本发明涉及一种提取鱼油中胆固醇的方法，属于分离提纯技术领域。
背景技术：
胆固醇，又称胆甾醇。一种环戊烷多氢菲的衍生物。早在18世纪人们已从胆石中发现了胆固醇，1816年化学家本歇尔将这种具脂类性质的物质命名为胆固醇。胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等溶剂。
胆固醇在血液中存在于脂蛋白中，其存在形式包括高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇几种。在血中存在的胆固醇绝大多数都是和脂肪酸结合的胆固醇酯，仅有10％不到的胆固醇是以游离态存在的。高密度脂蛋白有助于清除细胞中的胆固醇，而低密度脂蛋白超标一般被认为是心血管疾病的前兆。
现有的提取鱼油中胆固醇的方法存在以下不足：传统的鱼油提取胆固醇的过程中产生的污染废物多，对环境污染大；同时传统的鱼油提取胆固醇的提取率低，生产成本高。
技术实现要素：
本发明的主要目的是为了解决现有技术的不足，而提供一种提取鱼油中胆固醇的方法。
本发明的目的可以通过采用如下技术方案达到：
一种提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油100～150份、氯化钙100～150份、酒精500～750份和碱剂8～15份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
优选的，所述酒精与所述鱼油的添加分量比为5：1，所述鱼油与所述碱剂的添加量为25：1。
优选的，所述碱剂为氢氧化钠。
优选的，在步骤3中，冷却皂化的温度为10～25℃。
优选的，在步骤5中，冷却结晶的温度为15～28℃。
优选的，所述胆固醇的特征是其高效液相色谱纯度为98％～99.3％。
优选的，在步骤5中，将上层液体抽出采用器具为微射流提取器。
优选的，所述纯化具体为采用超滤膜进行纯化。
优选的，在步骤5中，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min。
本发明的有益技术效果：按照本发明的提取鱼油中胆固醇的方法，本发明提供的提取鱼油中胆固醇的方法，方法最简单，制备过程中不会产生任何污染物，同时通过皂化后的能够使鱼油中的胆固醇能够分解的更加彻底，便于后期使用微射流提取器将胆固醇分离的更加彻底。
具体实施方式
为使本领域技术人员更加清楚和明确本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
本实施例提供的提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油100～150份、氯化钙100～150份、酒精500～750份和碱剂8～15份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
酒精与鱼油的添加分量比为5：1，鱼油与碱剂的添加量为25：1。碱剂为氢氧化钠。在步骤3中，冷却皂化的温度为10～25℃。在步骤5中，冷却结晶的温度为15～28℃。纯化具体为采用超滤膜进行纯化。在步骤5中，将上层液体抽出采用器具为微射流提取器。在步骤5中，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min。胆固醇的特征是其高效液相色谱纯度为98％～99.3％。
实施例1：
一种提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油100份、氯化钙100份、酒精500份和碱剂8份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却，冷却皂化的温度为10～25℃冷却后并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后采用微射流提取器将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离，冷却结晶的温度为15～28℃，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
实施例2：
一种提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油110份、氯化钙110份、酒精550份和碱剂9份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却，冷却皂化的温度为10～25℃冷却后并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后采用微射流提取器将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离，冷却结晶的温度为15～28℃，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
实施例3：
一种提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油120份、氯化钙120份、酒精600份和碱剂10份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却，冷却皂化的温度为10～25℃冷却后并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后采用微射流提取器将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离，冷却结晶的温度为15～28℃，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
实施例4：
一种提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油140份、氯化钙140份、酒精650份和碱剂13份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却，冷却皂化的温度为10～25℃冷却后并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后采用微射流提取器将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离，冷却结晶的温度为15～28℃，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
实施例5：
一种提取鱼油中胆固醇的方法，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油150份、氯化钙150份、酒精750份和碱剂15份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却，冷却皂化的温度为10～25℃冷却后并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后采用微射流提取器将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离，冷却结晶的温度为15～28℃，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
综上所述，在本实施例中，按照本实施例的提取鱼油中胆固醇的方法，本实施例提供的提取鱼油中胆固醇的方法，由实施例1～实施例5可知，实施例4制备的提取鱼油中胆固醇的方法最简单，制备过程中不会产生任何污染物，同时通过皂化后的能够使鱼油中的胆固醇能够分解的更加彻底，便于后期使用微射流提取器将胆固醇分离的更加彻底。
以上所述，仅为本发明进一步的实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明所公开的范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都属于本发明的保护范围。
1.一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：按重量份数计，取鱼油100～150份、氯化钙100～150份、酒精500～750份和碱剂8～15份；
步骤2：将步骤1中鱼油、酒精和碱剂加热至温度在75～85℃搅拌30～45min；
步骤3：将搅拌后的原料进行冷却并皂化6～9h；
步骤4：将皂化后的原料进行二次加热，当温度升到40～60℃时加入氯化钙进行搅拌并使溶液分层；
步骤5：将分层后将溶液的上层液体抽出，0.01～0.09μm微孔滤膜除杂后冷却结晶后离心分离；
步骤6：离心分离后的晶体经过纯化后得到成品胆固醇。
2.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，所述酒精与所述鱼油的添加分量比为5：1，所述鱼油与所述碱剂的添加量为25：1。
3.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，所述碱剂为氢氧化钠。
4.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，在步骤3中，冷却皂化的温度为10～25℃。
5.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，在步骤5中，冷却结晶的温度为15～28℃。
6.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，所述胆固醇的特征是其高效液相色谱纯度为98％～99.3％。
7.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，在步骤5中，将上层液体抽出采用器具为微射流提取器。
8.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，所述纯化具体为采用超滤膜进行纯化。
9.根据权利要求1所述的一种提取鱼油中胆固醇的方法，其特征在于，在步骤5中，离心的速度为8000～9500rpm，离心时间为10～35min。
技术总结