积雪苷外用制剂及其制备方法与流程

本发明属于药物制剂领域，尤其涉及增强皮肤水和程度，促进积雪草苷透皮吸收的外用制剂及其制备方法。
背景技术：
：创伤的愈合有两种形式：一种是完全性恢复，即由与原来损伤组织结构相同的细胞来修复，如胎儿早期伤口的无瘢痕性愈合，或者表浅伤的愈合；除此之外几乎所有伤口都是在上皮化的同时以瘢痕性愈合而告终。这种瘢痕是属于正常组织修复过程的产物，因而被称之为“正常瘢痕”(normalscar)。另一种是当创伤修复过程发生异常时，以胶原为主的细胞外基质成分大量沉积，发生真皮组织过度增生，出现“病理性瘢痕”(abnormalscar)，这就是“增生性瘢痕”(hypertrophicscar，hs)或者“瘢痕疙瘩”(keloid,k)，是包括ⅰ、ⅲ型胶原在内的细胞外基质(ecm)成分在组织中过度沉积和难以被机体吸收或重塑的病理状态。积雪草苷(asiaticoside)是从伞形科植物积雪草centellaasiatica(l.)urban中提取的三萜类化合物。研究表明积雪草苷可通过降低促进瘢痕增生的tgf-β1mrna的表达同时增加抑制瘢痕增生的tgf-β3mrna的表达，引起金属基质蛋白酶抑制物(timps)表达明显减少，促进i型胶原降解；也可通过增加抑制性r-smads转导信号的smad7的表达，抑制tgf-β的病理作用，阻止成纤维细胞的增殖，减弱合成和分泌蛋白的活性，减轻瘢痕增生的作用。大量的临床实践已经证实外用积雪草苷制剂对人皮肤促进创伤愈合、抑制皮肤瘢痕的形成具有明确的治疗作用。积雪草苷是一种五环三萜皂苷，分子结构中既有疏水性苷元结构又有亲水性糖链结构，弱酸性，在水溶液中极微溶解，亲脂性差等特点，不利于通过角质层扩散，生物利用度较低，因而限制了其透皮应用。如何使积雪草苷更好地通过皮肤角质层、在真皮层发挥作用、提高生物利用度一直是研究的热点。目前在积雪草苷外用制剂的研究方向主要有两个方面。一是改变积雪草苷外用制剂剂型，如将积雪草苷制备成微乳、脂质体从而提高通过角质层屏障的能力来提高生物利用度；或者制备成凝胶，利用凝胶在皮肤上附着性强，滞留时间长的作用来增加释放和吸收的时间来达到增加生物利用度的目的。另一方面，研究皮肤促渗剂种类选择和添加量、或者是几种促渗剂的复合使用来促进积雪草苷的吸收，如王淑萍等人研究了氮酮、薄荷醇和冰片三种促渗剂对于积雪草苷透皮的促进作用，研究表明相同浓度的薄荷醇和冰片促渗效果显著，且明显好于同浓度的氮酮。上述各种方式均取得一定的效果，但是各有缺点，见下表：因此如何能在保持优势的前提下尽量避免劣势情况的发生对促进积雪草苷的应用有重要意义。凝胶是将药物与适宜的凝胶基质混合制得的半固体或具有一定黏度的液体制剂，质地均匀细腻，可在皮肤上形成一层薄膜，附着性强，滞留时间长，对皮肤和黏膜无刺激性，能产生缓释或控释的释药作用，而且皮肤涂覆性能好、使用方便，制作工艺简单，作为皮肤外用制剂具有很多优势。海藻酸钠是从褐藻类的海带或马尾藻中提取碘和甘露醇之后的副产物。海藻酸钠含有大量的—coo-，在水溶液中表现出聚阴离子行为，具有一定的粘附性，可用作药物载体且在创口处具有促进神经血管生长的作用，非常有利于创口的愈合。海藻酸钠溶液当有ca2 、sr2 等阳离子存在时，交联从而形成水凝胶。海藻酸钠水凝胶作为创口愈合用敷料的制备材料具有良好的生物相容性和生物降解性，不对人体产生刺激和产生免疫反应，且有强保湿性，不但可以保持伤口表面的湿润可以减轻疼痛和避免干痂形成，大大缩短伤口愈合的时间，而且有利于皮肤表面的水合作用从而促进积雪草苷的吸收，促进愈合和抑制瘢痕的形成。但是海藻酸钠水凝胶强度较差，易断裂，皮肤涂覆和粘附性能比较差，因此应用较少。