本发明属于化妆品，医药，生物材料等领域，具体为一种积雪草活性物高活性高纯度的提取方法以及高效靶向促进皮肤弹性胶原再生的组合物的制备方法及其应用。
背景技术：
：人体衰老是自然界中不可抵挡的现象，随着年龄的增长，弹性胶原代谢更新能力会逐渐减弱，皮肤的弹性，柔韧性及皱纹的形成与皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白的含量极度相关，当人体弹性胶原开始分解降低时，就会出现皮肤弹性减弱，皮肤下垂等问题，促进人体胶原蛋白和弹性蛋白的再生会降低皮肤弹性衰减的速度。在以往的研究报道中，对人体胶原蛋白再生及抗衰产品中积雪草的应用较多，积雪草中活性成分主要是皂苷及皂苷元类，包括积雪草苷，羟基积雪草苷，积雪草酸和羟基积雪草酸等，在抗衰抗皱的护肤品中应用较为广泛。但是大多数只将积雪草提取物作为单一活性物加入产品中使用，导致其抗衰功效有限。本发明改善了积雪草作为单一活性成分在化妆品中功效不足的问题，本发明提供了一种活性组合物及其制备方法，五种活性组合物之间通过协同增效，提升单个组分的活性功效，当其应用于化妆品产品中时，能够高效靶向促进弹性胶原再生，抵抗皮肤衰老。积雪草具有抗抑郁，促进伤口愈合，消除瘢痕，抗肿瘤，消炎抗菌，舒缓修复，刺激纤维细胞或表皮再生，具有丰富的药理活性。一直以来其活性物的提取深受广大研究者的关注。根据以往的研究报道可知积雪草提取物众多提取方法中超临界co2提取法萃取率高且环保，但是该技术对于极性组分的萃取受限，提取纯度不高，本发明改善了该萃取工艺问题，在超临界流体中加入夹带剂，从而提高了积雪草提取物的萃取率和活性。技术实现要素：本发明的在于提出一种制备更高活性高纯度的积雪草提取物的方法。该方法较以往传统的提取方法更环保且可提高积雪草活性物的纯度和活性。本发明的再一目的在于提供一种高效且促进皮肤弹性胶原再生的活性组合物。不同的活性组合物通过不同机理而起到协同增效作用，相对于单个活性药物，组合物具有明显促进皮肤胶原再生的功效。本发明的第三目的在于提出上述五种活性组合物的一种最佳制备方法。本发明的第四目的在于提出含有上述五种活性组合物的护肤组合物及其功效，该护肤组合物除了能促进弹性胶原再生功效外，还有皮肤屏障受损舒缓修复及皮肤美白，持久保湿的作用。本发明的第五目的在于提出上述活性组合物的在护肤品剂型中的应用示例。本申请的具体技术方案如下：用于增加积雪草活性物提取含量的夹带剂，包括80％乙醇、甲醇。优选方案为，所述积雪草样品:夹带剂的质量比为1:1-1:8，所述80％乙醇：甲醇的体积比范围9:1-5:1。一种积雪草提取物的制备方法，步骤如下：1)取干燥的积雪草全草，粉碎后过80目筛，得积雪草颗粒；2)将积雪草颗粒放入真空干燥器中，120℃真空干燥3h，放入干燥器中备用；3)取一定量干燥好的积雪草颗粒，加入萃取釜，选取夹带剂比例，将选定比例的夹带剂定量加入萃取釜中，浸泡24小时后设定萃取的温度、萃取压力及夹带剂流量，开始进行萃取；所述夹带剂为权利要求1或2所得夹带剂；4)萃取结束后用0.45μm微孔滤膜进行过滤，检测积雪草活性提取物的浓度。高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，tween-801.0-1.5重量份，纯水补足至100重量份，所述积雪草提取物根据权利要求3所述的制备方法获得。高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物的制备方法，步骤如下：a相制备：将配方量积雪草提取物、腺苷、咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足；直至混合均匀恢复室温即可。高效靶向促进弹性胶原再生面部精华液，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，丁二醇0.5-2.0重量份，1，2-戊二醇0.5-1.5重量份，防腐剂0.1-1.0重量份，保湿剂0.1-0.5重量份，tween-801.0-1.5重量份，纯水补足至100重量份。