本发明涉及植物提取物领域，特别涉及一种高纯度厚朴提取物的提取方法。
背景技术：
厚朴为木兰科植物厚朴(magnoliaofficinalisrehd.etwils.)或凹叶厚朴(magnoliaofficinalisrehd.etwils.var.bilobarehd.etwils.)的干燥干皮、根皮及枝皮，是我国一味重要的传统中药。厚朴性温，味苦辛，入脾、胃、肺、大肠经，具有燥湿消痰、下气除满的功效，主治用于湿滞伤中、脘痞吐泻、食积气滞、腹胀便秘、痰饮喘咳等症状。麻仁丸、藿香正气丸、木香顺气丸、保济丸、香砂养胃丸等传统中药及新药中均以厚朴为主药。
厚朴药材中主要有效成分为厚朴酚、和厚朴酚、异厚朴酚、四氢厚朴酚、厚朴碱等，其中以厚朴酚、和厚朴酚的含量为最高。现代研究表明，厚朴中的厚朴酚、和厚朴酚具有抗病毒、抗肿瘤，抗菌，抗溃疡，抗痉挛，镇痛抗炎，中枢性肌肉松驰，抑制吗啡戒断反应等药理作用。
随着厚朴酚与和厚朴酚在医药方面的深入研究，对厚朴酚与和厚朴酚的分离提纯方法和产物的纯度要求越来越高，而目前大多数厚朴酚与和厚朴酚的提取工艺存在生产效率低，杂质多，产物损失大等缺陷。厚朴酚类具有脂溶性、挥发性和氧化性等理化特性，在制备过程中，尤其是在提取、浓缩、精制、干燥过程中，极易引发挥发、氧化等物理和化学变化，改变了天然药物组分结构，给后来的药理药效带来不确定的因素。目前对厚朴酚与和厚朴酚的提取方法主要有：碱提酸沉法、乙醇提取法、聚酰胺分离提取法和碱提树脂吸附法等。
中国发明cn101507755a公开了一种高纯度厚朴总酚制备方法，用碱性溶液对厚朴原料进行渗漏，渗漏液加酸调至偏酸性进行酸沉，沉淀用有机溶剂索氏提取，浓缩得结晶，干燥后得到厚朴提取物产品。该工艺虽然简单，但是过程中使用大量碱液和酸液，杂质多，有效成分损失较大，且使用大量的有机溶剂提取浓缩，存在较大的安全隐患。
中国发明cn103933122a公开了一种厚朴总酚提取物的吸附分离制备工艺，使用盐酸乙醇溶液提取厚朴原料，调节ph析出沉淀，再用碱乙醇溶液溶解作为大孔树脂的吸附液，然后进行大孔树脂吸附与洗脱解吸，解吸液经减压蒸馏并回收乙醇，然后经浓缩、真空干燥，得到棕色厚朴总酚提取物。该工艺提取步骤多，大孔树脂吸附、解析及清洗回收步骤繁琐，厚朴有效成分损失大，提取效率低，且最终产物的棕色提取物中厚朴总酚含量仅略大于70％，提取物纯度较低，杂质较多，影响产品应用。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种高纯度厚朴提取物的制备方法，该方法工艺简单，可应用于工业化生产，制备的厚朴提取物总酚含量高，无有机溶剂残留，活性成分损失少，且副产物厚朴油可回收利用，具有良好的综合经济效益。
超临界co2萃取是利用超临界状态下的co2作为萃取溶剂，从液体或固体物料中萃取出某种或某些组分的一种新型分离技术。超临界co2萃取操作温度低，萃取时间短，完全避免了水、碱或醇提取过程中由湿热等因素带来的不良影响，不易发生挥发和氧化等物理和化学变化，特别适合于对湿、热和光敏感、易氧化分解物质的萃取，且超临界co2萃取法因co2化学性质不活泼、无毒无味，溶解能力和渗透能力强，扩散速度快，且是在连续流动态条件下进行，具有功效成分提取完全，效率高，无溶剂残留，可选择性分离和产品质量好等优点。但是到目前为止，所报道的文献方法中，使用超临界co2萃取技术制备厚朴提取物的研究还较少，所制备的厚朴提取物存在总酚含量不高，达不到90％以上，萃取工艺单一，没有深入研究优化萃取条件，没有充分利用超临界co2流体可选择性分离的优点。苏子仁等通过优化超临界co2萃取厚朴工艺路线和条件，并进行中试放大生产，提取物中总酚含量虽可达到77％以上，但仍难以满足市场上对于高纯度厚朴提取物的应用需求[苏子仁,雷正杰,曾健青,等.超临界co2萃取在厚朴提取工艺中的应用研究[j].中国中药杂志,2001,26(001):31]。
本发明针对现有工艺技术的生产效率低，杂质多，有效物损失大的不足，提供一种高收得率、质量安全稳定的高纯度厚朴酚与和厚朴酚提取物的超临界co2流体高效提取方法。
根据本发明实施例，一种高纯度厚朴提取物的提取方法，包括以下步骤：
