本发明属于化妆品领域，具体涉及一种面膜液的制备方法及面膜产品。
背景技术：
：天然化妆品如今越来越受到人们的青睐。天然化妆品，除了配方成分天然以外，同时不添加香精、防腐剂等具有潜在刺激性成分。酶解作为一种广泛应用于食品、药品及化妆品领域的技术，可将大分子成分改造成小分子，并伴随多糖、多肽等其他活性物质产生。植物中含有的酶多种多样，有蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、酯酶等，利用植物中含有的酶可以将大分子蛋白质酶解成寡肽，将淀粉、纤维素酶解成寡糖，将脂肪酶解成甘油、脂肪酸。将这些产物应用在化妆品中，更有利于皮肤吸收功效成分，最终达到一定的功效。技术实现要素：因此，本发明的目的在于克服现有技术中的缺陷，提供一种面膜液的制备方法及面膜产品。本发明的第一方面提供了一种面膜液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)将菠萝清洗去皮切块后与水混合打浆，制得菠萝处理液作为酶液；(2)将燕麦、青稞、薏仁进行物理破碎后备用，与水混合，加热，得到预处理液；(3)向步骤(2)所得预处理液中加入步骤(1)所得菠萝处理液，加热搅拌，过滤得上清液，制得酶解处理液；(4)向步骤(3)所得上清液中加入银耳多糖，均质得所述面膜液。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(1)中，菠萝与水的比例为1:0.1～20g/ml，优选为1:0.2～10g/ml，更优选为1:0.5～5g/ml，进一步优选为1:1g/ml。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(2)中，所述燕麦、青稞、薏仁粉碎后过80目筛。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(2)中，所述预处理液中各原料成分的重量份数配比为：燕麦1～10份，青稞0.5～5份，薏仁0.5～5份，水100份；优选地，燕麦1～6份，青稞0.5～3份，薏仁0.5～3份，水100份；更优选地，燕麦2～5份，青稞1～2份，薏仁1～2份，水100份。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(2)中，所述加热温度为20～50℃，优选为25～100℃，更优选为30～90℃，进一步优选为65～80℃；所述加热时间为0.1～5小时，优选为0.1～2小时，更优选为0.5～1.5小时，进一步优选为0.5～1小时；和/或所述搅拌速率为10～800r/min，优选为10～500r/min，更优选为50～400r/min，进一步优选为250～400r/min。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(3)中，步骤(1)所得菠萝处理液和步骤(2)所得预处理液的加入比例为1:1～500g/ml，优选为1:5～400g/ml，更优选为1:10～200g/ml，进一步优选为1:50～100g/ml。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(3)中，所述加热温度为20～150℃，优选为25～100℃，更优选为30～90℃，进一步优选为30～60℃；所述加热时间为0.1～5小时，优选为0.5～3小时，更优选为0.5～2小时，进一步优选为1～2小时；和/或所述搅拌速率为10～800r/min，优选为10～500r/min，更优选为20～300r/min，最优选为100r/min。根据本发明第一方面的方法，其中，步骤(4)中，银耳多糖与步骤(3)所得酶解处理液的比例为1:1～2000g/ml，优选为1:100～1500g/ml；更优选为1:100～1000g/ml，最优选为1:100～500g/ml；和/或所述均质时间为1～60分钟，优选为1～30分钟，更优选为1～20分钟，进一步优选为5～10分钟。根据本发明第一方面的方法，其中，所述方法进一步包括以下步骤：(5)对步骤(4)所得面膜液进行灭菌；优选地，所述灭菌温度为80～100℃，更优选为80℃；和/或所述灭菌时间为1～5小时，更优选为1小时。本发明的第二方面提供了一种面膜产品，所述面膜产品包括按照第一方面所述方法制备的面膜液。本发明提供了一种面膜液的制备方法，所述方法包括：(1)将菠萝与水混合打浆制备预处理液，作为酶液。(2)将燕麦、青稞、薏仁进行物理破碎后备用，与水混合，加热。(3)(2)中加入(1)预处理液，加热搅拌制备酶解处理液。(4)将(3)中提取液过滤除去杂质，加入银耳多糖，均质得所述面膜液。(5)100℃2h灭菌，无菌条件下灌装。