高效靶向促进弹性胶原再生面部眼霜，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，丁二醇0.5-2.0重量份，1，2-戊二醇0.5-1.5重量份，保湿剂0.5-2.0重量份，tween-801.0-1.5重量份，乳化剂0.5-1.0重量份，增稠剂0.1-0.5重量份，香味剂0.05-0.5重量份，防腐剂0.1-1.0重量份，纯水补足至100重量份。高效靶向促进弹性胶原再生面部面霜，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，丁二醇0.5-2.0重量份，1，2-己二醇0.5-1.5重量份，保湿剂0.5-2.0重量份，tween-801.0-1.5重量份，乳化剂0.5-1.0重量份，增稠剂0.1-0.5重量份，香味剂0.05-0.3重量份，纯水补足至100重量份。与现有技术相比，本发明的特点和有益效果是：1.夹带剂的加入可增加超临界流体co2的密度，增大非极性物质的溶解度。同时加入夹带剂可调节萃取溶剂至接近目标产物极性，达到高效萃取的目的。2.以该积雪草提取物为引，加入二棕榈酰羟脯氨酸，腺苷，角鲨烷，咖啡因四种活性成分以一定比例组合后外用，通过各个活性成分之间的协同，达到提高单成分功效的增效目的。3.将该组合成分添加至护肤品配方中，高效靶向促进人体皮肤弹性胶原再生，从而达到抑制人体皮肤衰老，去除皮肤皱纹，修复皮肤屏障，改善皮肤肤质增加皮肤的光泽感的效果。具体实施方式以下结合具体实施方式对本发明作进一步说明。下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。如无特别说明，下述所用各成分的含量为重量百分比含量。实施例1：一种积雪草活性物的提取制备方法，取干燥的积雪草全草，粉碎后过80目筛，得积雪草颗粒。将积雪草颗粒放入真空干燥器中，120℃真空干燥3h，放入干燥器中备用。取50g干燥好的积雪草颗粒，加入萃取釜，选取夹带剂比例，将选定比例的夹带剂定量加入萃取釜中，浸泡24小时后设定萃取的温度，萃取压力及夹带剂流量，开始进行萃取。萃取结束后用0.45μm微孔滤膜进行过滤，检测积雪草活性提取物的浓度。其中夹带剂为80％乙醇：甲醇＝9:1，夹带剂用量：100ml，萃取压力：30mpa，萃取温度：60℃。实施例2：与实施例1所不同的是，夹带剂为80％乙醇：甲醇＝7:1。实施例3：与实施例1所不同的是，夹带剂为80％乙醇：甲醇＝5:1。实施例4：与实施例1所不同的是，夹带剂为80％乙醇：甲醇＝7:1，夹带剂用量：300ml。实施例5：与实施例1所不同的是，夹带剂：80％乙醇：甲醇＝7:1，夹带剂用量：500ml。空白对照组1：与实施例1所不同的是，夹带剂：80％乙醇，夹带剂用量：100ml。空白对照组2：与实施例1所不同的是，夹带剂：无；夹带剂用量：0。以上实施例1-5及空白对照组1-2对同量积雪草进行提取操作后，得积雪草提取物溶液，用高效液相色谱测量5种溶液种积雪草活性物的含量，测定值如下表0所示：表1.不同工艺条件下制备得积雪草提取物含量测定值对比(％)以上测定数据表明通过超临界co2提取法，以乙醇和甲醇的混合物作为夹带剂加入后，积雪草提取的含量有较明显的提高，最高可达到90％以上。通过该方法制备的积雪草提取物可用于化妆品各类产品领域。实施例6：高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物配方：靶向促进弹性胶原再生活性组合物的制备方法为：a相制备：将配方量积雪草提取物，腺苷，咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足至100g。直至混合均匀恢复室温即可。实施例7：高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物配方：靶向促进弹性胶原再生活性组合物的制备方法为：a相制备：将配方量积雪草提取物，腺苷，咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足至100g。