将厚朴植物材料粉碎，投入超临界co2萃取设备的萃取釜中，通入超临界co2，控制萃取釜压力为20-35mpa，温度为30℃-50℃，得到萃取料；
将所述萃取料通入精馏塔，得到精馏料；其中，所述精馏塔的压力为15-18mpa；所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是下温区35±5℃，中温区40±5℃，上温区45±5℃；
将所述精馏料通入一级分离釜，一级分离釜压力为9-14mpa，温度为35-55℃，收集得到厚朴提取物。
本发明实施例的提取方法创新地通过设置超临界co2萃取工艺路线，优化控制工艺参数，使厚朴脂溶性成分先在萃取釜中被超临界co2流体溶解带出，进入精馏塔中获得初步的分离纯化，树脂等重组分成分凝析回流到精馏塔底被除去，而厚朴酚类和挥发油等轻组分则继续沿塔高方向流动，进入一级分离釜后经降压和升温条件控制，高含量厚朴酚类物质在一级分离釜直接可获得。本发明专利工艺充分发挥利用了超临界萃取技术的选择性分离特性，可快速获得高纯度的厚朴总酚提取物，方法简单，适合工业化大生产。
在一些实施例中，通入超临界co2同时或之后，可以加入夹带剂；但根据本发明不加入夹带剂的实施例，即可实现厚朴总酚90％以上的提取率。在一些实施例中，通入超临界co2之后，可以对厚朴植物材料进行浸泡，例如浸泡0.5-3小时；但根据本发明未进行浸泡的实施例，即可实现优越的提取率。对于不浸泡厚朴植物材料的实施例，当萃取釜达到所需压力即可开始运行萃取程序。
超临界co2流量的大小萃取设备规格限制，在本发明的一些实施例中，超临界co2流量约为2m3/h。根据本发明实施例，所述高纯度厚朴提取物的提取方法的总萃取时间为2-3小时。在本文中，总萃取时间是指萃取釜达到萃取压力后开始计时，到停止收料的时间。应当理解，在实际应用中，萃取时间可依据投入原料的总量和所需的产物总量而具体调整。
在本发明一些实施例中，控制所述萃取釜压力为25-30mpa，温度为35℃-50℃。
在本发明一些实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±3℃(下)，40±3℃(中)，45±3℃(上)。在一些实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±2℃(下)，40±2℃(中)，45±2℃(上)。在一些实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±1℃(下)，40±1℃(中)，45±1℃(上)。在一些具体实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35℃(下)，40℃(中)，45℃(上)。
在本发明一些实施例中，所述一级分离釜的压力为9-13mpa，温度为40-55℃。申请人发现一级分离釜的压力和温度会显著影响厚朴提取物中不同组分提取率和纯度，co2流体临界压力是7.39mpa，温度是31.06℃，因此一级分离釜压力需要达到8mpa以上，经精馏塔处理得到的精馏料流体中的厚朴油组分才能继续溶于co2流体，从而被带入进一步的分离釜中析出，所以一级分离釜的压力至少需要设置为9mpa以上。
根据本发明实施例，厚朴植物材料可以选自木兰科木兰属植物，例如厚朴(magnoliaofficinalisrehd.etwils.)、凹叶厚朴(m.officinalisrehd.etwils.var.bilobarehd.etwils.)、玉兰(m.denudatadesr.)、紫玉兰(magnolialilifloradesr.)、望春玉兰(m.biondiipampan.)和荷花玉兰(m.grandifloral.)的树皮、根皮、枝皮、叶、花、种子和芽。传统厚朴中药来自厚朴和巨叶厚朴，由于树皮、根皮中厚朴有效成分较多，因此传统上以树皮、根皮入药为主。但因其药用价值广泛，需求量大，再加上厚朴树的生长期缓慢，造成市场上供不应求的情况，为了避免厚朴资源的枯竭，因此，扩大药源同时保护和改善厚朴资源成为了学者们刻不容缓的任务。