步骤(2)中，所述燕麦和水的比例为1:1～300g/ml，优选为1:5～200g/ml，更优选为1:20～150g/ml，最优选为1:80g/ml；所述青稞和水的比例为1:1～500g/ml，优选为1:10～300g/ml，更优选为1:30～200g/ml，最优选为1:100g/ml；所述薏仁和水的比例为1:1～200g/ml，优选为1:30～150g/ml，更优选为1:50～150g/ml，最优选为1:100g/ml；所述菠萝提取液和(2)中预处理液的比例为1:1～500g/ml，优选为1:5～400g/ml，更优选为1:10～200g/ml，最优选为1:50g/ml；所述加热温度为1～150℃，优选为1～100℃，更优选为10～90℃，最优选为70℃；所述加热时间为0.1～5小时，优选为0.1～2小时，更优选为0.5～1.5小时，最优选为1小时所述搅拌速率为10～800r/min，优选为10～500r/min，更优选为50～400r/min，最优选为300r/min。步骤(3)中，所述加热温度为1～150℃，优选为1～100℃，更优选为20～90℃，最优选为35℃；所述加热时间为0.1～5小时，优选为0.5～3小时，更优选为0.5～2小时，最优选为1.5小时所述搅拌速率为10～800r/min，优选为10～500r/min，更优选为20～300r/min，最优选为100r/min。步骤(4)中，银耳多糖的加入量为1:1～2000，优选为1:100～1500；更优选为1:200～1000，最优选为1:500；所述均质速度为1000～20000r/min，优选为2000～15000r/min，更优选为2500～10000r/min；最优为6000r/min；均质时间为1～60分钟，优选为1～30分钟，更优选为1～20分钟，最优选为10分钟。本发明的面膜液可以具有但不限于以下有益效果：本发明的面膜液除了配方成分天然以外，同时不添加香精、防腐剂等具有潜在刺激性成分。试验证明，本发明面膜液对成纤维细胞的增殖具有促进作用，具有一定的透皮吸收效果，本面膜液可显著提高胶原蛋白的含量，达到抗衰老的功效。附图说明以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：图1示出了实施例1中220nm样品1的hplc图谱。图2示出了实施例1中220nm样品2的hplc图谱。图3示出了实施例1中220nm样品3的hplc图谱。图4示出了实施例1中220nm空白组的hplc图谱。图5示出了试验例1中本发明不同浓度的面膜液对成纤维细胞的毒性结果。图6示出了试验例2中本发明面膜液的透皮吸收结果。图7示出了试验例3中本发明面膜液对成纤维细胞内胶原蛋白含量的影响测试结果。具体实施方式下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。本部分对本发明试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在上下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。以下实施例中使用的试剂和仪器如下：试剂：菠萝，购自广东省湛江市红星农场；银耳多糖，购自上海辉文生物技术股份有限公司；燕麦(炒制熟)购自张家口建军燕麦食品有限公司；青稞、薏仁购自北京同仁堂；橄榄油购自云南誉成隆经贸有限公司仪器：均质机，购自ika，型号：t25。实施例1本实验探究了菠萝作为酶液、燕麦作为底物时，酶液与底物的比例对燕麦多肽分子量的影响。实验方法为以下步骤：(1)将菠萝清洗去皮切块后与水按照1：1的质量比混合打浆，制得菠萝酶液(1)。(2)将燕麦与水按照质量比1：25混合，得到预处理液(2)。(3)预处理液(2)中按照不同质量比加入菠萝酶液(1)。菠萝酶液(1)与预处理液(2)的比例分别为1：200、1：100、1：50，所得的混合液编号分别为样品1、样品2、样品3，其中空白组为不加入菠萝酶液的预处理液(2)。(4)将(3)中的混合液于35度保温1小时，后置于95度水浴0.5小时使酶灭活。(5)将(4)中的混合液于5000rpm离心20分钟得到上清液。(6)利用高效液相色谱法对上清液的多肽分子量进行测定。具体测定方法如下：(1)色谱条件色谱柱：tskgel2000swxl300mm×7.8mm流动相：0.05mol/l磷酸盐缓冲液(ph7) 0.3mol/lnacl检测波长：uv220nm流速：1ml/min柱温：25℃样品制备：以流动相为溶剂配制浓度为5mg/ml的样品，再在用微孔膜(0.45μm)过滤后供进样。标准样品：将牛血清蛋白(mr67000)、b12(mr1335)、氧化型谷胱甘肽(mr614)配成混标，每中物质含量均为5mg/ml。