聚乙烯醇是一种极安全的高分子有机物，对人体无毒，无副作用，具有良好的生物相容性，高粘度聚乙烯醇通常用于制备膜材，在一定的使用比例下可以很好地改善海藻酸钠强度，增强海藻酸钠水凝胶的皮肤涂覆和粘附性能，另一方面起到平衡海藻酸钠凝胶酸碱度的作用，有利于积雪草苷的释放。传统的研究证明皮肤水合程度对促进药物吸收有正相关，原因在于角质层细胞能够吸收一定量的水分，自身膨胀降低结构致密度，从而促进药物渗透，尤其是角质层细胞自身的结合水含量的增加影响更显著，研究数据显示当角质层含量达到50％时，对药物的渗透吸收能力增强5-10倍。因此如何增强皮肤水和程度，特别是角质层细胞的结合水含量，对于促进积雪草苷的透皮吸收、增强治疗效果也具有重要意义。使用一定比例具有锁水保湿作用的成分可以为了促进药物吸收，皮肤外用制剂通常会使用促渗剂，氮酮可以使皮肤角质层与脂质相互作用，降低了药物向角质层间隙中脂质的相转移温度，增加流动性，使药物或活性添加剂在角质层中的扩散阻力减少，故起到很强的促渗作用，是一种常用的促渗剂，促渗效果随使用浓度增高而增加。但创口组织在愈合的过程中由于胶原蛋白的沉积造成瘢痕的形成，胶原纤维变薄，角质层缺失或正在形成过程中，较高浓度促渗剂的使用会造成创口或瘢痕组织内部生长环境发生改变，使创口愈合困难或者造成胶原纤维的无序沉积，产生病理性疤痕。因此在促进积雪草苷透皮吸收的前提下，如何将促渗剂的使用降到最低，对于促进创口愈合和抑制瘢痕的产生很重要。技术实现要素：本发明的目的是提供一种凝胶基质和保湿促渗剂的组合，增强皮肤水和程度，促进积雪草苷透皮吸收的积雪草苷外用制剂。为了实现上述发明目的，本发明采用了如下技术方案：积雪草苷外用制剂，包括积雪草苷和凝胶基质及其他药用辅料制备得到。积雪草苷外用制剂，其特征在于所述的基质材料是卡波姆、海藻酸钠、聚乙烯醇中的一种或多种组合。作为优选，所述的积雪草苷外用制剂，其它药用辅料包括保湿促渗剂。作为优选，所述的基质材料是海藻酸钠和聚乙烯醇。作为优选，所述的海藻酸钠和聚乙烯醇的重量百分比为10:0.5-10:3。作为优选，所述的保湿促渗剂是水溶性氮酮和乳酸钾。作为优选，所述乳酸钾和水溶性氮酮的重量百分比为2:1-20:1。作为优选，所述乳酸钾和水溶性氮酮的重量百分比为12：1。作为优选，其它药用辅料还包括溶剂和ph调节剂。本发明积雪草苷外用制剂通过乳酸钾和水溶性氮酮作为保湿渗透剂，软化皮肤角质层并增强积雪草苷的透皮效果，解决了积雪草苷不易透皮吸收的问题，同时具有锁水作用，尤其是角质层细胞自身的结合水，增强药物的渗透吸收能力，具有保湿效果好、皮肤涂覆性高的特点，采用了海藻酸钠和聚乙烯醇作为凝胶基质获得凝胶具有良好的生物相容性和生物降解性，且有强保湿性，有利于皮肤表面的水合作用从而促进积雪草苷的吸收，同时采用聚乙烯醇改善海藻酸钠强度，增强海藻酸钠水凝胶的皮肤涂覆和粘附性能，另一方面起到平衡海藻酸钠凝胶酸碱度的作用，有利于积雪草苷的释放。附图说明图1：积雪草苷溶液标准曲线图；图2：经皮稳态释放速率对比图；图3：实施例1积雪草苷凝胶皮内滞留检测液相图；图4：市售积雪草苷霜软膏皮内滞留检测液相图。具体实施方式实施例1：制备1000g积雪草苷凝胶，采用如下物料：积雪草苷25g、甘油50g、丙二醇40g，海藻酸钠15g、聚乙烯醇1.5g，乳酸钾12g，水溶性氮酮1g、三乙醇胺4g，水851.5g。制备方法：1、将处方量积雪草苷、甘油、丙二醇涡旋混合，加热到80℃得积雪草苷溶液；2、取水300g,将乳酸钾12g，水溶性氮酮1g加入水中溶解得乳酸钾氮酮溶液，将上述积雪草苷溶液加入乳酸钾氮酮溶液中，搅拌均匀。3、取余下的水，将海藻酸钠、pva分散在水中，带溶胀完全，将上述步骤2所得的溶液加入其中，低速搅拌均匀。4、取三乙醇胺加入上述步骤3所得的溶液，低速搅拌均匀即可。