另一方面，天然酚类物质主要是从富含这些成分的植物部位中提取获得，并且对于其他天然酚类物质，一般选用合适的萃取压力、温度和夹带剂，再经后续简单分离，即可快速获得较高纯度的提取物产品；然而，厚朴植物材料中除了厚朴酚类物质外，还含有大量的树脂、挥发性油等物质，如果采用常规化学提取方法，在提取过程中会对提取物的分离纯化造成很大的干扰。为此，本发明实施例提供一种能够从厚朴植物材料提取高纯度厚朴酚类物质的方法，并且本发明实施例方法具有很高的提取率。
对于提取效率而言，将厚朴植物材料粉碎至更细，更有利于提取效果。根据本发明实施例，可以将厚朴植物材料粉碎至20目或以上，例如粉碎至25目或以上，粉碎至30目或以上，粉碎至35或目以上。本发明实施例通过优化超临界萃取路线，在一些实施例中，将厚朴植物材料粉碎至大约20-40目即可。
根据本发明实施例，从一级分离釜收集到总酚含量大于90％的厚朴提取物。根据本发明实施例，所述提取方法，还包括：取一级分离釜收集的厚朴提取物，加入碱性溶剂，混合，静置，分层后取沉淀洗涤干燥，得到提纯厚朴提取物。根据本发明实施例，经洗涤干燥后得到总酚含量大于98％的提纯厚朴提取物。
在本发明一些实施例中，所述碱性溶剂包括碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液和氨水中的至少一种。申请人发现强碱性溶剂会对厚朴总酚有较强的溶解性，造成较大的损耗，因此本发明实施例中，优选使用弱碱性溶剂对厚朴提取物进行进一步的纯化。在一些实施例中，所述碱性溶剂的浓度为0.5％-3％。在一些具体实施中，所述碱性溶剂为氨水。在一些实施例中，加入碱性溶剂与一级分离釜收集的厚朴提取物的体积比为3-5倍。
在本发明的一些实施例中，所述提取方法，还包括：将经一级分离釜分离的流体通向二级分离釜，收集得到二级厚朴提取物。根据本发明实施例，从二级分离釜收集到总酚含量大于20％的副产物厚朴油。
根据本发明实施例，所述提取方法，还包括：取二级分离釜收集的二级厚朴提取物，投入分子蒸馏设备中进行精馏浓缩。在分子蒸馏设备的高真空条件下，厚朴油中的轻组分受热蒸发后碰到冷凝板冷凝成液，通过蒸发器底部的出料管排出，而含有厚朴酚及和厚朴酚等重组分的厚朴油则可得到浓缩精制，在一些实施例中，经精馏浓缩处理的厚朴提取物中总酚含量可达到50％以上。
本发明的有益效果是：
(1)本发明实施例的提取方法使用超临界co2萃取技术提取纯化厚朴提取物，生产过程在低温条件下进行、无溶剂残留，可避免一些情形下工艺提取温度高，易引起产物挥发、氧化等物理和化学变化，以及工序流程多，产物杂质多、损失大，生产效率低等缺陷，可最大程度保留原药的特性，且提取效率高。
(2)本发明实施例的提取方法通过优化超临界co2萃取路线，合理利用超临界co2流体可选择性分离的特点，首先通过精馏塔对提取物中的树脂物质进行脱除，再通过控制分离釜工艺参数，使得高含量厚朴总酚提取物直接可在一级分离釜收集得到，总酚含量达到90％以上；而在二级分离釜中可得到副产物厚朴油，避免一些情形下厚朴油的损失。
(3)通过进一步精制纯化，一级分离釜收集到的厚朴总酚含量大于90％的提取物可以进而纯化至总酚含量98％以上，且成品厚朴提取物颜色洁白，可满足市面上对高质量高纯度厚朴提取物的迫切需求。
(4)二级分离釜收集的厚朴油通过分子蒸馏技术，可将总酚含量20％纯化至50％以上，可用于中低端产品的应用需求，实现厚朴价值的综合利用。
附图说明
图1示出了本发明一个实施例的工艺流程示意图。
图2示出了实施例1超临界萃取一级分离釜收集的厚朴提取物(左)，实施例1一级分离釜收集厚朴提取物经精制纯化后的样品图(右)。
图3示出了厚朴酚及和厚朴酚标准品的液相色谱图。
图4示出了实施例1超临界萃取一级分离釜收集厚朴提取物的液相色谱图。
图5示出了实施例1一级分离釜收集厚朴提取物经精制纯化后的液相色谱图。
具体实施方式
厚朴为是我国一味重要的传统中药，厚朴性温，味苦辛，入脾、胃、肺、大肠经，具有燥湿消痰、下气除满的功效，主治用于湿滞伤中、脘痞吐泻、食积气滞、腹胀便秘、痰饮喘咳等症状。厚朴药材中主要有效成分为厚朴酚、和厚朴酚、异厚朴酚、四氢厚朴酚、厚朴碱等，其中以厚朴酚、和厚朴酚的含量为最高。现代研究表明，厚朴中的厚朴酚、和厚朴酚具有抗病毒、抗肿瘤，抗菌，抗溃疡，抗痉挛，镇痛抗炎，中枢性肌肉松驰，抑制吗啡戒断反应等药理作用。