(2)标准曲线的测定将三种标准样品按5mg/ml配制，按照上述色谱条件制作标准曲线，采用最小二乘法，求出直线的回归方程为：y＝-0.3913x 7.4563，其回归系数r2＝0.9982由方程的回归系数r2＝0.9982可知，混合标样的标准曲线线性关系较好，可以提高计算的精确程度。关系式中x代表洗脱时间，y代表分子量对数。这样当面膜样品进行hplc分析时，即可通过洗脱图谱中每种物质洗脱峰的出现时间计算其对应的分子量。(3)分子量测定结果图1至图4分别示出了实施例1中220nm样品1、样品2、样品3和空白组的hplc图谱。样品1、样品2、样品3和空白组的出峰时间、面积和分子量如下表1所示。表1样品1、样品2、样品3和空白组的出峰时间、面积和分子量实验结果与讨论：空白组样品中，分子量为188618.64da的多肽含量为28.89％，分子量为1994.77da多肽含量为71.11％。而样品1中，分子量为1742.52da的多肽含量为91.3％；样品2中，分子量为2032.69da的多肽含量为99.64％；样品3中，分子量为2043.28da的多肽含量为100％。结果表明，与空白组相比，加入菠萝酶液所得的上清液中，分子量为2000da左右的多肽占比增加，尤其在样品3中，菠萝中的蛋白酶能够将空白组中28.89％的188618.64da多肽分子降解为2043.28da的多肽分子。由此说明，菠萝蛋白酶能够降解燕麦中的高分子量的多肽成为较低分子量多肽，并且对比样品1、样品2、样品3的多肽分子量分布结果，最终选定后续实验中菠萝酶液与燕麦混合液的比例为1：50。实施例21.原料处理(食品级)燕麦、青稞、薏仁：将燕麦、青稞、薏仁粉碎后过80目备用。菠萝：清洗、去皮、切块，1:1(g/ml)与水混合后打浆制得菠萝处理液，作为酶液使用。2.面膜液制备(1)燕麦、青稞、薏仁和水添加比例如表1所示。表1预处理液的原料比例原料质量份数水100燕麦5青稞2薏仁2(2)65℃加热1小时，250rad/min进行搅拌；冷却至室温。(3)菠萝处理液与(1)中预处理液按照质量比1：50(g/ml)比例混合，30℃加热2小时。50rad/min进行搅拌；冷却至室温，过滤除去杂质，留上清液(不透明)，制得酶解处理液。(3)按照银耳多糖与步骤(3)所得酶解处理液1：100(g/ml)比例向步骤(3)所得酶解处理液中加入银耳多糖，均质机均质5分钟。3、面膜液灭菌处理面膜液装入面膜袋，80℃灭菌1小时。实施例31.原料处理(食品级)燕麦、青稞、薏仁：将燕麦、青稞、薏仁粉碎后过80目备用。菠萝：清洗、去皮、切块。1:1(g/ml)与水混合后打浆制得菠萝处理液，作为酶液使用。2.面膜液制备(1)燕麦、青稞、薏仁和水添加比例如表2所示。表2预处理液的原料比例原料质量份数水100燕麦2青稞1薏仁1(2)80℃加热0.5小时，400rad/min进行搅拌；冷却至室温。(3)菠萝处理液与(2)中预处理液按照质量比1：50(g/ml)比例混合，60℃加热1小时。200rad/min进行搅拌；冷却至室温，过滤除去杂质，留上清液(不透明)，制得酶解处理液。(3)按照银耳多糖与步骤(3)所得酶解处理液1：500(g/ml)比例向步骤(3)所得酶解处理液中加入银耳多糖，均质机均质10分钟。3、面膜液灭菌处理面膜液装入面膜袋，80℃灭菌1小时。试验例1本试验例用于说明实施例2制备提取液面膜的对成纤维细胞的增殖的影响。成纤维细胞毒性实验(mtt)收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100μl(96孔板),铺板使待测细胞调密度至5000个/孔，(边缘孔用无菌pbs填充)，5％co2，37℃孵育，至细胞生长至一定密度，换液加入不同浓度梯度的待测药品，以不含待测药品的培养液为对照。5％co2，37℃孵育24小时，每孔加入20μlmtt溶液(5mg/ml，即0.5％mtt四唑盐)，继续培养4h。使药物与mtt充分反应，可先离心后弃去培养液，小心用pbs冲2-3遍后，再加入含mtt的培养液(fm-fibroblastmedium购自sciencell)。终止培养，小心吸去孔内培养液。每孔加入150μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪od值490nm处测量各孔的吸光值。细胞活率＝(测定孔od值-空白对照od值)/(细胞对照组od值-空白对照od值)*100％。结果：对比样品不同浓度梯度的试验结果。考察不同浓度的面膜液对成纤维细胞的毒性。结果如图5所示。实验结果表明该面膜液未检出明显的细胞毒性，且在样品浓度为2.5％、10％时，细胞存活率明显增加，约为140％。说明本面膜液对成纤维细胞的增殖具有促进作用。