直至混合均匀恢复室温即可。实施例8：高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物配方：靶向促进弹性胶原再生活性组合物的制备方法为：a相制备：将配方量积雪草提取物，腺苷，咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足至100g。直至混合均匀恢复室温即可。实施例9：高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物配方：靶向促进弹性胶原再生活性组合物的制备方法为：a相制备：将配方量积雪草提取物，腺苷，咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足至100g。直至混合均匀恢复室温即可。实施例10：高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物配方：靶向促进弹性胶原再生活性组合物的制备方法为：a相制备：将配方量积雪草提取物，腺苷，咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足至100g。直至混合均匀恢复室温即可。实验例1高效靶向促进弹性胶原再生活性组合物的测试试验试验目的：考察5种活性组合物对人体皮肤弹性胶原的高效和靶向促进再生效果。试验试剂：人表皮成纤维细胞(浙江中医药大学基础医学院细胞库)，dmem细胞培养基，谷氨酰胺,hepes和细胞增殖测试试剂盒xtt均为美国gibco公司产品。实验仪器：elx800型酶联仪(美国biotek宝特公司)试验方法：1.人成纤维细胞的培养人表皮成纤维细胞采用胶原酶消化原代细胞株培养而成。原代培养细胞达到95％融合时，按一定比例进行细胞传代。实验所用的细胞为第3-5代。取第3代成纤维细胞以接种于组织培养板中。待细胞贴壁生长后，每间隔24h用xtt试剂盒测定细胞的增殖情况，持续1周。测定增殖情况的具体操作如下：用elx800型酶联仪于492nm及650nm处测od值(n＝6)，计算平均值，以均数±标准差表示。记录人成纤维细胞的正常生长曲线。2.五种活性组合物及不同浓度的单组份活性物对纤维细胞增殖的影响取第3代成纤维细胞接种于组织培养板中，每孔加入dmem培养基1ml,培养24h后，在deme细胞培养基中每孔加入0.1ml以上5种实施例成品及0.1ml不同浓度的积雪草提取物溶液(1-10mg/ml)及空白对照组，24h分别用elx800型酶联仪于492nm及650nm处测定od值(n＝6)，计算平均值，以均数±标准差表示，实验结果如下：表25种0.1ml实施例成品及空白对照组对纤维细胞增殖的影响(n＝6，p＜0.05)通过以上数据表明，单组份与空白对照组比较，单成分活性物有促进纤维细胞增殖的作用。与单成分及空白对照组实验数据进行对比，本发明中6-10实施例可明显促进纤维细胞的增殖(p＜0.05)，由此表明本发明中5中活性组分的组合物对单成分功效有复合增效的作用，具有促进皮肤胶原蛋白再生作用，其作用效果强于单成分活性物。本发明的活性组合物可被制作成柔肤水，收敛水，滋养水，面霜，眼霜，精华液，眼部精华液，洁面霜，洁面乳液，秒面膜，妆前乳，粉底液，润肤乳液，身体乳/霜，身体精华，身体清洁剂，霜剂等。实施例11：高效靶向促进弹性胶原再生面部精华液配方实施例12.高效靶向促进弹性胶原再生面部眼霜配方实施例13.高效靶向促进弹性胶原再生面部面霜配方实验例2.基于高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物应用剂型的性能检测2.1稳定性测试·高温稳定性：取适量本发明剂型实施例11～13中制备的样品，分别置于4℃、25℃、37℃、60℃环境中考察3个月，每周取样观察，结果发现本发明剂型实施例11～13中的样品在此四种条件下均保持样品原外观，未出现悬浮物，沉淀和浮油等现象。