随着厚朴酚与和厚朴酚在医药方面的深入研究，对厚朴酚与和厚朴酚的分离提纯方法和产物的纯度要求越来越高，而目前大多数厚朴酚与和厚朴酚的提取工艺存在生产效率低，杂质多，产物损失大等缺陷。天然酚类物质主要是从富含这些成分的植物部位中提取获得，对于厚朴中药，其传统上以树皮、根皮入药为主，但因其药用价值广泛，需求量大，再加上厚朴树的生长期缓慢，造成市场上供不应求的情况，为了避免厚朴资源的枯竭，扩大药源同时保护和改善厚朴资源已经刻不容缓。另外，厚朴植物材料中除了厚朴酚类物质外，还含有大量的树脂、挥发性油等物质，如果采用常规提取方法，在提取过程中会对提取物的分离纯化造成很大的干扰。其他天然酚类物质一般选用合适的萃取压力、温度和夹带剂，再经后续简单分离，即可快速获得较高纯度的产品，而想要获得较高纯度的厚朴酚类产品，传统工艺一般需要经过有机溶剂提取，酸碱调节，大孔树脂吸附、聚酰胺层析柱精制等步骤，整体存在工艺繁琐，操作步骤多，酚类物质损失大，提取效率低等缺点。在一些情形下，某些超临界萃取厚朴酚类的提取工艺也存在提取温度高，使用有机溶剂，导致有效成分损失大等缺陷。
有鉴于此，本发明针对现有工艺技术的生产效率低，杂质多，有效物损失大的不足，提供一种高收得率、质量安全稳定的高纯度厚朴酚与和厚朴酚提取物的超临界co2流体高效提取方法。
根据本发明实施例，一种高纯度厚朴提取物的提取方法，包括以下步骤：
将厚朴植物材料粉碎，投入超临界co2萃取设备的萃取釜中，通入超临界co2，控制萃取釜压力为20-35mpa，温度为30℃-50℃，得到萃取料；
将所述萃取料通入精馏塔，得到精馏料；其中，所述精馏塔的压力为15-18mpa；所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±5℃(下)，40±5℃(中)，45±5℃(上)；
将所述精馏料通入一级分离釜，一级分离釜压力为6-16mpa，温度为35-55℃，收集得到厚朴提取物。
超临界萃取技术是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。但应当理解，对应不同的温度和压力范围所得到的萃取物不可能是单一的，需要控制合适的条件才能得到最佳比例的混合成分，然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，被萃取物质则完全或基本析出，从而达到分离提纯的目的。
本发明实施例的提取方法创新地通过设置超临界co2萃取工艺路线，优化控制工艺参数，使厚朴脂溶性成分先在萃取釜中被超临界co2流体溶解带出，进入精馏塔中获得初步的分离纯化，树脂等重组分成分凝析回流到精馏塔底被除去，而厚朴酚类和挥发油等轻组分则继续沿塔高方向流动，进入一级分离釜后经降压和升温条件控制，高含量厚朴酚类物质在一级分离釜直接可获得。本发明专利工艺充分发挥利用了超临界萃取技术的选择性分离特性，可快速获得高纯度的厚朴总酚提取物，方法简单，适合工业化大生产。
在一些实施例中，通入超临界co2同时或之后，可以加入夹带剂；但根据本发明不加入夹带剂的实施例，即可实现厚朴总酚90％以上的提取率。在一些实施例中，通入超临界co2之后，可以对厚朴植物材料进行浸泡，例如浸泡0.5-3小时；但根据本发明未进行浸泡的实施例，即可实现优越的提取率。对于不浸泡厚朴植物材料的实施例，当萃取釜达到所需压力即可开始运行萃取程序。
超临界co2流量的大小萃取设备规格限制，在本发明的一些实施例中，超临界co2流量约为2m3/h。根据本发明实施例，所述高纯度厚朴提取物的提取方法的总萃取时间为2-3小时。在本文中，总萃取时间是指萃取釜达到萃取压力后开始计时，到停止收料的时间。在萃取程序中，co2流体在循环泵作用下，在萃取釜、精馏塔、分离釜中是循环流动的，并且萃取溶解溶质和分离析出目标产物的过程是同步在线进行的，当循环至分离釜收料口无物料可收集得到，即停止萃取反应。应当理解，在实际应用中，萃取时间可依据投入原料的总量和所需的产物总量而具体调整。
在一些实施例中，控制所述萃取釜压力为25-30mpa，温度为35℃-50℃。