试验例2本试验例用于说明实施例3制备面膜液的透皮吸收结果。(1)鼠皮的制备将裸鼠脱颈椎处死，迅速将其背部毛用剃须刀剃净，剥离背部皮肤并除去皮下脂肪，血管，用蒸馏水反复冲洗至净，再用生理盐水冲洗数遍，置-80℃冰箱中冷藏备用(在5天内用完)。(2)franz扩散池进行体外透皮吸收实验实验过程:向体外渗透扩散装置恒温槽中加入适量水。开启电源和恒温槽磁力搅拌，设定恒温槽中水温为37±0.1℃。将制备好的鼠皮用铁夹子固定在两室扩散池之间，向垂直扩散池的接受池内加入5ml接受液，放入体外渗透扩散装置恒温槽中预热，设定接受池搅拌速度为400r/min。向供给池内分别加入供给液，以保鲜膜封住上口。开始记时，当样品渗透0、2、4、6、8、24小时(根据实际样品确定具体时间间隔)，分别取样500μl置具塞离心管中，每次取样的同时向接受池中补充等量的接受液并排除池中的气泡。将测定样品透明质酸钠含量。再根据一下公式计算出累积透过量q(mg/cm2)。其中，扩散池底部直径为1.50cm，样品接触面积为1.77cm2。注:q为累积透过量，s为透皮扩散面积，v为改进franz扩散池接受室的体积，cn为第n次取样时接受液的浓度，ci为第i次取样时接受液的浓度，0.5为取样量。通过以上公式计算后，做出累积量与时间的曲线图。接受液为浓度为0.9％的nacl溶液(生理盐水)；供给液分别为待检测样品。结果：以多糖为考察指标，测试结果如图6。在保证待测液总糖含量一致的情况下，在0-24h面膜液作用时间内，多糖透过率随作用时间延长而不断增加。说明本面膜液具有一定的透皮吸收效果。试验例3本试验例用于说明实施例3制备面膜液对成纤维细胞弹性蛋白含量的影响。本实施例中采用人弹性蛋白酶elisa试剂盒(cusabio，96t)成纤维细胞弹性蛋白含量进行检测。(1)实验准备：a.标准品配置：从试剂盒中取一支标准品，于6000-10000rpm离心30s。用1ml样本稀释液溶解，并用枪头对准冻存管底部反复吸打5次以助溶解，充分混匀得到标准品s7。取7只1.5mlep管(s0-s6)依次排列，各加入350μl样本稀释液。吸取350μl标准品s7到第一个离心管(s6)，轻轻吹打混匀。从s6中吸取350μl到第二个ep管中(s5)，轻轻吹打均匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。s0位样本稀释液。b.洗涤工作液：浓洗涤液按1：25倍用去离子水进行稀释。c.生物素标记抗体工作液：生物素标记抗体液按1：100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释，取10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液，轻轻混匀，10分钟内配妥。d.辣根过氧化物酶标记亲和素工作液：辣根过氧化酶标记亲和素按1：100倍用辣根过氧化酶标记亲和素稀释液进行稀释，取10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，轻轻混匀，10分钟内配妥。(2)具体实验操作流程a.将各种试剂移至室温(18-25℃)平衡至少30min，按前述方法配置试剂，备用。b.加样：分别设标准孔、待测样品孔。每孔分别加标准品或待测样本100μl，轻轻晃动摇匀，覆上板贴，37℃温育2小时。c.弃去液体，甩干，不用洗涤。d.每孔加生物素标记抗体工作液100μl，覆上新的板贴，37℃温育1小时。e.弃去孔内液体，甩干，洗板3次。每次浸泡2min，200μl每孔，甩干。f.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液100μl，覆上新的板贴，37℃温育1小时g.弃去孔内液体，甩干，洗板5次。每次浸泡2分钟，200μl/每孔，甩干。h.依次每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色15-30分钟。i.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应。j.在反应终止后5min内用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的od值。k.计算：根据浓度和od值算出标准曲线和回归方程，用专用软件elisacalc进行计算，拟合模型选用logistic曲线1。结论：面膜液对成纤维细胞内弹性蛋白含量的影响测试结果如图7。模型组是只通过uva照射、未添加样品的细胞组，空白组为未照射且未添加样品的细胞组，阳性对照组为uva照射后，添加阳性对照样品的细胞组(阳性对照样品中添加vc；作用浓度为：0.15mg/ml)。