本发明涉及培养基生产技术领域，具体是一种枯草复配培养基的生产工艺。
背景技术：
培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等，不同培养基可根据实际需要，添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子，有些微生物，如自养型微生物，不需要碳源，所以上述物质只具有一般性，枯草芽孢杆菌作为有益的微生物，目前在众多领域取得了较好的应用效果。
但是通过现有工艺制得的枯草培养基，普遍存在芽孢产率低和成本高的缺点，从而造成产量下降等问题，并且整个生产过程中，各种原料组分之间得不到精细化的管理和控制，容易造成制得的枯草培养基质量不达标，而且现有的枯草培养基中含有大量的污染物，会对周围环境带来一定的污染。因此，本领域技术人员提供了一种枯草复配培养基的生产工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种枯草复配培养基的生产工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种枯草复配培养基的生产工艺，包括以下步骤：
a、按照重量份称取以下原料：玉米粉2-6份、氢氧化钠0.05-0.4份、山楂液2-8份、甘薯5-8份、陈皮3-8份、去离子水160-190份、黄连粉3-8份、柑橘皮2-6份、甘油5-10份、氨基酸1-5份、糖5-10份、氯化钾0.5-1.5份以及磷酸二氢钾0.2-0.8份；
b、按照配比取陈皮、甘蔗和玉米粉，加入去离子水混合，浸泡1.2-1.8h后，高温蒸煮25分钟后捞出，通过双层金属过滤网将滤液过滤并保温后得到混合液一；
c、按照配比取山楂液和黄连粉，然后将柑橘皮研磨成粗粉，将粗粉过滤膜后得到细粉，并将细粉与山楂液和黄连粉混合，然后倒入氢氧化钠进行ph值调节，得到混合液二；
d、将糖、甘油和氯化钾倒入混合液一中均匀混合，将氨基酸和磷酸二氢钾倒入混合液二中均匀混合，然后将混合液一和混合液二共同混合，并在102-108℃、105-115kpa条件下灭菌11分钟，即可制得枯草复配培养基。
作为本发明再进一步的方案：所述ph值为7.2，ph值调节后，还应将混合液二在82-88℃下搅拌35min。
作为本发明再进一步的方案：所述柑橘皮在研磨成粗粉后，对粗粉过0.21-0.26μm的滤膜，过滤后得到细粉。
作为本发明再进一步的方案：所述糖为蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖或麦芽糖中的任意一种。
作为本发明再进一步的方案：所述氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸或丝氨酸中的任意一种。
作为本发明再进一步的方案：所述混合液一和混合液二共同混合并灭菌后，通过塑料袋密封包装，并将密封包装的成品堆码于22-28℃的库房内，厌氧发酵后取出。
作为本发明再进一步的方案：所述厌氧发酵时间为30-40h。
作为本发明再进一步的方案：所述山楂液的制备方法为：将山楂去核并在水中蒸煮25min后捞出，然后通过滤布过滤两次得到山楂液。
作为本发明再进一步的方案：所述山楂的蒸煮温度为80-100℃，蒸煮时将水面浮沫捞出。
作为本发明再进一步的方案：所述混合液一的保温温度为31-35℃，保温时连续搅拌活化1.2-1.8h。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：该工艺简单且操作简便，生产条件易于控制，生产成本低，各种原料组分之间可以得到精细化的管理和控制，生产出的枯草培养基质量较高，有效降低了枯草芽孢杆菌的生产成本，而且生产过程中产生的污染物含量较低，对环境污染程度小，得到的枯草芽孢杆菌具有较高的抑菌性能和稳定性能，具备一定的市场推广前景和实际应用价值。
具体实施方式
本发明实施例1中，一种枯草复配培养基的生产工艺，包括以下步骤：
a、按照重量份称取以下原料：玉米粉3份、氢氧化钠0.06份、山楂液3份、甘薯6份、陈皮3.5份、去离子水170份、黄连粉4份、柑橘皮3份、甘油6份、氨基酸2份、糖6份、氯化钾0.6份以及磷酸二氢钾0.3份；
b、按照配比取陈皮、甘蔗和玉米粉，加入去离子水混合，浸泡1.3h后，高温蒸煮25分钟后捞出，通过双层金属过滤网将滤液过滤并保温后得到混合液一；
c、按照配比取山楂液和黄连粉，然后将柑橘皮研磨成粗粉，将粗粉过滤膜后得到细粉，并将细粉与山楂液和黄连粉混合，然后倒入氢氧化钠进行ph值调节，得到混合液二；
