡萄糖苷的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，卷烟纸与水的质量比为1：(200-600)；超声提取5-30分钟；滤膜的孔径为0.10-0.30μm。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，液相色谱条件为，色谱柱：c18柱，规格为：3μm，4.6mm×150mm；流速：1.0ml/min；柱温：25～35℃；进样量：10μl；洗脱方式：梯度洗脱；检测器：二极管阵列检测器(dad)，检测波长为220～300nm。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，梯度洗脱条件为：时间0-5.00min，20wt％流动相a 80wt％流动相b；5min，40wt％流动相a 60wt％流动相b。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，流动相a为乙腈，流动相b为0.1wt％甲酸水溶液。
技术总结