·低温稳定性：取适量本发明剂型实施例11～13中制备的样品，分别置于-5℃、-10℃、-20℃、-30℃环境中考察3个月，每周取样观察，结果发现本发明剂型实施例11～13中的样品在此四种条件下均保持样品原外观，未出现悬浮物，沉淀和浮油等现象。·离心稳定性：取本发明剂型实施例11～13中所制备的样品适量于离心管中，密封管口3000rpm离心30分钟，未观察到悬浮物、沉淀物及浮油现象，保持原来外观。2.2安全性测试(人体皮肤斑贴试验)选取20名年龄为20～50岁之间的无皮肤病过敏史的健康受试者，斑贴方法：选用合格的斑试器，以封闭式斑贴试验方式，取约15微升本发明剂型实施例11～13的样品滴于斑试器内，外用专用胶带贴覆于受试者背部，每个受试者贴50个斑试器，分别贴试剂型实施例11～13的样品，24小时后除去受试物，去除后分别于0.5、6、12、24、48小时观察皮肤反应，按照《化妆品卫生规范》中皮肤反应等级标准记录其结果。试验结果：人体皮肤斑贴试验结果显示所有受试者通过斑贴试验，在0.5、6、12、24、48小时观察皮肤反应，其中0例出现皮肤红斑、丘疹、水疱等不良反应，说明本发明的产品安全，无刺激。2.3功效测试实验仪器：皮肤水分测试仪corneometercm825；皮肤弹性测试仪cutometerdualmpa580；primos皮肤快速光学成像系统；tm300-tewamater(德国couragekhazaka公司)，senumeter(德国couragekhazaka公司)；皮肤颜色测试仪colorimtercl400(德国couragekhazaka公司)和dsmiicolormeter(丹麦cortex公司)实验人群：研究对象：选取健康受试者40例。纳入标准：①年龄35～60岁健康女性；②眼角细纹明显；③眼角皮肤缺乏弹性；③能很好配合试验者，在研究期间能保持生活的规律性；④能够阅读和理解知情同意书所有内容，并自愿签署知情同意书；⑤试验期间停止使用皮肤护理产品；⑥试验期间不再参与其他任何研究中心的临床试验；⑦试验期间同意不使用任何对结果有影响的化妆品、药物和保健品。实验方法：将受试者随机分为4组，产品组和空白对照组，每组10例，实验周期为8周。产品组在实验期间将剂型实施例11-13产品涂抹于眼角不同位置，2次/天，早晚各涂1次，连续使用8周；空白组在实验期间只使用基础保湿类化妆品，不使用具有抗皱抗衰老的功效化妆品或药品。受试者在使用前0周，使用后2，4，6，8周各随访一次，随访为同一时间。每次测试前，受试者需要清水清洁面部，在恒温恒湿环境下(20-25℃，相对湿度10％-60)测试。使用水分测试仪测定皮肤角质层水分含量，使用皮肤弹性测试仪测量眼部皮肤，通过弹性参数r5和紧致参数f4来评估该产品对眼部肌肤弹性的改善效果。r5值越接近1，皮肤弹性越好；f4值越小，皮肤越紧致。采用皮肤快读光学成像系统primos检测皮肤皱纹，sa值越低，说明皮肤皱纹越少。利用spss软件对数据进行处理和统计分析，采用t检验，p＜0.05为差异具有统计学意义。表3.空白组及实施例1-3使用8周后皮肤角质层含水量增长率％组别/含水量增长率％2周4周6周8周空白对照组0.110.000.020.02实施例113.857.6111.0213.89实施例124.548.2112.6315.54实施例134.138.9812.2814.35由表3可知，空白对照组在2周，4周，6周，8周测试时，角质层含水量数值未有明显变化，不具有统计学意义。剂型实施例组在使用2周，4周，6周，8周时，皮肤弹性参数r5逐渐上升，使用8周时增长率高达13.89-15.54％，具有统计学意义(p＜0.05)。表4.空白组及实施例11-13使用8周后眼部皮肤弹性参数r5值变化组别/r50周2周4周6周8周空白对照组0.4510.4530.4500.4490.449剂型实施例110.5180.5400.5620.5710.580剂型实施例120.4010.4250.4330.4400.445剂型实施例130.3790.3950.4060.4170.425由表4可知，空白对照组在2周，4周，6周，8周测试时，皮肤弹性参数r5数值未有明显变化，皮肤弹性未发生明显改变，不具有统计学意义。