d、将糖、甘油和氯化钾倒入混合液一中均匀混合，将氨基酸和磷酸二氢钾倒入混合液二中均匀混合，然后将混合液一和混合液二共同混合，并在103℃、106kpa条件下灭菌11分钟，即可制得枯草复配培养基。
优选的：ph值为7.2，ph值调节后，还应将混合液二在83℃下搅拌35min。
优选的：柑橘皮在研磨成粗粉后，对粗粉过0.22μm的滤膜，过滤后得到细粉。
优选的：糖为蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖或麦芽糖中的任意一种。
优选的：氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸或丝氨酸中的任意一种。
优选的：混合液一和混合液二共同混合并灭菌后，通过塑料袋密封包装，并将密封包装的成品堆码于22-28℃的库房内，厌氧发酵后取出。
优选的：厌氧发酵时间为32h。
优选的：山楂液的制备方法为：将山楂去核并在水中蒸煮25min后捞出，然后通过滤布过滤两次得到山楂液。
优选的：山楂的蒸煮温度为85℃，蒸煮时将水面浮沫捞出。
优选的：混合液一的保温温度为32℃，保温时连续搅拌活化1.3h。
本发明实施例2中，一种枯草复配培养基的生产工艺，包括以下步骤：
a、按照重量份称取以下原料：玉米粉4份、氢氧化钠0.2份、山楂液4份、甘薯6.5份、陈皮5份、去离子水175份、黄连粉5份、柑橘皮4份、甘油7份、氨基酸3份、糖7份、氯化钾1.1份以及磷酸二氢钾0.6份；
b、按照配比取陈皮、甘蔗和玉米粉，加入去离子水混合，浸泡1.6h后，高温蒸煮25分钟后捞出，通过双层金属过滤网将滤液过滤并保温后得到混合液一；
c、按照配比取山楂液和黄连粉，然后将柑橘皮研磨成粗粉，将粗粉过滤膜后得到细粉，并将细粉与山楂液和黄连粉混合，然后倒入氢氧化钠进行ph值调节，得到混合液二；
d、将糖、甘油和氯化钾倒入混合液一中均匀混合，将氨基酸和磷酸二氢钾倒入混合液二中均匀混合，然后将混合液一和混合液二共同混合，并在106℃、111kpa条件下灭菌11分钟，即可制得枯草复配培养基。
优选的：ph值为7.2，ph值调节后，还应将混合液二在85℃下搅拌35min。
优选的：柑橘皮在研磨成粗粉后，对粗粉过0.24μm的滤膜，过滤后得到细粉。
优选的：糖为蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖或麦芽糖中的任意一种。
优选的：氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸或丝氨酸中的任意一种。
优选的：混合液一和混合液二共同混合并灭菌后，通过塑料袋密封包装，并将密封包装的成品堆码于25℃的库房内，厌氧发酵后取出。
优选的：厌氧发酵时间为35h。
优选的：山楂液的制备方法为：将山楂去核并在水中蒸煮25min后捞出，然后通过滤布过滤两次得到山楂液。
优选的：山楂的蒸煮温度为88℃，蒸煮时将水面浮沫捞出。
优选的：混合液一的保温温度为33℃，保温时连续搅拌活化1.6h。
本发明实施例3中，一种枯草复配培养基的生产工艺，包括以下步骤：
a、按照重量份称取以下原料：玉米粉5份、氢氧化钠0.3份、山楂液7份、甘薯7份、陈皮7份、去离子水185份、黄连粉7份、柑橘皮5份、甘油9份、氨基酸4份、糖9份、氯化钾1.3份以及磷酸二氢钾0.7份；
b、按照配比取陈皮、甘蔗和玉米粉，加入去离子水混合，浸泡1.7h后，高温蒸煮25分钟后捞出，通过双层金属过滤网将滤液过滤并保温后得到混合液一；
c、按照配比取山楂液和黄连粉，然后将柑橘皮研磨成粗粉，将粗粉过滤膜后得到细粉，并将细粉与山楂液和黄连粉混合，然后倒入氢氧化钠进行ph值调节，得到混合液二；
d、将糖、甘油和氯化钾倒入混合液一中均匀混合，将氨基酸和磷酸二氢钾倒入混合液二中均匀混合，然后将混合液一和混合液二共同混合，并在107℃、114kpa条件下灭菌11分钟，即可制得枯草复配培养基。
优选的：ph值为7.2，ph值调节后，还应将混合液二在87℃下搅拌35min。
优选的：柑橘皮在研磨成粗粉后，对粗粉过0.25μm的滤膜，过滤后得到细粉。
优选的：糖为蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖或麦芽糖中的任意一种。
优选的：氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸或丝氨酸中的任意一种。