在一些实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±3℃(下)，40±3℃(中)，45±3℃(上)。在一些实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±2℃(下)，40±2℃(中)，45±2℃(上)。在一些实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35±1℃(下)，40±1℃(中)，45±1℃(上)。在一些具体实施例中，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是35℃(下)，40℃(中)，45℃(上)。
本发明实施例提取方法在精馏塔内建立温度梯度，当流体向上流动时，沿塔高方向温度逐渐升高，超临界流体密度变小，溶解能力下降，厚朴根皮树脂等重组分杂质在塔内凝析而形成内回流，而厚朴酚类和挥发油等轻组分则继续沿塔高方向流动，进入分离釜一经降压或加热后，流体的溶解能力降低，得到纯度较高的厚朴总酚提取物。本发明实施例设置精馏塔温度由下到上分为三段，分别是：35±5℃(下)，40±5℃(中)，45±5℃(上)；本发明实施例还设置精馏塔的压力工艺参数为15-18mpa，压力也是影响co2流体溶解能力的一个重要因素。温度过高和变化梯度急剧会导致co2流体密度急剧变小，而溶解能力会严重下降，使得大部分厚朴酚类和挥发油等轻组分也会在精馏塔内凝析回流，无法实现厚朴酚类物质的分离纯化。发明人经过前期大量试验数据研究，得出上述特定的压力和温度梯度，可以达到最佳的分离效果。
在一些实施例中，所述一级分离釜的压力为9-13mpa，温度为40-55℃。申请人发现一级分离釜的压力和温度会显著影响厚朴提取物中不同成分提取率和纯度，co2流体临界压力是7.39mpa，温度是31.06℃，因此一级分离釜压力需要达到8mpa以上，经精馏塔处理得到的精馏料流体中的厚朴油组分才能继续溶于co2流体，从而被带入进一步的分离釜中析出，所以一级分离釜的压力至少需要设置为9mpa以上。
根据本发明实施例，厚朴植物材料可以选自木兰科木兰属植物，例如厚朴(magnoliaofficinalisrehd.etwils.)、凹叶厚朴(m.officinalisrehd.etwils.var.bilobarehd.etwils.)、玉兰(m.denudatadesr.)、紫玉兰(magnolialilifloradesr.)、望春玉兰(m.biondiipampan.)和荷花玉兰(m.grandifloral.)的树皮、根皮、枝皮、叶、花、种子和芽。
从提取效率而言，将厚朴植物材料粉碎至更细，更有利于提取效果。根据本发明实施例，可以将厚朴植物材料粉碎至20目或以上，例如粉碎至25目或以上，粉碎至30目或以上，粉碎至35或目以上。本发明实施例通过优化超临界萃取路线，在一些实施例中，将厚朴植物材料粉碎至大约20-40目即可实现厚朴总酚90％以上的提取率。
根据本发明实施例，从一级分离釜收集到总酚含量大于90％的厚朴提取物。根据本发明实施例，所述提取方法，还包括：取一级分离釜收集的厚朴提取物，加入碱性溶剂，混合，静置，分层后取沉淀洗涤干燥，得到提纯厚朴提取物。根据本发明实施例，经洗涤干燥后得到总酚含量大于98％的提纯厚朴提取物。
在本发明一些实施例中，所述碱性溶剂包括碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液和氨水中的至少一种。申请人发现强碱性溶剂会对厚朴总酚有较强的溶解性，造成较大的损耗，因此本发明实施例中，优选使用弱碱性溶剂对厚朴提取物进行进一步的纯化。在一些实施例中，所述碱性溶剂的浓度为0.5％-3％；在一些实施例中，所述碱性溶剂的浓度为约0.5％即可。在一些具体实施中，所述碱性溶剂为氨水。在一些实施例中，加入碱性溶剂与一级分离釜收集的厚朴提取物的体积比为3-5倍。
在一些实施例中，加入碱性溶剂后，将碱性溶剂与一级分离釜收集的厚朴提取物剧烈混合，从而使碱性溶剂与厚朴提取物中残留的油脂结合形成乳浊液。在一些实施例中，静置1-4小时；具体地，静置约2小时。在一些具体实施例中，静置分层后倾去上层乳浊液，底部沉淀用水洗涤，抽滤至滤液呈中性，滤饼经干燥即得到提纯厚朴提取物。