剂型实施例组在使用2周，4周，6周，8周时，皮肤弹性参数r5逐渐上升，8周时增长率高达10.97-12.13％，具有统计学意义(p＜0.05)。说明剂型实施例对改善皮肤弹性具有明显功效。表5.空白组及实施例11-13使用8周后眼部皮肤紧致参数f4值变化组别/f40周2周4周6周8周空白对照组12.65112.65012.65112.65212.651剂型实施例1112.56412.53812.52712.55012.422剂型实施例1211.98411.98011.97711.97311.867剂型实施例1312.23112.22512.21012.18312.076由表5可知，空白对照组在2周，4周，6周，8周测试时，皮肤紧致参数f4数值未有明显变化，皮肤紧致度未发生明显改变，不具有统计学意义。剂型实施例组在使用2周，4周，6周，8周时，皮肤紧致参数f4逐渐下降，8周时下降率为0.97-1.27％，p＜0.05。以上说明剂型实施例具有改善皮肤紧致度的功效。表6.空白组及实施例11-13使用8周后眼部皮肤皱纹sa值变化组别/sa0周2周4周6周8周空白对照组33.5233.5433.5733.6033.62剂型实施例1136.7435.7135.1434.5034.26剂型实施例1238.2537.0836.3136.0235.88剂型实施例1335.5834.6034.0233.3833.01由表6可知，空白对照组在2周，4周，6周，8周测试时，皮肤皱纹值sa数值未有明显变化，无显著性差异，说明皱纹增加，剂型实施例组在使用2周，4周，6周，8周时，皮肤皱纹sa值呈明显逐渐下降趋势，sa值显著减小(p＜0.05)，剂型实施例使用8周时下降率为6.18-7.21％，p＜0.05。说明剂型实施例具有改善皮肤皱纹的效果。以上数据可以看出，剂型实施例组和空白对照组对比，随着使用时间的增长，皮肤角质层含水量增长率逐渐增加，皮肤弹性参数r5值有增大趋势，皮肤紧致参数f4值逐渐减小，皮肤皱纹sa数值逐渐递减，证明本发明对皮肤抗衰老和抗皱纹有明显功效。在测试过程中，通过测试经表皮失水率，皮脂分泌量以及皮肤色度的变化，也意外发现发明中五种活性成分组合物皮肤屏障修复具有一定功效。测试方法如下：使用tm300-tewamater测量经表皮失水率，使用sebumeter测量皮脂，使用colorimetercl400检测皮肤色度得l*，a*值和e值(红斑)，m(黑色素)值，以上皮肤生理指标检测均测量3次，取其平均值。采用spss软件对实验数据进行统计分析，采用t校验对数据进行统计分析，p＜0.05为有统计学意义。测试数据如下：表7.空白组及实施例11-13使用8周后皮肤经表皮失水率(tewl)值比较(n＝30,)组别/tewl0周2周4周6周8周空白对照组19.91±5.0320.03±5.0519.96±1.9719.93±5.0119.92±5.00剂型实施例1118.33±4.9817.91±4.0117.24±3.6916.05±3.2415.17±3.01剂型实施例1217.62±5.4516.56±5.0115.74±4.7514.84±4.6114.00±4.25剂型实施例1316.79±4.3216.03±4.1115.11±3.9614.21±3.5213.13±3.08通过以上数据可以看出，空白对照组在使用0-8周皮肤经表皮失水率tewl值未有明显降低或升高的趋势，未达到统计学差异(p＞0.05)。剂型实施例组数据中测试者开始使用2周，4周，8周时，tewl值均有显著降低，下降比例高达17.24-21.80％，有统计学差异(p＜0.05)表8.