优选的：混合液一和混合液二共同混合并灭菌后，通过塑料袋密封包装，并将密封包装的成品堆码于27℃的库房内，厌氧发酵后取出。
优选的：厌氧发酵时间为38h。
优选的：山楂液的制备方法为：将山楂去核并在水中蒸煮25min后捞出，然后通过滤布过滤两次得到山楂液。
优选的：山楂的蒸煮温度为98℃，蒸煮时将水面浮沫捞出。
优选的：混合液一的保温温度为34℃，保温时连续搅拌活化1.7h。
对照例：未添加氢氧化钠、山楂液、甘薯、陈皮、黄连粉、柑橘皮、氨基酸、糖、氯化钾以及磷酸二氢钾，其余组分和步骤与实施例1、实施例2和实施例3均相同；
实验方法：
准备直径为10cm、高度为30cm的4根透明塑料管，使用前经过清洗、烘干和消毒后，分别注入实施例1、实施例2、实施例3以及对照例中的培养基，并将4根透明塑料管置于30-35℃的培养箱内培养，每天观察菌丝生长状态，观察结果如下表所以：
其中： 表示菌丝长势较强，较密； 表示菌丝长势弱，稀疏；
通过上述表格可知，实施例1、实施例2和实施例3的透明塑料管中的培养基，生长速度均＞3.0mm/d，长势均为 ，细菌死亡率均＜2.0，有害细菌滋生率均＜1.0，满管时间均大于＞10.0，而对照例中的培养基生长速度较慢，长势较弱，细菌死亡率较高，有害细菌滋生率高于10.0，满管时间大于18，所以通过该实施例制得的培养基生长速度快，而且长势较强，具有较高的抑菌性能和稳定性能，产生的污染物含量较低，对环境污染程度小。
以上所述的，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
1.一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：
a、按照重量份称取以下原料：玉米粉2-6份、氢氧化钠0.05-0.4份、山楂液2-8份、甘薯5-8份、陈皮3-8份、去离子水160-190份、黄连粉3-8份、柑橘皮2-6份、甘油5-10份、氨基酸1-5份、糖5-10份、氯化钾0.5-1.5份以及磷酸二氢钾0.2-0.8份；
b、按照配比取陈皮、甘蔗和玉米粉，加入去离子水混合，浸泡1.2-1.8h后，高温蒸煮25分钟后捞出，通过双层金属过滤网将滤液过滤并保温后得到混合液一；
c、按照配比取山楂液和黄连粉，然后将柑橘皮研磨成粗粉，将粗粉过滤膜后得到细粉，并将细粉与山楂液和黄连粉混合，然后倒入氢氧化钠进行ph值调节，得到混合液二；
d、将糖、甘油和氯化钾倒入混合液一中均匀混合，将氨基酸和磷酸二氢钾倒入混合液二中均匀混合，然后将混合液一和混合液二共同混合，并在102-108℃、105-115kpa条件下灭菌11分钟，即可制得枯草复配培养基。
2.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述ph值为7.2，ph值调节后，还应将混合液二在82-88℃下搅拌35min。
3.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述柑橘皮在研磨成粗粉后，对粗粉过0.21-0.26μm的滤膜，过滤后得到细粉。
4.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述糖为蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖或麦芽糖中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸或丝氨酸中的任意一种。
6.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述混合液一和混合液二共同混合并灭菌后，通过塑料袋密封包装，并将密封包装的成品堆码于22-28℃的库房内，厌氧发酵后取出。
7.根据权利要求6所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述厌氧发酵时间为30-40h。
8.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述山楂液的制备方法为：将山楂去核并在水中蒸煮25min后捞出，然后通过滤布过滤两次得到山楂液。
9.根据权利要求8所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述山楂的蒸煮温度为80-100℃，蒸煮时将水面浮沫捞出。
10.根据权利要求1所述的一种枯草复配培养基的生产工艺，其特征在于，所述混合液一的保温温度为31-35℃，保温时连续搅拌活化1.2-1.8h。
技术总结