在本发明一些具体实施例中，纯化一级分离釜厚朴提取物所使用的氨水浓度很低，洗涤使用的体积量也仅为提取物的3-5倍，且氨水是呈弱碱性，能溶解厚朴总酚的量很小，纯化过程导致的酚类物质损耗率极小。氨水与厚朴提取物中残留的油脂结合形成乳浊液后，漂浮于溶液上层，与下层沉淀可明显区分开来，直接静置移除操作很简便，适用于大生产操作。
在本发明的一些实施例中，所述提取方法，还包括：将经一级分离釜分离的流体通向二级分离釜，收集得到二级厚朴提取物。根据本发明实施例，从二级分离釜收集到总酚含量大于20％的副产物厚朴油。
根据本发明实施例，所述提取方法，还包括：取二级分离釜收集的二级厚朴提取物，投入分子蒸馏设备中进行精馏浓缩。在一些实施例中，设置分子蒸馏设备的真空度为0-3pa，刮膜转速200-250r/min，一级蒸馏温度70-80℃，二级蒸馏温度150-170℃。在分子蒸馏设备的高真空条件下，厚朴油中的轻组分受热蒸发后碰到冷凝板冷凝成液，通过蒸发器底部的出料管排出，而含有厚朴酚及和厚朴酚等重组分的厚朴油则可得到浓缩精制，在一些实施例中，经精馏浓缩处理的厚朴提取物中总酚含量可达到50％以上。
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，以便于所属技术领域的人员对本发明的理解。有必要在此特别指出的是，实施例只是用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术熟练人员，根据上述发明内容对本发明作出的非本质性的改进和调整，应仍属于本发明的保护范围。同时下述所提及的原料未详细说明的，均为市售产品。
超临界co2流量的大小萃取设备规格限制，在以下实施例中，超临界co2流量均设置为2m3/h。
以下实施例中厚朴总酚含量的检测方法为：使用高效液相色谱法进行检测：色谱柱：c18柱；流动相：甲醇:水＝80:20；流速：1.0ml/min；检测波长：292nm。通过对照厚朴酚、和厚朴酚标准曲线计算样品中厚朴酚与和厚朴酚的含量，两者相加得到总酚含量。
实施例1
本实施例高纯度厚朴提取物的提取方法，包括以下步骤：
(1)取粉碎至40目的厚朴根皮100kg，投入超临界co2萃取设备的萃取釜中，通入超临界co2流体，不加入夹带剂，设置萃取釜压力为25mpa，温度为40℃；不浸泡厚朴材料，当萃取釜基本上达到设置压力即可开始运行萃取程序；超临界co2流量设置为2m3/h。将萃取料通入精馏塔，精馏塔的压力设置为15mpa，温度由下到上分为三段，分别是下温区35℃，中温区40℃，上温区45℃；得到精馏料；将所述精馏料通入一级分离釜，设置一级分离釜压力为9mpa，温度为40℃；将经一级分离釜分离的流体通向二级分离釜，设置二级分离釜压力为5mpa，温度为30℃。总萃取时间为3小时，萃取完毕后，从一级分离釜收集到淡黄色半结晶状厚朴提取物8.9kg，检测总酚含量为92.6％，从二级分离釜收集到副产物厚朴油5.8kg，检测总酚含量为22.5％。
(2)取一级分离釜收集的厚朴提取物，加入3倍浓度为0.5％的氨水溶液，剧烈搅拌使氨水与厚朴提取物中残留的油脂结合形成乳浊液，静置2小时，倾去上层乳浊液，底部沉淀加入水搅拌洗涤，抽滤至滤液呈中性，滤饼真空干燥即得到总酚含量为98.8％的提纯厚朴提取物7.8kg。
(3)取二级分离釜收集的厚朴油，投入分子蒸馏设备中，设置系统真空度0.1pa，刮膜转速220r/min，一级蒸馏温度75℃，二级蒸馏温度155℃。在高真空条件下，轻组分油可被分离出去，含有厚朴酚及和厚朴酚等重组分的厚朴油则可得到浓缩精制，收集得到总酚含量为53.4％的厚朴油2.3kg。
如图2所示，左边培养皿为实施例1超临界萃取一级分离釜收集的厚朴提取物，右边培养皿所示为实施例1一级分离釜收集厚朴提取物经精制纯化后的样品图。如图3所示为厚朴酚及和厚朴酚标准品的液相色谱图；图4所示为实施例1超临界萃取一级分离釜收集厚朴提取物的液相色谱图，总酚含量大于90％；图5所示为实施例1一级分离釜收集厚朴提取物经精制纯化后的液相色谱图，总酚含量大于98％。