经试验发现uva照射会严重损伤细胞的弹性蛋白，样品组与模型组、空白组和阳性对照组对比，本面膜液极其显著提高成纤维细胞弹性蛋白的含量，达到抗衰老的作用。尽管本发明已进行了一定程度的描述，明显地，在不脱离本发明的精神和范围的条件下，可进行各个条件的适当变化。可以理解，本发明不限于所述实施方案，而归于权利要求的范围，其包括所述每个因素的等同替换。当前第1页1 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技术特征：1.一种面膜液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将菠萝清洗去皮切块后与水混合打浆，制得菠萝处理液作为酶液；
(2)将燕麦、青稞、薏仁进行物理破碎后备用，与水混合，加热，得到预处理液；
(3)向步骤(2)所得预处理液中加入步骤(1)所得菠萝处理液，加热搅拌，过滤得上清液，制得酶解处理液；
(4)向步骤(3)所得酶解处理液中加入银耳多糖，均质得所述面膜液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，菠萝与水的比例为1:0.1～20g/ml，优选为1:0.2～10g/ml，更优选为1:0.5～5g/ml，进一步优选为1:1g/ml。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述燕麦、青稞、薏仁粉碎后过80目筛。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述预处理液中各原料成分的重量份数配比为：
燕麦1～10份，青稞0.5～5份，薏仁0.5～5份，水100份；
优选地，燕麦1～6份，青稞0.5～3份，薏仁0.5～3份，水100份；
更优选地，燕麦2～5份，青稞1～2份，薏仁1～2份，水100份。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述加热温度为20～50℃，优选为25～100℃，更优选为30～90℃，进一步优选为65～80℃；
所述加热时间为0.1～5小时，优选为0.1～2小时，更优选为0.5～1.5小时，进一步优选为0.5～1小时；和/或
所述搅拌速率为10～800r/min，优选为10～500r/min，更优选为50～400r/min，进一步优选为250～400r/min。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，步骤(1)所得菠萝处理液和步骤(2)所得预处理液的加入比例为1:1～500g/ml，优选为1:5～400g/ml，更优选为1:10～200g/ml，进一步优选为1:50～100g/ml。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述加热温度为20～150℃，优选为25～100℃，更优选为30～90℃，进一步优选为30～60℃；
所述加热时间为0.1～5小时，优选为0.5～3小时，更优选为0.5～2小时，进一步优选为1～2小时；和/或
所述搅拌速率为10～800r/min，优选为10～500r/min，更优选为20～300r/min，最优选为100r/min。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，银耳多糖与步骤(3)所得酶解处理液的比例为1:1～2000g/ml，优选为1:100～1500g/ml；更优选为1:100～1000g/ml，最优选为1:100～500g/ml；和/或
所述均质时间为1～60分钟，优选为1～30分钟，更优选为1～20分钟，进一步优选为5～10分钟。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括以下步骤：
(5)对步骤(4)所得面膜液进行灭菌；
优选地，所述灭菌温度为80～100℃，更优选为80℃；和/或所述灭菌时间为1～5小时，更优选为1小时。
10.一种面膜产品，其特征在于，所述面膜产品包括按照权利要求1至9中任一项所述方法制备的面膜液。
技术总结本发明提供了一种面膜液的制备方法，还提供了其面膜产品。本发明的面膜液除了配方成分天然以外，同时不添加香精、防腐剂等具有潜在刺激性成分。试验证明，本发明面膜液对成纤维细胞的增殖具有促进作用，具有一定的透皮吸收效果，本面膜液可显著提高胶原蛋白的含量，达到抗衰老的功效。
技术研发人员：霍彤;吴迪;王昌涛;鹿发展;高思宇;安全
受保护的技术使用者：云南白药集团股份有限公司;北轻家化(黄山)科技有限公司
技术研发日：2021.04.16
技术公布日：2021.08.03