空白组及实施例11-13使用8周后皮肤亮度值(l*值)比较(n＝30,)组别/l*值0周2周4周6周8周空白对照组61.20±3.1761.31±3.1561.25±3.1161.24±3.1561.29±3.12剂型实施例1160.35±4.0260.67±3.5561.09±3.2061.25±3.0161.41±2.87剂型实施例1255.14±5.0156.52±4.7156.61±4.4056.82±4.2057.06±3.94剂型实施例1358.23±4.4758.79±4.0359.23±3.8459.81±3.2560.11±3.10由表8可知，空白对照组在使用0-8周皮肤亮度值l*值未有明显降低或升高的趋势，未达到统计学差异(p＞0.05)。剂型实施例组数据中测试者开始使用2周，4周，8周时，l*值均有显著升高，升高比例高达1.7-3.2％，有统计学差异(p＜0.05)。表9.空白组及实施例11-13使用8周后皮肤红斑值(a*值)比较(n＝30,)表10.空白组及实施例11-13使用8周后皮肤红斑值(e值)比较(n＝30,)组别/e0周2周4周6周8周空白对照组16.87±2.5916.90±2.4916.88±2.5216.85±2.4416.86±2.31剂型实施例1115.55±2.1314.21±2.3213.88±2.1513.62±2.0113.43±1.94剂型实施例1216.18±1.8915.74±1.6215.28±1.5115.02±1.3414.42±1.25剂型实施例1315.87±2.2115.10±2.0114.76±1.8414.43±1.7114.09±1.54由表9,表10可知，空白对照组在使用0-8周皮肤红斑值(a*)和e值未有明显降低或升高的趋势，未达到统计学差异(p＞0.05)。剂型实施例组数据中测试者开始使用2周，4周，8周时，a*值和e值均有显著降低，a*值下降比例高达14.90-18.06％，e值下降比例高达10.87-13.63％，有统计学差异(p＜0.05)。表11.空白组及实施例11-13使用8周后皮肤黑色素(m值)比较(n＝30,)组别/m0周2周4周6周8周空白对照组35.48±2.2535.45±2.2335.50±2.1935.51±2.2035.52±2.22剂型实施例1136.56±3.5634.50±3.3933.39±3.2532.86±3.0632.51±2.75剂型实施例1234.27±2.8933.10±2.5632.39±2.4131.62±2.3031.19±2.24剂型实施例1332.17±2.2431.15±2.1030.37±1.7929.49±1.4228.55±1.37由表11可知，空白对照组在使用0-8周皮肤黑色素值(m)未有明显降低或升高的趋势，未达到统计学差异(p＞0.05)。剂型实施例组数据中测试者开始使用2周，4周，8周时，m值均有显著降低，m值下降比例高达8.98-11.25％，有统计学差异(p＜0.05)。表12.空白组及实施例11-13使用8周后皮肤皮脂分泌量比较(n＝30,)由表12可知，空白对照组在使用0-8周皮肤皮脂分泌量未有明显降低或升高的趋势，未达到统计学差异(p＞0.05)。剂型实施例组数据中测试者开始使用2周，4周，8周时，皮脂分泌量均有显著降低，下降比例高达44.86-49.89％，有统计学差异(p＜0.05)。通过以上数据可以看出，剂型实施例1-3与空白对照组相比，随着使用时间的增长，空白组tewl及l*值，a*值，e值，m值未有明显变化趋势，而剂型实施例1-3tewl值逐渐降低，皮肤亮度值l*逐渐增大红斑值a*逐渐减小，红斑值e逐渐减小，黑色素m值逐渐减小，皮脂分泌量逐渐降低。以上数据可表明本发明中5种活性组分组合物对皮肤屏障受损具有舒缓修复具有一定功效。当然，本发明的上述实施例仅为说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的具体实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述举例的基础上还可以做其他不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以详细举例。凡是属于本发明的技术方案所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。当前第1页1 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技术特征：1.用于增加积雪草活性物提取含量的夹带剂，其特征在于，包括80%乙醇、甲醇。