由申请人试验人员检测厚朴根皮原料的数据表明，实施例中所用厚朴根皮原料中的厚朴总酚含量为10.3％。利用从一级分离釜收集到的厚朴提取物的重量和总酚含量，以及从二级分离釜收集到的的二级厚朴提取物的重量和总酚含量，可以计算出实施例1一级分离釜提取物的厚朴总酚提取率为：(8.9×92.6％ 5.8×22.5％)÷(100×10.3％)＝92.7％。
实施例2
本实施例高纯度厚朴提取物的提取方法，包括以下步骤：
(1)取粉碎至25目的厚朴根皮100kg，投入超临界co2萃取设备的萃取釜中，通入超临界co2流体，不加入夹带剂，设置萃取釜压力为28mpa，温度为42℃；不浸泡厚朴材料，当萃取釜基本上达到设置压力即可开始运行萃取程序；超临界co2流量设置为2m3/h。将萃取料通入精馏塔，精馏塔的压力设置为18mpa，温度由下到上分为三段，分别是下温区34℃，中温区40℃，上温区47℃；得到精馏料；将所述精馏料通入一级分离釜，设置一级分离釜压力为12mpa，温度为45℃；将经一级分离釜分离的流体通向二级分离釜，设置二级分离釜压力为6mpa，温度为35℃。总萃取时间为2.5小时，萃取完毕后，从一级分离釜收集到淡黄色半结晶状厚朴提取物9.2kg，检测总酚含量为91.8％，从二级分离釜收集到副产物厚朴油5.6kg，检测总酚含量为23.7％。
(2)取一级分离釜收集的厚朴提取物，加入5倍浓度为0.5％的氨水溶液，剧烈搅拌使氨水与厚朴提取物中残留的油脂结合形成乳浊液，静置2小时，倾去上层乳浊液，底部沉淀加入水搅拌洗涤，抽滤至滤液呈中性，滤饼真空干燥即得到总酚含量为98.6％的提纯厚朴提取物8.1kg。
(3)取二级分离釜收集的厚朴油，投入分子蒸馏设备中，设置系统真空度3pa，刮膜转速230r/min，一级蒸馏温度80℃，二级蒸馏温度160℃。在高真空条件下，轻组分油可被分离出去，含有厚朴酚及和厚朴酚等重组分的厚朴油则可得到浓缩精制，收集得到总酚含量为53.6％的厚朴油2.4kg。
利用从一级分离釜收集到的厚朴提取物的重量和总酚含量，以及从二级分离釜收集到的的二级厚朴提取物的重量和总酚含量，可以计算出实施例2一级分离釜提取物的厚朴总酚提取率为：(9.2×91.8％ 5.6×23.7％)÷(100×10.3％)＝94.9％。
实施例3
本实施例高纯度厚朴提取物的提取方法，包括以下步骤：
(1)取粉碎至30目的厚朴根皮100kg，投入超临界co2萃取设备的萃取釜中，通入超临界co2流体，不加入夹带剂，设置萃取釜压力为26mpa，温度为50℃；不浸泡厚朴材料，当萃取釜基本上达到设置压力即可开始运行萃取程序；超临界co2流量设置为2m3/h。将萃取料通入精馏塔，精馏塔的压力设置为16mpa，温度由下到上分为三段，分别是下温区36℃，中温区40℃，上温区46℃；得到精馏料；将所述精馏料通入一级分离釜，设置一级分离釜压力为10mpa，温度为50℃；将经一级分离釜分离的流体通向二级分离釜，设置二级分离釜压力为7mpa，温度为40℃。总萃取时间为3小时，萃取完毕后，从一级分离釜收集到淡黄色半结晶状厚朴提取物9.1kg，检测总酚含量为92.2％，从二级分离釜收集到副产物厚朴油5.5kg，检测总酚含量为20.9％。
(2)取一级分离釜收集的厚朴提取物，加入4倍浓度为0.5％的氨水溶液，剧烈搅拌使氨水与厚朴提取物中残留的油脂结合形成乳浊液，静置2小时，倾去上层乳浊液，底部沉淀加入水搅拌洗涤，抽滤至滤液呈中性，滤饼真空干燥即得到总酚含量为99.1％的提纯厚朴提取物8.1kg。
(3)取二级分离釜收集的厚朴油，投入分子蒸馏设备中，设置系统真空度3pa，刮膜转速250r/min，一级蒸馏温度75℃，二级蒸馏温度170℃。在高真空条件下，轻组分油可被分离出去，含有厚朴酚及和厚朴酚等重组分的厚朴油则可得到浓缩精制，收集得到总酚含量为52.5％的厚朴油2.1kg。
利用从一级分离釜收集到的厚朴提取物的重量和总酚含量，以及从二级分离釜收集到的的二级厚朴提取物的重量和总酚含量，可以计算出实施例3一级分离釜提取物的厚朴总酚提取率为：(9.1×92.2％ 5.5×20.9％)÷(100×10.3％)＝92.6％。