本实施例所得的积雪草苷海藻酸钠凝胶，制备工艺简单，采用了海藻酸钠和聚乙烯醇作为凝胶基质，并添加乳酸钾与氮酮复配使用，将促渗剂氮酮的添加量降低0.1％，生物相容性好，特别是新鲜创口和创伤愈合早期时使用具无不良反应、安全性高的特点。本实施例所得积雪草苷海藻酸钠凝胶锁水保湿性强，提高皮肤水合程度，大幅度地提高了积雪草苷的透皮吸收率，提高了生物利用度。对比实验测试样品为按照实施例1制备的积雪草苷海藻酸钠凝胶。对照样品采用市售的积雪草苷霜软膏，生产厂家为上海现代制药股份有限公司，含量为2.5％，规格：30g/支。分析方法：hplc法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-2mmol/lβ-环糊精溶液(24:76)为流动相；进样量10μl；检测波长为205nm。理论塔板数按积雪草苷峰计算应不低于5000。取积雪草苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml中分别含积雪草苷0.2mg、0.4mg、0.8mg、1.0mg、1.2mg的溶液，线性范围为0.1-5ug。制备标准曲线方程为a＝2225.9m 4.8933,r2＝0.9997(其中，m为积雪草苷的进样量,a为峰面积)。见图1。根据积雪草苷的峰面积，计算透过液中的含量(cx),单位为mg/ml。测试方法1:透皮扩散试验预先处理的小鼠腹部脱毛皮肤固定在frangz扩散池的给药池与接收池间，分别取对照样品积雪草苷霜软膏和测试样品积雪草苷海藻酸钠凝胶1g均匀涂覆在鼠皮上。接收液为20％乙醇的生理盐水溶液，使真皮一侧与接收液完全接触，注意除去接触面的气泡。接收液体积为6.5ml，有效扩散面积为2.87cm2,试验温度为37±1℃，搅拌速度800rpm。分别与2、4、6、8、24h时取样1ml(同时补充同温等量接收液)，经0.22um滤膜过滤，按照上述分析方法测定积雪草苷的含量。每个样品平行试验3次，按照下述式(1)计算单位面积累积透过量q1/ug·cm-2及和式(2)计算经皮稳态渗透速率js/ug·cm-2/h-1式(1)：q1＝(含量(cx)×6.5×103)/2.87式(2)：js＝q1/t，t分别为2、4、6、8、24h。以t对q1作图，结果见图2：具体实施例1制造的积雪草苷凝胶稳态释放速率明显优于市售对照样品积雪草苷霜软膏；积雪草苷凝胶24小时总透过量是市售对照样品积雪草苷霜软膏24小时总透过量的1.75倍(两者分别是76.41％、43.73％)。体现了积雪草苷凝胶优异的生物利用性能。测试方法2：释放能力的测定透皮试验结束后，立即取下离体皮肤，用棉签除去受试样品，皮肤用pbs冲洗干净，滤纸吸干水分，剪碎后置5ml离心管中，加甲醇1ml浸泡过夜，经0.22um滤膜过滤，按照上述分析方法测定积雪草苷的含量。计算样品的皮内滞留量(q2),结合测试方法1，按照下式(3)计算)的总透过量qt,比较不同样品的释放程度。式(3)qt＝q1 q2结果见图3和图4：积雪草苷霜软膏皮内滞留积雪草苷积分峰面积451.24，根据标准曲线方程计算滞留量为20.05ug；根据上述式3计算总释放量为10952.55ug积雪草苷凝胶皮内滞留积雪草苷积分峰面积345.96，根据标准曲线方程计算滞留量为15.32ug。根据上述式3计算总释放量为194117.82ug。两者24小时释放量和滞留量的关系见下表1.样品试验样品量(g)释放量(ug)释放比例皮内滞留量滞留比例软膏110952.5543.81％20.050.08％凝胶119117.8276.47％15.320.06％测试结果表明积雪草苷凝胶具有显著的释放性能。相对于透过性能，积雪草苷凝胶略好于市售的积雪草软膏。当前第1页12