2.如权利要求1所述的用于增加积雪草提取物含量的夹带剂，其特征在于，所述积雪草样品:夹带剂的质量比为1:1-1:8，所述80%乙醇：甲醇的体积比范围9:1-5:1。
3.一种积雪草提取物的制备方法，其特征在于，步骤如下：
1）取干燥的积雪草全草，粉碎后过80目筛，得积雪草颗粒；
2）将积雪草颗粒放入真空干燥器中，120℃真空干燥3h，放入干燥器中备用；
3）取一定量干燥好的积雪草颗粒，加入萃取釜，选取夹带剂比例，将选定比例的夹带剂定量加入萃取釜中，浸泡24小时后设定萃取的温度、萃取压力及夹带剂流量，开始进行萃取；所述夹带剂为权利要求1或2所得夹带剂；
4）萃取结束后用0.45μm微孔滤膜进行过滤，检测积雪草活性提取物的浓度。
4.高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物，其特征在于，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，tween-801.0-1.5重量份，纯水补足至100重量份，所述积雪草提取物根据权利要求3所述的制备方法获得。
5.如权利要求4所述的高效靶向促进弹性胶原再生的活性组合物的制备方法，其特征在于，
a相制备：将配方量积雪草提取物、腺苷、咖啡因三种活性成分逐一加入水中，搅拌加热溶解至透明备用。
6.b相制备：将配方量二棕榈酰羟脯氨酸，角鲨烷，tweem-80逐一称重加入烧杯中，加入纯水，搅拌混合溶解备用。
7.在搅拌的状态下，将b相缓慢加入a相中并不断搅拌，向混合相中加入柠檬酸调节ph至5.5±0.1，加纯水补足；直至混合均匀恢复室温即可。
8.高效靶向促进弹性胶原再生面部精华液，其特征在于，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，丁二醇0.5-2.0重量份，1，2-戊二醇0.5-1.5重量份，防腐剂0.1-1.0重量份，保湿剂0.1-0.5重量份，tween-801.0-1.5重量份，纯水补足至100重量份。
9.高效靶向促进弹性胶原再生面部眼霜，其特征在于，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，丁二醇0.5-2.0重量份，1，2-戊二醇0.5-1.5重量份，保湿剂0.5-2.0重量份，tween-801.0-1.5重量份，乳化剂0.5-1.0重量份，增稠剂0.1-0.5重量份，香味剂0.05-0.5重量份，防腐剂0.1-1.0重量份，纯水补足至100重量份。
10.高效靶向促进弹性胶原再生面部面霜，其特征在于，由下述重量份的物质组成，积雪草提取物0.1-1.0重量份，二棕榈酰羟脯氨酸0.2-1.5重量份，腺苷0.1-2.0重量份，角鲨烷0.5-3.0重量份，咖啡因0.5-2.0重量份，丁二醇0.5-2.0重量份，1，2-己二醇0.5-1.5重量份，保湿剂0.5-2.0重量份，tween-801.0-1.5重量份，乳化剂0.5-1.0重量份，增稠剂0.1-0.5重量份，香味剂0.05-0.3重量份，纯水补足至100重量份。
技术总结本发明公开了高效靶向促进皮肤弹性胶原再生组合物、制备方法及应用，通过超临界CO2提取法，加入一定的夹带剂来提高积雪草提取物的纯度和活性，同时还提供一种高效且靶向促进皮肤弹性胶原再生的活性组合物及相关应用。不同的活性组合物通过不同机理而起到协同增效作用，相对于单个活性药物，组合物具有明显促进皮肤胶原再生的功效。将该组合成分添加至护肤品配方中，高效靶向促进人体皮肤弹性胶原再生，从而达到抑制人体皮肤衰老，去除皮肤皱纹，修复皮肤屏障，改善皮肤肤质增加皮肤的光泽感的效果。
技术研发人员：周慧丽;孙乐青;赵瑾;柳仁民
受保护的技术使用者：上海曜爱生物科技有限公司
技术研发日：2021.05.13
技术公布日：2021.08.03