本发明实施例的提取方法使用超临界co2萃取技术提取纯化厚朴提取物，生产过程在低温条件下进行，实施例中萃取温度最高不超过50℃，整个提取纯化过程中最高温度不超过55℃；实施例中并没有使用夹带剂，产物无溶剂残留，从而避免一些情形下工艺提取温度高，易引起产物挥发、氧化等物理和化学变化，以及工序流程多，产物杂质多、损失大，生产效率低等缺陷，可最大程度保留原药的特性，且提取效率高。
本发明实施例的提取方法通过优化超临界co2萃取路线，合理利用超临界co2流体可选择性分离的特点，首先通过精馏塔对提取物中的树脂物质进行脱除，再通过控制分离釜工艺参数，使得高含量厚朴总酚提取物直接可在一级分离釜收集得到，总酚含量达到90％以上；而在二级分离釜中可得到副产物厚朴油，避免一些情形下厚朴油的损失。通过计算可知，上文实施例的厚朴总酚提取率最高可以接近95％。
通过进一步精制纯化，一级分离釜收集到的厚朴总酚含量大于90％的提取物可以进而纯化至总酚含量98％以上，且成品厚朴提取物颜色洁白，可满足市面上对高质量高纯度厚朴提取物的迫切需求。二级分离釜收集的厚朴油通过分子蒸馏技术，可将总酚含量20％纯化至50％以上，可用于中低端产品的应用需求，实现厚朴价值的综合利用。本发明提取方法充分发挥利用了超临界萃取技术的选择性分离特性，可快速获得高纯度的厚朴总酚提取物，方法简单，制程时间短，工艺绿色环保，适合工业化大生产。
以上内容是结合具体的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
1.一种高纯度厚朴提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
将厚朴植物材料粉碎，投入超临界co2萃取设备的萃取釜中，通入超临界co2，控制萃取釜压力为20-35mpa，温度为30℃-50℃，得到萃取料；
将所述萃取料通入精馏塔，得到精馏料；其中，所述精馏塔的压力为15-18mpa；所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是下温区35±5℃，中温区40±5℃，上温区45±5℃；
将所述精馏料通入一级分离釜，一级分离釜压力为9-14mpa，温度为35-55℃，收集得到厚朴提取物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，控制所述萃取釜压力为25-30mpa，温度为35℃-50℃。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述精馏塔的温度由下至上分三段，分别是下温区35±3℃，中温区40±3℃，上温区45±3℃。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述一级分离釜的压力为9-13mpa，温度为40-55℃。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述厚朴植物材料可以选自木兰科木兰属植物的树皮、根皮、枝皮、叶、花、种子和芽；其中，所述木兰科木兰属植物包括厚朴、凹叶厚朴、玉兰、紫玉兰、望春玉兰和荷花玉兰。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，将所述厚朴植物材料粉碎至20目或以上。
7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，还包括：取一级分离釜收集的厚朴提取物，加入碱性溶剂，混合，静置，分层后取沉淀洗涤干燥，得到提纯厚朴提取物。
8.根据权利要求7所述的提取方法，其特征在于，所述碱性溶剂包括碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液和氨水中的至少一种。
9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，还包括：将经一级分离釜分离的流体通向二级分离釜，收集得到二级厚朴提取物。
10.根据权利要求9所述的提取方法，其特征在于，还包括：取二级分离釜收集的二级厚朴提取物，投入分子蒸馏设备中进行精馏浓缩。
技术总结